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公开(公告)号：CN114921495A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210673666.8
申请日：2022-06-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 一种猪瘟病毒病毒样颗粒疫苗的制备方法，将编码完整的猪瘟病毒结构蛋白的基因通过重组载体分别转染哺乳动物细胞，或将编码完整的猪瘟病毒结构蛋白的基因构建到杆状病毒载体上，繁殖出重组载体杆状病毒P3代病毒，并分别感染昆虫细胞，在体外成功表达出重组猪瘟病毒样颗粒疫苗，将其命名为CSFVVLPs，以其作为抗原免疫动物，能够刺激机体产生抗猪瘟病毒的特异性抗体，所获得的重组猪瘟病毒样颗粒疫苗CSFVVLPs作为预防猪瘟的新型抗原。
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公开(公告)号：CN111826468A
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN202010787402.6
申请日：2020-08-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一步法检测1型猪繁殖与呼吸综合征病毒的引物探针组和试剂盒，属于病毒检测技术领域。本发明所述引物探针组，包括正向引物、反向引物和探针，所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述探针为在SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的5'端修饰有荧光基团、3'端修饰有猝灭基团的物质。应用本发明所述引物探针组进行检测具有良好的特异性和敏感性，与2型猪繁殖与呼吸综合征没有任何反应，具有很好的临床应用价值。
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公开(公告)号：CN111778220A
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN202010651533.1
申请日：2020-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/866 , C07K19/00 , A61K39/295 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明根据计算机软件模拟结果，在猪细小病毒PPV VP2蛋白Loop2区嵌入SAT2 FMDV B细胞表位(VYTKAAAAIRGDRAALAAKYADTNHTLPPTFNFGYVTVDK)，N端嵌入T细胞表位(NVQEGRRKHTDVAFLLDRST)。根据昆虫细胞嗜性优化合成嵌合基因GS1923OP，克隆到载体pFastBacTMDual上，转化感受态细胞DH10Bac，获得重组杆粒rBacmidNT1L2B，转染sf9细胞，收获重组杆状病毒rBacNT1L2B，用其感染HF细胞，使用间接免疫荧光IFA针对嵌合表位和VP2蛋白进行检测，具有特异性荧光。We stern-blot针对B、T细胞表位和VP2蛋白进行检测，在67KDa出现一条特异性条带。透射电镜TEM观察，重组蛋白NT1L2B能够自我组装成病毒样颗粒。本发明可应用在为南非2型口蹄疫制备储备疫苗，并能在此基础上达到同时预防南非2型口蹄疫和猪细小病的目的。
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公开(公告)号：CN110862437A
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201911166768.5
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 丁耀忠 , 汪洋 , 李国秀 , 马维民 , 何继军 , 李茜 , 爱斯纳非.科友斯.伍赛特 , 代军飞 , 张杰 , 侯谦 , 马炳 , 李小云 , 刘永生 , 孙跃峰 , 吕建亮 , 邵军军 , 王永录 , 张忠旺 , 张永光
Abstract: 本发明公开了一种南非2型口蹄疫病毒VP1基因的可溶性表达方法，以南非2型口蹄疫病毒基因组(JX014256)为参考序列，在FMDV SAT2的VP1蛋白编码基因上游直接偶联SUMO促溶表达标签编码基因，然后在SUMO的上游引入6个His标签编码基因，再根据大肠杆菌密码子嗜性，优化HisSUMO-SAT2-VP1基因，重组至PUC57质粒，以HisSUMO-SAT2-VP1-PUC57质粒为模板，设计特异性引物；PCR扩增后利用相同的限制性内切酶酶切目的片段与表达载体，将目的基因克隆入pET32a(+)原核表达载体，构建重组质粒pET32a-HisSUMO-VP1，转入大肠杆菌诱导表达，利用镍柱进行纯化。结果表明HisSUMO-VP1蛋白在大肠杆菌中能可溶性表达，纯化后的目的蛋白具有较好的免疫原性。本发明充分利用His与SUMO标签的优点，不仅提高Ni与组氨酸结合的特异性和稳定性，而且提高重组蛋白纯化效率。
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公开(公告)号：CN105400782B
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201510901924.3
申请日：2015-12-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了同时鉴定三种猪流行性腹泻病毒毒株的引物组合，所述引物组合由4个特异性引物组成，分别为：上游引物F1、上游引物F2、上游引物F3、下游引物UR；并提供了使用上述引物组合的同时鉴定三种猪流行性腹泻病毒的通用型半套式RT‑PCR方法。本发明的有益效果为：本发明提供的同时鉴定三种猪流行性腹泻病毒毒株的引物组合和通用型半套式RT‑PCR方法，可以通过一种方法，在一次试验中同时鉴定并区别目前已报道出现的全部三种猪流行性腹泻病毒毒株，是世界上首次建立的一种能够同时检测三种不同基因型猪流行性腹泻病毒流行毒株的检测方法，为今后该病毒的鉴别及临床诊断提供新的、有效的检测方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106435016A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610760228.X
申请日：2016-08-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明提供一种快速显色一步法检测猪圆环病毒2型的LAMP试剂盒，该试剂盒包含有6条LAMP引物的LAMP反应液构成的检测体系。本发明的试剂盒在不延长原有1小时反应时间的条件下，实现了将荧光染料直接加入反应管的一步操作，不仅简化了操作程序，解决了含有钙黄素的预混染料对Bst DNA扩增酶的抑制而导致在反应管直接加入荧光染料不显色的根本问题，还有效避免了由于反应结束后二次开盖导致的释放产物形成气溶胶的污染发生。应用本发明的试剂盒进行检测，能够肉眼直接直观判断，具有良好的特异性、敏感性和稳定性。
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公开(公告)号：CN105861755A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610398762.0
申请日：2016-06-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/701
Abstract: 本发明公开了一组用于快速检测南非型口蹄疫病毒的特异性引物组，所述特异性引物组由1条下游引物和7条上游引物组成；所述下游引物为序列表中序列1所示单链DNA分子，所述上游引物为序列表中序列2?8所示单链DNA分子；还提供了包含有该引物组的试剂盒。本发明的有益效果为：本发明通过使用特异性复合引物及在一系列质控和阴性、阳性对照的辅助下，从分子水平对SAT FMDV的病毒核酸进行检测，该方法具有简便、经济、快速、灵敏和特异的特点，是可以同时检测三个SAT FMDV的检测技术，实现对SAT FMDV诊断和监控的战略储备，对于防止该些病毒传入我国具有重要的战略意义，同时具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN104630212A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201410689438.5
申请日：2014-11-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种丙型肝炎病毒IRES元件所对应的特定翻译起始序列，本发明还提供上述丙型肝炎病毒IRES元件所对应的特定翻译起始序列在对下游序列蛋白表达调控中的作用。IRES元件介导核糖体对翻译起始区+4位和-3位特定核苷酸识别敏感性差异而导致IRES元件下游EGFP基因表达水平的差异。经实验得到，当翻译起始区的序列为-3ACCATG+4GTG时，下游EGFP基因的表达效率是所有16中翻译起始序列中最高的。
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公开(公告)号：CN102776294B
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201210221684.9
申请日：2012-06-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种用于检测牛或猪或羊以及相关牛或猪或羊的产品是否感染C型口蹄疫病毒的试剂盒。本发明的C型口蹄疫病毒快速检测试剂盒中包括有两对LAMP引物，这两对引物分别是SEQ1、SEQ2、SEQ3和SEQ4。用本发明的试剂盒进行检测，具有方便、及时、快捷的优点，并且有较高的检测灵敏度，同时在具体的检测过程中只需用普通的水浴锅或热源即可。
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公开(公告)号：CN102703607B
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201210156972.0
申请日：2012-05-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种检测牛和猪以及相关牛和猪的产品是否感染A、O或C型口蹄疫病毒的试剂盒，以及这种试剂盒的使用方法。本发明的试剂盒中至少有三对用于扩增A型口蹄疫目的基因的引物、扩增C型口蹄疫目的基因的引物和用于扩增O型口蹄疫目的基因的引物组成。
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