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公开(公告)号：CN107302911B
公开(公告)日：2021-12-14
申请号：CN201610259741.0
申请日：2016-04-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种用于牛羊食道‑咽部分泌物的保存液及其制备方法和用途，属于生物技术领域。本发明的一种用于牛羊食道‑咽部分泌物的保存液，其pH值为6.8—7.6的磷酸盐缓冲液，稳定剂以及防腐剂组成，其中，所述的磷酸盐缓冲液中还含有氯化钠及/或氯化钾，氯化钠及/或氯化钾的浓度为0.2‑10g/L，所述的稳定剂选自牛血清白蛋白，酪蛋白、马血清、甘油中的一种或多种，所述的防腐剂选自叠氮钠、盘尼西林、青霉素及氯霉素中的一种或多种。与现有技术相比，本发明采用上述原料制成保存液，无毒无刺激性气味，安全性高，保存效果好，能较长时间保存不会变质，不会影响后期O/P液检测效果。
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公开(公告)号：CN105861755B
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201610398762.0
申请日：2016-06-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一组用于快速检测南非型口蹄疫病毒的特异性引物组，所述特异性引物组由1条下游引物和7条上游引物组成；所述下游引物为序列表中序列1所示单链DNA分子，所述上游引物为序列表中序列2‑8所示单链DNA分子；还提供了包含有该引物组的试剂盒。本发明的有益效果为：本发明通过使用特异性复合引物及在一系列质控和阴性、阳性对照的辅助下，从分子水平对SAT FMDV的病毒核酸进行检测，该方法具有简便、经济、快速、灵敏和特异的特点，是可以同时检测三个SAT FMDV的检测技术，实现对SAT FMDV诊断和监控的战略储备，对于防止该些病毒传入我国具有重要的战略意义，同时具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN104988107B
公开(公告)日：2018-06-08
申请号：CN201510256221.X
申请日：2015-05-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种高效表达口蹄疫病毒抗原基因的重组乳酸杆菌及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明的重组乳酸杆菌含有在N端引入改造的乳酸杆菌信号肽基因并进行密码子优化的口蹄疫病毒VP1基因序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明对乳酸杆菌信号肽的结构进行改造，将改造的乳酸杆菌信号肽基因借一连接短肽GSGGSGG与密码子优化后的口蹄疫病毒VP1基因进行融合，将融合后的基因序列插入大肠杆菌‑乳酸菌穿梭表达载体中，构建重组质粒pSIP/opti‑FMDV‑A/VP1，将pSIP/opti‑FMDV‑A/VP1重组质粒转化至乳酸杆菌。本发明针对重组乳酸杆菌表达系统，建立了适当改造信号肽结构以提高外源蛋白分泌效率的新思路和新方法，为进一步研发新型黏膜免疫疫苗提供理论依据和技术支持。
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公开(公告)号：CN104560899A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410844451.3
申请日：2014-12-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/06 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种口蹄疫病毒灭活剂，所述灭活剂为BEI和FA。本发明还提供该灭活剂的灭活方法，是将待灭活的口蹄疫病毒液先用权利要求1或2所述的灭活剂进行5.5-6小时的一次灭活，再将经一次灭活的病毒液装入另外一个容器中，用权利要求1或2所述的灭活剂进行另外5.5-6小时的二次灭活，灭活结束后加入硫代硫酸钠进行阻断。本发明的灭活剂能够缩短疫苗生产周期、降低疫苗生产成本、提高疫苗免疫效力的目的，以满足在更短的时间内对口蹄疫疫苗进行工业化大生产的要求。
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公开(公告)号：CN100366291C
公开(公告)日：2008-02-06
申请号：CN03103300.8
申请日：2003-01-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 一种牛羊等反刍动物口蹄疫O、A型双价灭活疫苗，由O型口蹄疫病毒抗原、A型口蹄疫病毒抗原和佐剂按下述重量百分比含量配制而成：抗原，由已灭活的O型口蹄疫病毒抗原OA/58或O/china/99、A型口蹄疫病毒抗原AF/72等量混合而成，抗原占疫苗总量的50～65%，佐剂，由75%白油、7%吐温、18%司班80混合高压灭菌制成，佐剂占疫苗总量的50～35%；本疫苗对口蹄疫易感动物牛、羊、猪安全，适用于不同品种、各种年龄的牛和羊，对牛O、A型口蹄疫的免疫保护率分别为91.3%和100%。对羊O、A型口蹄疫的免疫保护率为100%，一次接种有效免疫持续期6个月，安全性和免疫效力达国际同类产品先进水平。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1231263C
公开(公告)日：2005-12-14
申请号：CN02124649.1
申请日：2002-06-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 一种口蹄疫病毒抗原保存技术，即：将口蹄疫病毒液中加入一种对口蹄疫病毒有效抗原具有良好保护性能的保护剂中进行保存。该保护剂的配制方法及口蹄疫病毒抗原保存方法是：用0.5%的水解乳蛋白液做母液，加入2～4%的甘油、2～4%的蛋白胨和5～10%的蔗糖，充分混匀后，10～15磅高压灭菌15min，无菌检验阴性后，按50%的量加入到口蹄疫病毒液中，置-20℃～-70℃下或在-196℃的液氮中保存。该保存技术是在国家攀登计划和中国农业科学院兰州兽医研究所所长基金的资助下，对口蹄疫病毒抗原进行深入研究而确立的。其方法简单、便捷，对生产工艺、系统、设施的要求不严，保存量大，可操作性强，能满足口蹄疫疫苗工业化大生产的要求，为口蹄疫疫苗/抗原库的建立和应用提供了不可或缺的重要技术支撑。
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公开(公告)号：CN110144332B
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN201910394213.X
申请日：2019-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种猪德尔塔冠状病毒毒株及其应用，属于猪的免疫预防技术领域，所述猪德尔塔冠状病毒毒株保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.17383。所述猪德尔塔冠状病毒毒株的毒性强；将所述猪德尔塔冠状病毒毒株灭活后制备猪流行性腹泻病毒，免疫效果好。
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公开(公告)号：CN107686864A
公开(公告)日：2018-02-13
申请号：CN201710899036.1
申请日：2017-09-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2561/101 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒TaqMan荧光定量RT-PCR试剂盒及其检测方法，根据猪流行性腹泻病毒的N基因序列，设计并合成特异的引物和TanMan探针，通过对荧光定量反应条件的优化，建立了检测PEDV的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法，该方法在108-102copies/μL范围内具有良好的线性关系，灵敏度最低可检测到102copies/μL，其敏感性高，可特异性的快速检测猪流行性腹泻病毒；批内和批间重复变异系数均小于1％，重复性好。应用本发明对2015-2017年采集的185份猪粪便样品进行检测，其阳性检出率为38.4％，而用常规RT-PCR方法检测进行对照试验，其阳性检出率仅为26.3％。
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公开(公告)号：CN107557497A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201710984675.8
申请日：2017-10-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR试剂盒及检测方法，试剂盒包括特异性引物和探针，引物序列如下：上游引物：5'-ACGTCGTAAGACCCAGCATC-3'；下游引物：5'-CCCACCTGAAAGTTGCTCTC-3'；探针的序列为：5'-FAM-GTATGGCTGATCCTCGCATCATGGC-BHQ1-3'；扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段648bp，本发明建立的TaqMan实时荧光定量PCR对PDCoV的最低检测限度为26.6copies/μL，而对猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒以及口蹄疫病毒的检测结果均为阴性；本发明检测PDCoV的TaqMan探针实时荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、批间和批内重复性好。利用本发明对194份临床猪粪便样品进行检测，结果显示PDCoV阳性率为22.1％，高出常规RT-PCR对该临床猪粪便样品检测的阳性率11.9％近1倍。
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公开(公告)号：CN107541571A
公开(公告)日：2018-01-05
申请号：CN201710984183.9
申请日：2017-10-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种RT-RPA与侧向流动层析技术相结合快速检测猪嵴病毒的特异性引物和探针，建立了RT-RPA与侧向流动层析技术相结合的猪嵴病毒快速检测方法，该方法最低可检测到6.4×103copies/μL的猪嵴病毒RNA，灵敏度远高于使用现有PCR检测该病毒的灵敏度，并且该方法最早可在反应开始后10min时检出猪嵴病毒，10-15分钟min内即可完成检测，利用所设计的特异性引物和探针对猪嵴病毒进行快速检测，对猪嵴病毒特异性强，仅凭肉眼就可以直观的查看检测结果，检测过程方便快捷，检测结果安全可靠。
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