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公开(公告)号：CN110129288B
公开(公告)日：2020-05-15
申请号：CN201910401904.8
申请日：2019-05-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物医药领域，具体涉及TBK1作为E3泛素连接酶的新用途。本发明发现TBK1(TANK结合激酶1)具有泛素化功能，不仅能够在体外发生泛素化，而且能在体内发生泛素化，是一种新的E3泛素连接酶；本发明也发现了TBK1能够降解包括口蹄疫病毒(FMDV)、肠道病毒(EV71)、脑心肌炎病毒(EMCV)以及塞内卡病毒(SVV)在内的小核糖核酸病毒科病毒的结构蛋白VP3，尤其能够特异性地降解FMDV的结构蛋白VP3，可用于制备降解口蹄疫病毒蛋白相关药物，阻止口蹄疫病毒蛋白组装相关药物以及预防或治疗口蹄疫病毒感染相关药物。
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公开(公告)号：CN110093322B
公开(公告)日：2020-05-15
申请号：CN201910399786.1
申请日：2019-05-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/00 , C07K14/09 , C07K14/085 , A61K47/18
Abstract: 本发明属于生物医药领域，具体涉及MG132作为疫苗生产增效剂及稳定剂的应用。本发明发现MG132能够提高小核糖核酸病毒科病毒结构蛋白VP3的表达量，进而促进病毒样颗粒的组装，可应用于病毒样颗粒表达增效剂、病毒样颗粒生产增效剂以及相关疫苗的稳定剂，促进疫苗的生产，提高疫苗的稳定性。
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公开(公告)号：CN106191304B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201610537118.7
申请日：2016-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 内蒙古河套农牧业技术研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测小反刍兽疫病毒抗原的免疫磁珠试剂盒及其用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV H蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN106086239B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201610536855.5
申请日：2016-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6804
Abstract: 本发明公开了一种用于小反刍兽疫病毒抗原检测的免疫磁珠试剂盒及其用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV全病毒IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN110862968A
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201911044827.1
申请日：2019-10-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及MAP3K8基因敲除PK-15细胞系的构建方法及其应用。MAP3K8基因敲除的PK-15细胞系PK-15-KO-MAP3K8的保藏编号为CCTCC NO:C2019176。该细胞系的构建方法包括1：根据猪源MAP3K8基因序列分别设计两条sgRNA，将双链sg RNA与酶切后的lentiGuide-EGFP载体连接得到重组慢病毒表达质粒lentiGuide-EGFP-MAP3K8-sg RNA；2：将重组慢病毒表达质粒、病毒包装辅助质粒共转染PK-15细胞；3：收集病毒液，过滤、超速离心浓缩纯化病毒；4：用感染复数MOI=30的慢病毒感染PK-15细胞，然后用超速流式细胞分选系统进行单细胞分选；5：将分选得到的单克隆细胞进行扩大培养并测序鉴定。该细胞系能够促进FMDV和SVV增殖，提高病毒产量，可用于FMDV和SVV疫苗株的大规模细胞化培养和生产，并可为研究MAP3K8在病毒感染过程中的作用机制提供有力工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110093322A
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201910399786.1
申请日：2019-05-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/00 , C07K14/09 , C07K14/085 , A61K47/18
Abstract: 本发明属于生物医药领域，具体涉及MG132作为疫苗生产增效剂及稳定剂的应用。本发明发现MG132能够提高小核糖核酸病毒科病毒结构蛋白VP3的表达量，进而促进病毒样颗粒的组装，可应用于病毒样颗粒表达增效剂、病毒样颗粒生产增效剂以及相关疫苗的稳定剂，促进疫苗的生产，提高疫苗的稳定性。
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公开(公告)号：CN109266615A
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201810942663.3
申请日：2018-08-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/867
Abstract: 本发明提供一种基于小反刍兽疫病毒受体的细胞BHK/slam/v，其保藏号为：CCTCC NO:C201739，该细胞表达的小反刍兽疫病毒受体-山羊淋巴细胞信号活化因子V功能区具有明显增强小反刍兽疫病毒复制的功能，该细胞通过过量表达小反刍兽疫病毒特定细胞受体缩短了致细胞病变后的收毒时间（从4-7d缩短到3-4d），提高了小反刍兽疫病毒毒价（ct值从20.19提高到17.01），同体积病毒拷贝数也得到了大幅度增加（拷贝数从5.6X106提高到4.9X108），同时节约了成本。为小反刍兽疫病毒分离及疫苗毒生产提供了良好工具，也为小反刍兽疫病毒致病机制研究提供细胞模型。本发明还提供了该细胞的制备及应用。
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公开(公告)号：CN108912226A
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201810844879.6
申请日：2018-07-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C07K1/34 , G01N33/535 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于双峰驼抗山羊痘病毒VHH-4-2及用途，属于生物技术领域。包含抗山羊痘病毒VHH-4-2，VHH-4-2的筛选、表达、纯化、功能化标记以及活性验证，山羊痘病毒的浓缩、纯化，试剂盒各项指标的优化等。本发明使用了功能化标记的VHH-4-2，避免了一抗、二抗以及抗抗体等步骤，提高了灵敏性、稳定性，缩短了时间，节约了资源。突破了传统Elisa方法费时、费力等缺陷。本发明的提出为建立敏感山羊痘病毒的临床诊断方法，研究病毒的感染机理奠定基础；也为本发明研制出具有完全自主知识产权的山羊痘病毒抗体固相竞争Elisa试剂盒提供了关键标识物；另外，利用山羊痘弱毒苗经细胞扩大培养、浓缩、纯化后作为包被抗原，提高了灵敏度。
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公开(公告)号：CN108504654A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810330296.1
申请日：2018-04-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库及其构建方法和用途，本发明从塞尼卡谷病毒灭活疫苗免疫的骆驼外周血中分离得到淋巴细胞，通过RT-PCR的方法得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的cDNA片段，将VHH抗体的cDNA片段与pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞，得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库。结果表明该文库的滴度约为7.2×106cfu/ml，文库的重组率为100％。进一步对文库进行初步功能性鉴定，表明所构建的酵母文库中存在具有抗塞尼卡谷病毒的VHH抗体。本发明的提出为筛选抗塞尼卡谷病毒VHH抗体提供了平台，并且为塞尼卡谷的早期治疗和诊断提供了新的方法。
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公开(公告)号：CN107894508A
公开(公告)日：2018-04-10
申请号：CN201710771982.8
申请日：2017-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/532
CPC classification number: G01N33/6854 , G01N33/532 , G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种用于塞内卡病毒抗体检测的固相竞争ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括塞内卡病毒灭活抗原包被的酶标板以及HRP标记的塞内卡病毒兔抗IgG。本发明使用HRP标记兔抗IgG，替代传统ELISA中的一抗和二抗，简化了操作步骤。同时通过改变包被稳定工艺将SVV灭活抗原包被到固相载体表面，改变酶标抗体稀释液的配制工艺，可使酶标抗体工作液稳定保存而不改变其活性和效价，建立了特异检测SVV抗体的固相竞争ELISA试剂盒及其检测方法。本发明的提出弥补了SVV ELISA抗体检测的空缺，克服了现有VNT检测SVV抗体检测中重复性和敏感性低、操作程序繁琐的问题，为SVV抗体检测提供了一种有效的技术手段。
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