公开(公告)号：CN116103444A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202211719114.2

申请日：2022-12-30

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 李志勇 ,  雷乾 ,  赵俊芳 ,  李爱欣 ,  孙鹏 ,  孙普 ,  李坤 ,  白兴文 ,  卢曾军 ,  刘在新

IPC: C12Q1/70 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6844 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种基于RT‑ERA检测口蹄疫病毒(FMDV)和/或塞内卡病毒(SVA)的引物探针组及试剂盒和应用，属于病毒检测技术领域。本发明针对传统方法检测SVA和FMDV或多或少都存在特异性差，灵敏度不高，操作繁琐等弊端，提出了一种基于RT‑ERA检测FMDV和/或SVA的引物探针组和试剂盒。本发明开发的SVA和FMDV双重RT‑ERA检测方法有反应时间时间短、良好的检测灵敏度与特异性的特点，特别适用田间野外或者养殖场自检。

公开(公告)号：CN107034309B

公开(公告)日：2020-06-16

申请号：CN201610076566.1

申请日：2016-02-03

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 张志东 ,  杨洋 ,  秦晓东 ,  张伟 ,  李志勇

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的实时荧光RPA试剂盒及其用途，还公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的试纸条RPA试剂盒及其用途。该两种试剂盒分别包括SEQ ID NO.1及SEQ ID NO.2所示的引物及各自的探针，虽然针对同一靶标序列，但引物和探针的修饰碱基和检测平台不同。实验证明本发明的两个试剂盒的敏感性均为102拷贝/反应，并均只能特异性检测猪伪狂犬病毒。分别用本发明的两个试剂盒检测猪伪狂犬病毒疑似样品，结果表明这两个试剂盒的检测结果与qPCR的符合度均为100％。因此，本发明的两个试剂盒均能快捷、高效、灵敏的检测猪伪狂犬病毒，为猪伪狂犬病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。

公开(公告)号：CN106853247A

公开(公告)日：2017-06-16

申请号：CN201510897236.4

申请日：2015-12-08

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 殷相平 ,  肖星星 ,  张韵 ,  卫巧林 ,  李志勇 ,  柳纪省

IPC: A61K39/205 ,  A61K39/39 ,  A61K48/00 ,  A61P31/14 ,  C12N15/47 ,  C12N15/861 ,  C12N7/01

CPC classification number: A61K39/12 ,  A61K39/39 ,  A61K2039/5256 ,  A61K2039/53 ,  A61K2039/545 ,  A61K2039/55516 ,  C07K14/005 ,  C12N7/00 ,  C12N15/86 ,  C12N2710/10021 ,  C12N2710/10043 ,  C12N2760/20122 ,  C12N2760/20134

Abstract: 本发明公开了一种制备狂犬病活载体疫苗的方法及其产品和用途。所述方法包括如下步骤：一、设计引物，扩增出狂犬病病毒抗原蛋白G基因与细菌鞭毛蛋白FIjB或FIiC基因；二、将抗原蛋白G基因与FIjB或FIiC基因插入到复制缺陷型腺病毒穿梭载体特异性启动子和终止子之间，构建成含有基因G-FIjB或G-FIiC的腺病毒穿梭载体；三、将获得的重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体与腺病毒骨架载体通过同源重组得到重组腺病毒质粒；四、用重组腺病毒质粒产生基因组结构均一的重组腺病毒。此外，本发明还提出了有上述方法制备得到的狂犬病活载体疫苗。相较于现有技术，本发明制备得到的活载体疫苗更为安全和有效，且制作周期较短，在狂犬病的预防或治疗领域将具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN100572541C

公开(公告)日：2009-12-23

申请号：CN200710103083.7

申请日：2007-05-28

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 柳纪省 ,  杨彬 ,  兰喜 ,  殷相平 ,  李学瑞 ,  李宝玉 ,  韩晓荣 ,  李志勇 ,  刘兆弼 ,  方玉萍

IPC: C12N15/63 ,  A61K48/00 ,  A61P31/12

CPC classification number: A61K39/135 ,  A61K39/12 ,  A61K2039/5258 ,  A61K2039/53 ,  A61K2039/552 ,  C12N15/1131 ,  C12N2310/11 ,  C12N2310/111 ,  C12N2770/32134 ,  C12N2830/20 ,  C12N2840/203

Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫病毒双效疫苗载体以及该双效疫苗载体的构建方法和用途。本发明口蹄疫病毒双效疫苗载体主要由双顺反子表达载体序列组成，其中含有能够与口蹄疫病毒基因组5’非编码区RNA结合的反义基因序列和完整的口蹄疫病毒VP1结构蛋白基因序列。动物试验表明，本发明口蹄疫病毒双效疫苗在动物口蹄疫的防制方面具有基因治疗及基因免疫双重功效。

公开(公告)号：CN1310677C

公开(公告)日：2007-04-18

申请号：CN200410039540.7

申请日：2004-02-05

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 柳纪省 ,  殷相平 ,  白银梅 ,  胡永浩 ,  李志勇 ,  张兴旺 ,  王辉 ,  兰喜 ,  李宝玉 ,  刘兆弼

IPC: A61K39/205 ,  A61P31/14 ,  C12N15/861 ,  C12N15/09

Abstract: 一种利用腺病毒载体表达狂犬病病毒双基因制备狂犬病活载体疫苗的方法，包括如下过程：一、制备目的基因：设计引物，扩增出狂犬病病毒(rabies virus，RV)抗原蛋白G基因与N基因；二、构建腺病毒穿梭载体：将抗原蛋白G基因与N基因插入到复制缺陷型腺病毒穿梭载体特异性启动子和终止子之间，构建成含有融合基因(G+N)的腺病毒穿梭载体(pAdTrack-CMV/G+N)；三、获得腺病毒质粒：将获得的重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体(pAdTrack-CMV/G+N)与腺病毒骨架载体(pAdEasy-1)通过同源重组得到重组腺病毒质粒；四、用重组腺病毒质粒产生基因组结构均一的重组腺病毒，将重组腺病毒制成狂犬病活载体疫苗。本发明较之现有狂犬病疫苗更为安全和有效，制作周期较短。

公开(公告)号：CN110642945B

公开(公告)日：2021-02-12

申请号：CN201911022083.3

申请日：2019-10-25

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 付元芳 ,  李坤 ,  卢曾军 ,  曹轶梅 ,  刘在新 ,  王省 ,  包慧芳 ,  李平花 ,  白兴文 ,  孙普 ,  马雪青 ,  张婧 ,  李志勇 ,  李冬 ,  陈应理

IPC: C07K16/10 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明提供了通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。通用型口蹄疫病毒结构蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒，包括以下组成：包被抗原的酶标板、浓缩生物素标记单抗；浓缩生物素标记单抗中的单抗为单克隆抗体E32；包被抗原的酶标板为通过单克隆抗体F104间接包被FMDV抗原。E32和F104抗体特异性结合在FMDV结构蛋白VP2蛋白中的型间保守抗原表位，灵敏度和特异性均高，适用于O、A与Asia1型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法，为FMDV结构蛋白VP2表位缺失的标记疫苗提供配套鉴别诊断方法。

公开(公告)号：CN102392049B

公开(公告)日：2014-06-18

申请号：CN201110326748.7

申请日：2011-10-25

Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所 ,  中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 张志芳 ,  柳纪省 ,  李轶女 ,  易咏竹 ,  兰喜 ,  杨标 ,  王金辉 ,  边大勇 ,  李志勇 ,  吴润 ,  王国增 ,  沈桂芳 ,  舒惠国

IPC: C12N15/866 ,  C07K14/08 ,  A61K39/29 ,  A61P31/14 ,  C12N15/51 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  A61K48/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种制备戊型肝炎病毒空衣壳抗原的方法，包括：将戊型肝炎病毒抗原基因或优化后的戊型肝炎病毒抗原基因分别克隆到杆状病毒运载载体中，构建得到重组杆状病毒转移表达载体；将其与杆状病毒DNA进行共转染，获得重组杆状病毒；将重组杆状病毒感染昆虫宿主或昆虫细胞；诱导重组戊型肝炎病毒抗原表达；收获并纯化所表达的重组抗原，即得。本发明方法采用杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中安全、高效的表达戊型肝炎病毒抗原，所制备的抗原免疫活性高、安全性极高，可直接用于生产注射和口服疫苗用以免疫动物或人。本发明方法可大幅度降低戊型肝炎病毒抗原的生产成本，具有安全、高效、能耗少、成本低等诸多优点。

公开(公告)号：CN103823057A

公开(公告)日：2014-05-28

申请号：CN201410083353.2

申请日：2014-03-07

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 兰喜 ,  杨彬 ,  常晓依 ,  柳纪省 ,  张韵 ,  殷相平 ,  李宝玉 ,  李学瑞 ,  李志勇 ,  方玉萍

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543

CPC classification number: G01N33/5767 ,  G01N33/536 ,  G01N33/56983

Abstract: 本发明公开了一种猪HEV总抗体胶体金快速诊断试纸条及其制备方法，该猪HEV总抗体胶体金快速诊断试纸条包括：吸水玻璃纤维层、硝酸纤维素膜层、吸水滤纸层和白色塑料垫板；该猪HEV总抗体胶体金快速诊断试纸条的制备方法包括以下步骤：制备HEV包被抗原、HEV标记抗原、HEV标记抗原-胶体金；组装胶体金快速诊断试纸条。本发明可以用于猪戊型肝炎病毒总抗体检测，诊断操作简单，检测时间短，携带方便；为戊型肝炎病毒流行病学大规模调查提供相应的研究基础和技术保障；采用双抗原夹心法原理，包被抗原与血清中抗体产生特异性结合，结合抗原抗体复合物与标记抗原再次产生抗原抗体反应，两个抗原结合不同的抗原结合位点，特异性好，灵敏度高。

公开(公告)号：CN101307317B

公开(公告)日：2012-01-11

申请号：CN200810127520.3

申请日：2008-06-25

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 ,  中国农业科学院生物技术研究所

Inventor： 柳纪省 ,  张志芳 ,  殷相平 ,  易咏竹 ,  李江涛 ,  李轶女 ,  李志勇 ,  张韵 ,  李宝玉 ,  李学瑞 ,  杨彬 ,  兰喜 ,  白银梅 ,  沈桂芳 ,  舒惠国

IPC: C12N15/47 ,  C12N15/866 ,  C07K14/145 ,  A61K39/205 ,  A61K47/12 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种制备狂犬病毒抗原的方法，包括：将狂犬病毒的抗原基因或抗原基因的联合表达组合分别克隆到杆状病毒运载载体中，得到转移表达载体；将转移表达载体与杆状病毒进行共转染以发生同源重组或转座，获得重组杆状病毒；用重组杆状病毒感染昆虫宿主和细胞；培养被感染的昆虫宿主表达相应的狂犬病抗原；收获并纯化所表达的抗原，即得。本发明方法采用杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中生产安全、高效的狂犬病毒抗原，由于所制备的抗原安全性极高，可直接用于生产注射和口服疫苗用以免疫动物。本发明方法可以大幅度降低狂犬病抗原的生产成本，具有安全、高效、能耗少、成本低等诸多优点。

公开(公告)号：CN101121938B

公开(公告)日：2010-10-06

申请号：CN200710090035.9

申请日：2007-03-23

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 ,  中国农业科学院生物技术研究所

Inventor： 柳纪省 ,  张志芳 ,  李志勇 ,  易咏竹 ,  殷相平 ,  白银梅 ,  李轶女 ,  李宝玉 ,  李学瑞 ,  杨彬 ,  兰喜 ,  沈桂芳

IPC: C12N15/42 ,  C12N15/866 ,  C12N7/01 ,  C07K14/09

CPC classification number: C07K14/005 ,  A61K39/00 ,  C12N2710/14143 ,  C12N2770/32122

Abstract: 本发明提供了一种利用重组杆状病毒在昆虫体内表达口蹄疫抗原的方法，包括：将口蹄疫不同的基因组合分别克隆到杆状病毒运载载体中，构建得到转移载体；用所构建的转移载体转染杆状病毒进行DNA重组，获得重组杆状病毒；将重组杆状病毒感染昆虫宿主；培养被感染的昆虫宿主使其进行口蹄疫抗原表达；收集并纯化所表达的口蹄疫抗原。本发明方法采用杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中安全、高效的生产口蹄疫抗原，所制备的抗原安全性极高，可直接制作疫苗免疫动物。本发明制备口蹄疫抗原的方法无需投资建厂，无三废，电力和水资源等能源消耗极少，其生产成本也显著低于传统制备口蹄疫抗原的方法，，具有安全、高效、能耗少、成本低等诸多优点。