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公开(公告)号：CN114075264B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202111361588.X
申请日：2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用，属于生物医药技术领域；所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种；所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著促进ASFV致敏免疫细胞增殖，并且能够通过促进猪CD4+T及CD8+T淋巴细胞分泌IFN‑γ促进猪机体产生ASFV抗原特异性免疫应答。免疫动物后，能显著促进猪机体免疫应答。本发明所述多肽或者由多肽聚合得到的多肽聚合物能够用于制备非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN114107228B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202111335696.X
申请日：2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 冯涛 , 李攀 , 刘华南 , 石正旺 , 马昭 , 申超超 , 齐晓兰 , 吴盼雪 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种缺失十二个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失G‑ACD‑00190、MGF 110‑9L、G‑ACD‑00210、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株；所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康、免疫后在猪血液内检测不到病毒的存在，且能够对ASFVCN/GS/2018强毒株攻毒提供100％免疫保护，可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
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公开(公告)号：CN113248574B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202110515657.1
申请日：2021-05-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/085 , C12N15/70 , C12N15/62 , C07K1/22 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种高效表达A型塞内卡病毒结构蛋白的方法。本发明首先对编码A型塞内卡病毒三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的基因进行原核表达密码子优化，并借助小泛素样融合蛋白，获得了在大肠杆菌中同时可溶性表达三种结构蛋白的单个质粒；其次，在大肠杆菌中转入分子伴侣质粒和上述A型塞内卡病毒结构蛋白质粒，进一步提高了A型塞内卡病毒结构蛋白的可溶性表达，并解决了目标蛋白表达量不均一的问题，获得的目标蛋白约占菌体总蛋白25％以上；由表达获得的三种结构蛋白配制获得的塞内卡病毒病亚单位疫苗，能够激发猪体产生较高水平的中和性抗体，对国内A型塞内卡流行毒具有良好的保护作用。
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公开(公告)号：CN111925994B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202010631604.1
申请日：2020-07-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于预防兽医领域，具体涉及一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒及其制备方法和应用。本发明发现了非洲猪瘟病毒DP71L蛋白能够抑制cGAS+MITA或MITA诱导的IFNβ的活性，本发明还提供一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒，该重组非洲猪瘟病毒是将非洲猪瘟病毒的DP71L基因缺失后得到的。将本发明构建的基因缺失非洲猪瘟病毒感染细胞，与野生毒株比较显示，毒力减弱；将本发明构建的基因缺失非洲猪瘟病毒免疫猪后，无死亡等临床症状，血液病毒含量在感染后期显著降低，存活率均为100％，表明该重组病毒充分致弱，作为疫苗是非常安全的。因此可以将上述DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒在制备非洲猪瘟疫苗中进行应用，具有相应的社会价值。
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公开(公告)号：CN114015660B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202111334156.X
申请日：2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 冯涛 , 马昭 , 刘华南 , 李攀 , 石正旺 , 申超超 , 吴盼雪 , 齐晓兰 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及缺失十个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失了I177L、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株；所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康，且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115948466A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202310019982.8
申请日：2023-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及Tollip敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中Tollip基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向Tollip的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向Tollip基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了Tollip基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制，提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114316036B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202210011206.9
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1，所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性，而不和A型毒株进行反应；而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性，可阻止病毒入侵，保护机体免受感染。
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公开(公告)号：CN114958782B
公开(公告)日：2023-03-24
申请号：CN202210258522.6
申请日：2022-03-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种IPTG诱导性缺失D1133L基因的非洲猪瘟病毒减毒株及其应用。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒D1133L蛋白能够抑制IFN‑β及其下游因子ISG‑15、ISG‑56细胞因子的产生，具有较强的免疫抑制作用，可作为免疫抑制剂应用。另外构建了IPTG诱导性缺失D1133L基因的非洲猪瘟病毒减毒株，具体是将大肠杆菌lac操纵基因‑阻遏物系统将筛选表达盒插入到ASFV的非结构蛋白D1133L之前得到重组病毒。在存在IPTG的情况下，此重组病毒与野生型具有相似特征，无IPTG存在时，D1133L蛋白的表达会被抑制。
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公开(公告)号：CN114958782A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210258522.6
申请日：2022-03-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种IPTG诱导性缺失D1133L基因的非洲猪瘟病毒减毒株及其应用。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒D1133L蛋白能够抑制IFN‑β及其下游因子ISG‑15、ISG‑56细胞因子的产生，具有较强的免疫抑制作用，可作为免疫抑制剂应用。另外构建了IPTG诱导性缺失D1133L基因的非洲猪瘟病毒减毒株，具体是将大肠杆菌lac操纵基因‑阻遏物系统将筛选表达盒插入到ASFV的非结构蛋白D1133L之前得到重组病毒。在存在IPTG的情况下，此重组病毒与野生型具有相似特征，无IPTG存在时，D1133L蛋白的表达会被抑制。
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公开(公告)号：CN112852761B
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202110248651.2
申请日：2021-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株Δ20/40的构建及作为疫苗的应用。本发明采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFVCN/GS/2018中联合缺失了MGF‑110‑9L基因和MGF‑360‑9L基因编码蛋白的功能，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株；所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康，且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
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