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公开(公告)号：CN119432770A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202510003341.2
申请日：2025-01-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种特异性结合产气荚膜梭菌（C.p）β2毒素重组蛋白的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及应用。本发明提供了特异性结合β2毒素蛋白的单克隆抗体和分泌这种单克隆抗体的保藏编号为CCTCC NO:C2024312的杂交瘤细胞株CPB2‑2A4，单克隆抗体仅与C.p β2毒素蛋白发生反应，而不与其他感染牛羊的病原体发生交叉反应，具有极高的特异性；试剂盒利用竞争ELISA技术，以与C.p β2毒素重组蛋白特异性结合的鼠单克隆抗体作为竞争抗体，可检测多种动物来源血清中C.p β2毒素抗体，避免了样本来源的种属限制。另外，试剂盒重复性良好。试剂盒操作时技术要求比较宽松，可在生产中广泛推广使用，应用于C.p流行病学调查和疫苗免疫水平监测。
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公开(公告)号：CN109554311A
公开(公告)日：2019-04-02
申请号：CN201811548607.8
申请日：2018-12-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种鼠伤寒沙门氏菌外膜囊泡的提取方法，包括下述步骤：(1)将沙门氏菌菌液，进行10,000×g，4℃，15min离心；(2)回收上清，不要将菌液沉淀倒出，进行13,000×g，4℃，15min离心；(3)回收上清，用PVDF膜滤器进行过滤2次；(4)将过滤的上清进行40,000×g，4℃，2h；弃去上清。本发明应用的高速离心的方案，用40,000×g的离心力成功的对鼠伤寒沙门氏菌的OMVs进行了提取。本发明还解决了鞭毛在OMVs提取物种大量存在的问题，本发明通过应用基因靶向编辑技术对鼠伤寒沙门氏菌的鞭毛基因进行敲除，从而获得高纯度的OMVs。
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公开(公告)号：CN106093439B
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201610383147.2
申请日：2016-06-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/86 , G01N33/569 , G01N33/531
Abstract: 本发明提供一种猪链球菌间接血凝检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括猪链球菌间接血凝抗原，所述猪链球菌间接血凝抗原由猪链球菌CCTCC M 2016028的全菌蛋白和醛化‑鞣酸化绵羊红细胞组成。本发明的试剂盒操作简单、方便快速，无需特殊设备和仪器，全程在2～3小时内完成，适合在基层推广应用，可广泛应用于猪链球菌病流行病学的调查研究。结果的重复性好，稳定，可靠，能够准确的检测猪链球菌的抗体。
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公开(公告)号：CN107475456A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710886522.X
申请日：2017-09-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2522/101 , C12Q2527/101 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了一种基于等温逆转录重组酶聚合酶扩增法检测猪流行性腹泻病毒的试剂盒，该试剂盒包含引物和探针，引物序列为：上游引物F1020：5′–TCGTGAGCTAGCGGACTCTTACGAGATTAC-3′；下游引物R1160：5′-GCTGCAGCGTGGTTTCACGCTTGTTCTTCT-3′；探针序列为：P1082：5′-ATCCAAATGTTGAGCTTCTTGTTTCACAGG(FAM-dT)G(THF)A(BHQ1-dT)GCATTTAAAACTGGG-C3space-3′；建立了PEDV等温逆转录重组酶聚合酶扩增(RPA)快速检测方法，最低可检测到30Cospies的PEDV RNA，并且该方法最早可在反应开始后4min时检出PEDV，30min内即可完成检测。利用本发明检测50份PEDV阳性乳猪腹泻粪样、100份PEDV阴性乳猪腹泻粪样，检测结果表明与RT-PCR检测结果的符合率为100％。本发明对PEDV特异性强、灵敏度高、耗时短、操作简单、安全可靠。
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公开(公告)号：CN105866437B
公开(公告)日：2017-12-12
申请号：CN201610382656.3
申请日：2016-06-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种屎肠球菌间接血凝检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括屎肠球菌间接血凝抗原，所述屎肠球菌间接血凝抗原由屎肠球菌CCTCC M 2016047的全菌蛋白和醛化‑鞣酸化绵羊红细胞组成。本发明的试剂盒操作简单、方便快速，无需特殊设备和仪器，全程在2～3小时内完成，适合在基层推广应用，可广泛应用于屎肠球菌病流行病学的调查研究。结果的重复性好，稳定，可靠，能够准确的检测屎肠球菌的抗体。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103823057B
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201410083353.2
申请日：2014-03-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种猪HEV总抗体胶体金快速诊断试纸条及其制备方法，该猪HEV总抗体胶体金快速诊断试纸条包括：吸水玻璃纤维层、硝酸纤维素膜层、吸水滤纸层和白色塑料垫板；该猪HEV总抗体胶体金快速诊断试纸条的制备方法包括以下步骤：制备HEV包被抗原、HEV标记抗原、HEV标记抗原-胶体金；组装胶体金快速诊断试纸条。本发明可以用于猪戊型肝炎病毒总抗体检测，诊断操作简单，检测时间短，携带方便；为戊型肝炎病毒流行病学大规模调查提供相应的研究基础和技术保障；采用双抗原夹心法原理，包被抗原与血清中抗体产生特异性结合，结合抗原抗体复合物与标记抗原再次产生抗原抗体反应，两个抗原结合不同的抗原结合位点，特异性好，灵敏度高。
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公开(公告)号：CN105039493A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510396239.X
申请日：2015-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/06
Abstract: 本发明提供一种待检菌生物被膜形成能力的定量检测方法，待检菌生物被膜形成培养完成后，除去培养物，用灭菌蒸馏水洗涤，弃去洗涤液后，固定；加入结晶紫染色；用灭菌蒸馏水洗涤2-3次，干燥；加入乙醇，室温静置或轻微振荡后，检测595nm处的光密度值，以阴性对照的均值加上阴性对照均值标准差为阈值A0，待检菌重复光密度值的平均值A为生物被膜定量值,对两个值进行比较来定量确定待检菌生物被膜形成能力的强弱。应用本发明的方法不但能够有效定量强生物被膜形成菌株，而且对生物被膜形成弱和生物被膜形成疏松的菌株也具有良好定量效果。
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公开(公告)号：CN103837680B
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201410084515.4
申请日：2014-03-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/576 , C12N15/51 , C12N15/70 , C07K14/08
Abstract: 本发明公开了一种猪HEV总抗体ELISA检测试剂盒的制备方法，该猪HEV总抗体ELISA检测试剂盒的制备方法包括以下步骤：制备HEV包被抗原；制备HEV标记抗原；HEV标记抗原-HRP标记物的制备；采用碳酸盐缓冲液以一定比例将S抗原稀释，100μl/孔加入到酶标板，封装于加有干燥剂的铝膜袋中，包被完毕。本发明建立了一种快速高效检测猪HEV总抗体ELISA检测方法，本发明依据双抗原夹心法原理，包被抗原与血清中抗体产生特异性结合，结合抗原抗体复合物与标记抗原再次产生抗原抗体反应，两个抗原结合不同的抗原结合位点，灵敏度高，特异性好，重复性好，为戊型肝炎病毒流行病学大规模调查提供相应技术保障，也为更好的预防和控制猪HEV疫病的流行提供了理论依据。
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公开(公告)号：CN102925485B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201210474111.7
申请日：2012-11-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/864 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种双表达的AAV重组病毒的制备方法，采用基因克隆技术将合成的特异性PRRSV RNA干扰寡核苷酸序列克隆至AAV Helper Free System中的表达质粒pAAV-U6-IRES-hrGFP的U6启动子下游，将PRRSV的ORF5-6结构蛋白基因克隆至pAAV-U6-IRES-hrGFP的CMV启动子的下游，构建成双效腺相关病毒载体pAAV-U6-IRES-hrGFP-siRNA-ORF5-6，通过酶切及PCR鉴定后进行DNA测序以鉴定重组质粒。实验证实，双效质粒转染靶细胞Marc145，有延迟细胞病变的作用，说明双表达AAV疫苗载体能够转录出siRNA，对病毒的转录复制有一定的抑制效果。
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公开(公告)号：CN101195831A
公开(公告)日：2008-06-11
申请号：CN200710103083.7
申请日：2007-05-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: A61K39/135 , A61K39/12 , A61K2039/5258 , A61K2039/53 , A61K2039/552 , C12N15/1131 , C12N2310/11 , C12N2310/111 , C12N2770/32134 , C12N2830/20 , C12N2840/203
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫病毒双效疫苗载体以及该双效疫苗载体的构建方法和用途。本发明口蹄疫病毒双效疫苗载体主要由双顺反子表达载体序列组成，其中含有能够与口蹄疫病毒基因组5’非编码区RNA结合的反义基因序列和完整的口蹄疫病毒VP1结构蛋白基因序列。动物试验表明，本发明口蹄疫病毒双效疫苗在动物口蹄疫的防制方面具有基因治疗及基因免疫双重功效。
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