公开(公告)号：CN110343654B

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN201910755446.8

申请日：2019-08-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  李晓玉 ,  沈微

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N9/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的基因工程菌，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明将SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，以pET‑28a为载体构建重组质粒pET‑28a‑SPase，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，构建得到重组大肠杆菌，发酵产重组蔗糖磷酸化酶，得到高产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌菌株，其发酵胞内破壁上清酶活为504.19U/mL，比酶活为145.19U/mg，其稳定的产酶性可以为进一步的理论研究和实际生产应用打下基础，实践应用意义重大。

公开(公告)号：CN110452845B

公开(公告)日：2021-03-02

申请号：CN201910754470.X

申请日：2019-08-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  李晓玉 ,  沈微

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/10 ,  C12P19/02 ,  C12P19/44 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌，属于微生物技术领域。本发明将SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，以pET‑28a为载体构建重组质粒pET‑28a‑SPase，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，构建得到重组大肠杆菌，发酵产重组蔗糖磷酸化酶，并通过紫外诱变法对构建好的重组菌进行诱变，筛选出高产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌菌株，其发酵胞内破壁上清酶活为819.16U/mL，比酶活为206.91U/mg，其稳定的产酶性可以为进一步的理论研究和实际生产应用打下基础，实践应用意义重大。

公开(公告)号：CN110452845A

公开(公告)日：2019-11-15

申请号：CN201910754470.X

申请日：2019-08-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  李晓玉 ,  沈微

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/10 ,  C12P19/02 ,  C12P19/44 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌，属于微生物技术领域。本发明将SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，以pET-28a为载体构建重组质粒pET-28a-SPase，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，构建得到重组大肠杆菌，发酵产重组蔗糖磷酸化酶，并通过紫外诱变法对构建好的重组菌进行诱变，筛选出高产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌菌株，其发酵胞内破壁上清酶活为819.16U/mL，比酶活为206.91U/mg，其稳定的产酶性可以为进一步的理论研究和实际生产应用打下基础，实践应用意义重大。

公开(公告)号：CN111621483B

公开(公告)日：2021-11-23

申请号：CN202010506895.1

申请日：2020-06-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  夏媛媛 ,  李晓玉 ,  沈微 ,  曹钰 ,  杨海泉

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A23L29/00 ,  A23L33/10 ,  A23L33/13 ,  A23L33/195 ,  A61K38/45 ,  A61K8/66 ,  A61Q19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的蔗糖磷酸化酶突变体的热稳定性较野生型有了明显的改善，蔗糖磷酸化酶突变体T219L和I31F/T219L/S360A/T263L在50℃下具有较好的热稳定性，半衰期大约为50min，相比野生型提高了35min左右。

公开(公告)号：CN110343654A

公开(公告)日：2019-10-18

申请号：CN201910755446.8

申请日：2019-08-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  李晓玉 ,  沈微

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N9/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的基因工程菌，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明将SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，以pET-28a为载体构建重组质粒pET-28a-SPase，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，构建得到重组大肠杆菌，发酵产重组蔗糖磷酸化酶，得到高产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌菌株，其发酵胞内破壁上清酶活为504.19U/mL，比酶活为145.19U/mg，其稳定的产酶性可以为进一步的理论研究和实际生产应用打下基础，实践应用意义重大。

公开(公告)号：CN111621483A

公开(公告)日：2020-09-04

申请号：CN202010506895.1

申请日：2020-06-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  夏媛媛 ,  李晓玉 ,  沈微 ,  曹钰 ,  杨海泉

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A23L29/00 ,  A23L33/10 ,  A23L33/13 ,  A23L33/195 ,  A61K38/45 ,  A61K8/66 ,  A61Q19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的蔗糖磷酸化酶突变体的热稳定性较野生型有了明显的改善，蔗糖磷酸化酶突变体T219L和I31F/T219L/S360A/T263L在50℃下具有较好的热稳定性，半衰期大约为50min，相比野生型提高了35min左右。