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公开(公告)号：CN110624100B
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN201910839428.8
申请日：2019-09-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物医药领域，具体涉及口蹄疫病毒3D蛋白作为TLR3通路激活剂的应用。本发明发现口蹄疫病毒3D蛋白不仅能够促进poly（I:C）诱导的TLR3通路的激活，而且自身也可以在无poly（I:C）条件下促进TLR3通路的激活；并且，本发明发现口蹄疫病毒3D蛋白能够促进TLR3蛋白水平的增加，可用于制备与poly（I:C）功能类似的干扰素诱导的相关药物，从而在无poly（I:C）条件下促进TLR3通路的激活。
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公开(公告)号：CN112481220A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011206761.4
申请日：2020-11-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , C07K16/08 , C12P21/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及抗非洲猪瘟病毒解旋酶D1133L的单克隆抗体以及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本发明采用小鼠腹腔培养和体外细胞培养杂交瘤细胞7D12制备单克隆抗体，效价测定检测结果表明，本发明杂交瘤细胞株7D12所分泌的单克隆抗体诱导小鼠产生的腹水抗体效价为107，杂交瘤细胞培养上清的效价达到1:1280。本发明制备的单克隆抗体为研究ASFV解旋酶功能及其分子机制积累了关键性的生物学材料，基于该单克隆抗体本身生物学特性建立的间接免疫荧光抗原检测方法为ASFV精准、快速诊断提供了支撑，本发明制备的单克隆抗体能显著抑制或者阻断ASFV复制为ASFV预防和治疗提供了可能的产品支持。
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公开(公告)号：CN111040031B
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN201911283478.9
申请日：2019-12-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗非洲猪瘟病毒ScFv抗体及其制备方法，本发明从自然感染非洲猪瘟免疫耐过猪的外周血中分离得到淋巴细胞，提取分离到的淋巴细胞的总mRNA，通过RT‑PCR的方法得到总cDNA片段，以cDNA为模板，在相应的带有Linker接头的引物的作用下，通过SOE‑PCR的方法得到猪源ScFv抗体基因序列，将ScFv抗体基因序列连接至PET‑30a载体，然后转化BL21感受态细胞，从转化后的单个菌落中筛选得到针对于非洲猪瘟病毒的ScFv抗体，采用ELISA试验对筛选得到的ScFv抗体进行初步活性鉴定，表明此抗体具有非洲猪瘟反应活性。本发明的提出为非洲猪瘟的早期诊断与防控提供新的材料，为尽快控制非洲猪瘟的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号：CN110628698B
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN201910935029.1
申请日：2019-09-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种使用悬浮细胞系制备塞内卡病毒的方法，所述方法包括如下步骤：(1)将非悬浮BHK‑21细胞系驯化为悬浮BHK‑21‑S细胞系；(2)使用步骤(1)得到的悬浮BHK‑21‑S细胞系培养制备塞内卡病毒。本发明通过采用驯化得到的悬浮BHK‑21‑S细胞系进行塞内卡病毒的培养，有效提高了所得病毒的产能，为规模化大量生产塞内卡疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号：CN111593028A
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN202010294850.2
申请日：2020-04-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及缺失MGF360-9L基因的非洲猪瘟病毒减毒株及其应用。非洲猪瘟病毒的MGF360-9L基因具有显著抑制宿主面应应答的功能，所述缺失MGF360-9L基因的非洲猪瘟病毒减毒株是采用基因工程手段，利用同源重组的方法从ASFV CN/GS/2018分离株全基因组中敲除基因MGF-360-9L，以此达到毒力减弱的目的。经过靶动物仔猪动物实验表明，本发明所述的MGF360-9L单基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株具有良好的使用安全性，可作为制备非洲猪瘟疫苗的候选毒株。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111394367A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010212460.6
申请日：2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/41 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种塞内卡病毒重组核酸、重组疫苗株及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了塞内卡病毒重组核酸、包含所述重组核酸的塞内卡重组病毒、由所述重组核酸编码的塞内卡重组病毒、包含所述塞内卡重组病毒的塞内卡重组疫苗株及其制备方法和应用。本发明制备出了抗原产能高、致病性显著降低甚至对猪无致病性、抗体应答强、免疫保护率高等为特征的疫苗株，该疫苗株显著提高了生物安全性，可用于我国及周边国家塞内卡病毒的防控。
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公开(公告)号：CN110577934B
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN201910871910.X
申请日：2019-09-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及敲低TLR4基因猪肺泡巨噬细胞系的构建方法及其应用。该猪肺泡巨噬细胞系的保藏编号为：CCTCC NO：C2019174。敲低TLR4基因猪肺泡巨噬细胞系的构建方法：将含有sgRNA的重组慢病毒转染猪肺泡巨噬细胞，经抗性筛选得到所述TLR4基因敲低的猪肺泡巨噬细胞系；所述sgRNA由SEQ ID NO.1～2所示核苷酸序列退火得到。本发明构建的敲低TLR4基因猪肺泡巨噬细胞系可以促进口蹄疫病毒复制，与未敲低的细胞系相比，该敲低TLR4基因猪肺泡巨噬细胞系中口蹄疫病毒复制量是前者的2～3倍。
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公开(公告)号：CN110042083A
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201910249993.9
申请日：2019-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及稳定表达MAP3K8蛋白的BHK-21细胞株及其构建和应用。该细胞株命名为BHK-21/MAP3K8，保藏编号为CCTCC NO:C2018261。细胞株制备：目的基因MAP3K8合成，重组慢病毒载体Lv-MAP3K8构建，包装表达MAP3K8的慢病毒，慢病毒感染BHK-21细胞，经筛选、培养和鉴定获得稳定表达MAP3K8蛋白的BHK-21细胞株。和BHK-21相比较，BHK-21/MAP3K8细胞株更有利于FMDV或SVV复制，更适合FMDV或SVV疫苗的研制和生产，同时为研究MAP3K8的基因功能提供了可靠材料。
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公开(公告)号：CN116751770B
公开(公告)日：2025-04-15
申请号：CN202310911305.7
申请日：2023-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于遗传密码子扩展技术和生物正交翻译系统在脯氨酰寡肽酶(POP)的特定氨基酸残基定点引入非天然氨基酸修饰的方法。所述方法包括使用遗传密码子扩展技术在POP蛋白基因编码区引入提前终止密码子，利用生物正交翻译系统通读琥珀终止密码子UAG，在非天然氨基酸存在的条件下，将非天然氨基酸定点引入POP蛋白，不仅可以条件性的控制POP蛋白的表达，还可利用含特殊基团的非天然氨基酸特异性标记POP蛋白，通过光照交联在与细胞内相互作用的蛋白质间形成稳定共价键，为细胞内POP蛋白质相互作用的研究提供有力的手段；也可用于POP蛋白功能及翻译后修饰研究。
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公开(公告)号：CN117467617B
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202311360016.9
申请日：2023-10-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/87 , A61K35/22 , A61K31/7105 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种敲除vimentin基因的MA‑104细胞系MA‑104‑KO‑vimentin及其构建方法和应用。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的保藏编号为CCTCC:C2023142或CCTCC:C2023229。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的构建方法，包括：（1）gRNA设计。（2）将gRNA通过瞬时转染到细胞中，通过CAT Tool分析切割效率，选择切割效率最高的gRNA用于生产KO细胞系。（3）单克隆细胞培养。（4）单克隆细胞筛选。本发明利用CRISPR‑Cas9系统构建了稳敲除vimentin基因的MA‑104细胞系。
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