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公开(公告)号：CN115850394A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202310036130.X
申请日：2023-01-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/085 , C07K19/00 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/125 , A61K39/385 , A61P31/14 , C07K16/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种塞内卡病毒VP2结构蛋白的B细胞表位及应用。本发明使用Pepscan和生物信息学预测方法鉴定获得了SVA株CH/FJ/2017中VP2蛋白的一个B细胞表位肽(IDE)；所述B细胞表位肽具有良好的免疫原性，可以作为抗原能够检测塞内卡病毒抗体或抗塞内卡病毒VP2蛋白的抗体，而且所述B细胞表位肽不与其他表位交叉反应，具有良好的特异性；所述的线性B细胞表位(IDE)肽在SVA流行毒株中完全保守；而且所述的B细胞表位肽具有一定的中和活性，可以在一定程度上有效阻断SVA感染。
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公开(公告)号：CN114921397A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210619983.1
申请日：2022-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/125
Abstract: 本发明属于生物医药领域，涉及一种表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的枯草芽孢杆菌及应用。本发明将表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的重组质粒转化至枯草芽孢杆菌WB800N，获得了一种表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的重组枯草芽孢杆菌；所述重组枯草芽孢杆菌在高效表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的同时，具有良好的免疫反应性，能够诱导机体产生体液免疫应答和细胞免疫应答。还可以作为黏膜疫苗，经口服免疫后，产生较高水平的抗原特异性IgG抗体及黏膜sIgA抗体，升高外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞的比例，刺激脾脏淋巴细胞增殖，并促进细胞因子IFN‑γ、IL‑2和IL‑4的表达。
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公开(公告)号：CN114410587A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202210029737.0
申请日：2022-01-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/34 , C12N15/867 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及非洲猪瘟病毒技术领域，具体涉及一种提高非洲猪瘟病毒非靶细胞MA‑104细胞系感染滴度的方法。将非洲猪瘟病毒的D1133L基因片段插入慢病毒载体中，得到重组慢病毒载体，然后将重组慢病毒转染MA104细胞系，得到稳定表达D1133L基因的MA‑104细胞系MA‑104/D1133L，利用该细胞系接种非洲猪瘟病毒，可大大提高非洲猪瘟病毒滴度。感染ASFV后的MA‑104/D1133L可以多次收毒。本发明得到的MA‑104/D1133L细胞株与野生型MA‑104相比，ASFV病毒滴度显著提高。
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公开(公告)号：CN114316037A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210011223.2
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s作为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，获得一株高效分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体m19。间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m19对O型不同谱系毒株均具有很好的反应性，而不和A型不同谱系毒株反应。利用单克隆抗体m19和O型结构蛋白兔抗血清建立了O型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒，相较于现有抗体，显著提高了检测结果的灵敏度和特异性，适用于O型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，同时，也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号：CN112076314B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202011020241.4
申请日：2020-09-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 茹毅 , 刘华南 , 张贵财 , 杨帆 , 李丹 , 郭建宏 , 何继军 , 张娇燕 , 李亚军 , 马坤 , 伍春平 , 郝荣增 , 卢炳州 , 田宏 , 朱紫祥 , 张克山 , 曹伟军 , 刘永杰 , 靳野 , 马旭升 , 党文
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种A型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明以我国2013年A型口蹄疫病毒流行株(A/GDMM/2013)的三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的氨基酸序列为基础进行优化设计，并借助小泛素样融合蛋白(SUMO)，筛选出单个质粒在大肠杆菌中同时高效、均一、可溶性表达这三种结构蛋白，且三种病毒结构蛋白成功在体外自组装；最终获得的目标蛋白约占菌体总蛋白30％以上，纯化后目标蛋白产量最高可达150mg/L。用本发明方法制备的口蹄疫疫苗，对我国A型口蹄疫流行毒具有良好的保护作用，疫苗最小全保护免疫剂量可低至20μg/头份。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113509489A
公开(公告)日：2021-10-19
申请号：CN202110442796.6
申请日：2021-04-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K33/04 , A61P31/20 , A61K31/195
Abstract: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域，具体涉及亚硒酸钠(Na2SeO3)或含有亚硒酸钠的组合物用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明首先发现，亚硒酸钠能够抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72的表达，抑制非洲猪瘟病毒基因拷贝数和病毒滴度，能够抑制ASFV的复制和感染，用于预防或治疗非洲猪瘟；同时，本发明发现，亚硒酸钠和EGTA的组合物能够显著抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72的表达，抑制ASFV的复制和感染；并且所述组合物对ASFV的抑制效果显著优于单独使用亚硒酸钠和EGTA，可用于预防或治疗非洲猪瘟。
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公开(公告)号：CN112852761A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110248651.2
申请日：2021-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株Δ20/40的构建及作为疫苗的应用。本发明采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFVCN/GS/2018中联合缺失了MGF‑110‑9L基因和MGF‑360‑9L基因编码蛋白的功能，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株；所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康，且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
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公开(公告)号：CN112500478A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011452597.5
申请日：2020-12-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种抗非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ6及其制备方法。ScFv抗体VH‑VLλ6的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，ScFv抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明从自然感染非洲猪瘟免疫耐过猪的外周血中分离得到淋巴细胞，提取分离淋巴细胞的总mRNA，通过RT‑PCR的方法得到总cDNA片段，以cDNA为模板，在相应的带有Linker接头的引物的作用下，通过SOE‑PCR的方法得到猪源ScFv抗体基因序列，将ScFv抗体基因序列构建至PET‑30a载体，转化BL21（DE3）感受态细胞，筛选得到一个针对于非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ6，对筛选得到的ScFv抗体VH‑VLλ6进行初步活性鉴定发现此抗体具有非洲猪瘟反应活性。本发明的提出为非洲猪瘟的早期诊断与防控提供新的材料，为尽快控制非洲猪瘟的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号：CN111996202A
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN202010212908.4
申请日：2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨帆 , 朱紫祥 , 魏婷 , 曹伟军 , 刘华南 , 郑敏 , 张伟 , 田宏 , 张克山 , 刘永杰 , 党文 , 马旭升 , 李丹 , 茹毅 , 何继军 , 郭建宏 , 刘湘涛
IPC: C12N15/41 , C12N15/42 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种重组O型口蹄疫病毒VP1基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明通过对SVV/FJ/001株进行基因缺失突变改造，同时在SVA cDNA中融合进O型口蹄疫病毒的VP1基因，得到塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的外源FMDV VP1基因，且表达产物具有良好的反应原性；制备得到的疫苗株抗原产能高，致病性显著降低甚至对猪无致病性，灭活疫苗免疫动物后不仅能激发SVA的免疫应答，而且能产生针对融合基因的免疫活性，该疫苗株显著提高了生物安全性，可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
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公开(公告)号：CN111773383A
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN202010630218.0
申请日：2020-07-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 茹毅 , 刘华南 , 张贵财 , 杨帆 , 李丹 , 郭建宏 , 何继军 , 张娇燕 , 李亚军 , 马坤 , 伍春平 , 郝荣增 , 田宏 , 张克山 , 曹伟军 , 马旭升 , 党文 , 靳野
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种具有交叉保护作用的O型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明首先通过血清交叉中和试验，筛选中意外地发现对我国O型口蹄疫流行毒具有广泛交叉中和作用的毒株；以该毒株三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的氨基酸序列为基础进行优化设计，并借助小泛素样融合蛋白(SUMO)，筛选出单个质粒在大肠杆菌中同时高效、均一、可溶性表达这三种结构蛋白，且三种病毒结构蛋白成功在体外自组装；最终获得的目标蛋白约占菌体总蛋白30％-35％，纯化后目标蛋白产量最高可达150mg/L。由这三种口蹄疫病毒结构蛋白配制的口蹄疫疫苗，最小全保护免疫剂量可低至20μg/头份，且对我国多株O型口蹄疫流行毒具有广泛交叉保护作用。
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