公开(公告)号：CN103409392B

公开(公告)日：2015-06-03

申请号：CN201310317927.3

申请日：2013-07-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  堵国成 ,  刘龙 ,  李江华 ,  杨海泉 ,  邓壮梅

IPC: C12N9/28 ,  C12N15/56 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公布了一种热稳定的淀粉酶突变体及其制备方法，属于遗传工程领域。本发明以嗜碱芽孢杆菌（Bacillus alcalophilus）JN21(CCTCC NO:M2011231)淀粉酶为母本，采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变，在淀粉酶催化结构域内引入一对或多对二硫键，获得了具有较高热稳定性的淀粉酶突变体。在此改造条件下，嗜碱芽孢杆菌淀粉酶在60℃的半衰期由对照（突变前）例的3.2min提高到22.3min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

公开(公告)号：CN103484441B

公开(公告)日：2015-05-13

申请号：CN201310422992.2

申请日：2013-09-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  刘龙 ,  邓壮梅 ,  堵国成 ,  杨海泉

IPC: C12N9/28 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其制备方法和应用，属于酶工程领域。本发明利用分子生物学技术进行多轮定点突变获得了热稳定性提高的淀粉酶突变体，所得淀粉酶在60℃的半衰期由对照（突变前）例的3.2min提高到23.9min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

公开(公告)号：CN103484441A

公开(公告)日：2014-01-01

申请号：CN201310422992.2

申请日：2013-09-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  刘龙 ,  邓壮梅 ,  堵国成 ,  杨海泉

IPC: C12N9/28 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其制备方法和应用，属于酶工程领域。本发明利用分子生物学技术进行多轮定点突变获得了热稳定性提高的淀粉酶突变体，所得淀粉酶在60℃的半衰期由对照（突变前）例的3.2min提高到23.9min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

公开(公告)号：CN102994474A

公开(公告)日：2013-03-27

申请号：CN201210593202.2

申请日：2012-12-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  堵国成 ,  刘龙 ,  李江华 ,  杨海泉 ,  邓壮梅

IPC: C12N9/28 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N15/56 ,  C12N15/10 ,  C12R1/07 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公布了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其应用，属于遗传工程领域。本发明以嗜碱芽孢杆菌（Bacillus alcalophilus）JN21(CCTCC NO:M 2011231)淀粉酶为母本，采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变。在此改造条件下，嗜碱芽孢杆菌淀粉酶在50°C的半衰期由对照（突变前）例的15.3min提高到43.8min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

公开(公告)号：CN102994474B

公开(公告)日：2015-04-15

申请号：CN201210593202.2

申请日：2012-12-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  堵国成 ,  刘龙 ,  李江华 ,  杨海泉 ,  邓壮梅

IPC: C12N9/28 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N15/56 ,  C12N15/10 ,  C12R1/07 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公布了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其应用，属于遗传工程领域。本发明以嗜碱芽孢杆菌（Bacillus alcalophilus）JN21(CCTCC NO:M 2011231)淀粉酶为母本，采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变。在此改造条件下，嗜碱芽孢杆菌淀粉酶在50°C的半衰期由对照（突变前）例的15.3min提高到43.8min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

公开(公告)号：CN103409392A

公开(公告)日：2013-11-27

申请号：CN201310317927.3

申请日：2013-07-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  堵国成 ,  刘龙 ,  李江华 ,  杨海泉 ,  邓壮梅

IPC: C12N9/28 ,  C12N15/56 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公开了一种热稳定的淀粉酶突变体及其制备方法，属于遗传工程领域。本发明以嗜碱芽孢杆菌（Bacillus alcalophilus）JN21(CCTCC NO:M2011231)淀粉酶为母本，采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变，在淀粉酶催化结构域内引入一对或多对二硫键，获得了具有较高热稳定性的淀粉酶突变体。在此改造条件下，嗜碱芽孢杆菌淀粉酶在60℃的半衰期由对照（突变前）例的3.2min提高到22.3min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

公开(公告)号：CN104263708B

公开(公告)日：2017-02-15

申请号：CN201410461796.0

申请日：2013-09-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  刘龙 ,  邓壮梅 ,  堵国成 ,  杨海泉

IPC: C12N9/28 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其制备方法和应用，属于酶工程领域。本发明利用分子生物学技术进行多轮定点突变获得了热稳定性提高的淀粉酶突变体，所得淀粉酶在60℃的半衰期由对照(突变前)例的3.2min提高到23.9min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

公开(公告)号：CN104263708A

公开(公告)日：2015-01-07

申请号：CN201410461796.0

申请日：2013-09-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  刘龙 ,  邓壮梅 ,  堵国成 ,  杨海泉

IPC: C12N9/28 ,  C12N15/70

CPC classification number: C12N9/2417 ,  C12Y302/01001

Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其制备方法和应用，属于酶工程领域。本发明利用分子生物学技术进行多轮定点突变获得了热稳定性提高的淀粉酶突变体，所得淀粉酶在60℃的半衰期由对照(突变前)例的3.2min提高到23.9min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。