一种新型酵母诱导型启动子及其应用

    公开(公告)号:CN107236732A

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201710441486.6

    申请日:2017-06-13

    CPC classification number: C07K14/395 C12N15/10 C12Q2531/113

    Abstract: 本发明提供了一种新型酵母诱导型启动子及其应用,属于分子生物学技术领域。其技术方案为:其为序列表中序列1所示的DNA序列;该启动子长度为673bp。本发明的有益效果为:本发明的酵母诱导型启动子DDI2,其可被氰胺高效诱导,启动子强度与已知诱导型强启动子GAL1相近,比组成型启动子ADH1强,且诱导时不用更换培养基,可通过诱导时间和诱导剂的量控制基因的表达量,与常用的GAL1启动子相比在时间成本和价格成本上更具优势。流式细胞仪检测结果显示DDI2启动子强度大于ADH1启动子,与GAL1启动子强度相近,且所需诱导时间少于GAL1启动子,不用更换培养基。通过Western和流式细胞仪检测结果,可以得到DDI2启动子强度在诱导物浓度为5‑8mM时达到最大。

    一种提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法

    公开(公告)号:CN106434700A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201610692224.2

    申请日:2016-08-19

    CPC classification number: Y02E50/17 C07K14/395 C12N15/81 C12N2800/102 C12P7/06

    Abstract: 本发明提出了一种提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法。它是利用基因工程手段得到酿酒酵母的spt15定点饱和突变基因,并连接到表达载体pYES2NTc上,构建突变库,共得到了12个单点突变基因,与野生型基因spt15,spt3及对照基因Neo基因构建重组质粒,分别用醋酸锂法转入酿酒酵母INVSC1中,得到15个重组的酿酒酵母菌株。以葡萄糖为底物,将重组酿酒酵母接种发酵,测定其乙醇产率,其中重组酿酒酵母菌INVSC1-SPT15-M,INVSC1-SPT15-N,乙醇产率大幅度提高,分别为43.0±0.9g/L和43.7±0.2g/L。比对照菌株INVSC1-Neo分别增加17.8%和19.7%。2个突变基因在127位分别由赖氨酸突变为甲硫氨酸和天冬酰胺。本发明方法简单,操作容易,乙醇产率提高效果明显。具有很好的经济效益和社会效益。

    凝集性酵母及其制备方法

    公开(公告)号:CN101983240B

    公开(公告)日:2012-11-14

    申请号:CN200980107511.0

    申请日:2009-03-18

    CPC classification number: C07K14/395 C12N15/81 C12N15/815 C12P7/06 Y02E50/17

    Abstract: 通过将外源的凝集性基因导入马克斯克鲁维酵母菌,提供适于生物乙醇的工业生产的、具有耐热性和凝集性的新型马克斯克鲁维酵母转化株,以及该转化株的有效制备方法。作为用于赋予马克斯克鲁维酵母凝集性的外源基因,本发明人等着眼于酿酒酵母的凝集性基因FLO,制备了含有已知表达启动子序列和源于酿酒酵母的FLO基因序列的线状DNA片段。将该线状DNA片段导入马克斯克鲁维酵母菌,结果,确认能够高效地得到马克斯克鲁维酵母转化株,同时作为预料之外的结果,确认上述转化株的凝集性显著提高,从而完成了本发明。

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