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公开(公告)号:CN111925417B
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN202010871941.8
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医学技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够通过同时促进猪机体中淋巴细胞和单核巨噬细胞增殖,从而促使猪机体产生广谱性免疫应答;并且,本发明的多肽能够促进猪体内ASFV抗原特异性免疫应答,因而能够作为ASFV亚单位疫苗的有效成分,增强猪的免疫应答。
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公开(公告)号:CN112899290B
公开(公告)日:2021-09-10
申请号:CN202110253372.5
申请日:2021-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种天然免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株及应用。本发明发现ASFV MGF‑110‑9L具有抑制干扰素产生的功能,在非洲猪瘟原始病毒株中缺失ASFV MGF‑110‑9L基因,能够降低亲本毒株的毒力,获得了一种减毒非洲猪瘟病毒株;所述的减毒非洲猪瘟病毒株对猪的毒力显著致弱,提升了毒株的安全性。通过在亲本毒株中缺失了基因ASFV MGF‑110‑9L,进而降低了亲本毒株的毒性,为未来成功制备非洲猪瘟疫苗提供了理论依据和实践参考,研究人员可以通过同时敲除ASFV MGF‑110‑9L及已公开的一种或几种毒力基因(例如CD2V、MGF360‑12L、MGF360‑13L、MGF360‑14L、MGF360‑505R等),最终制备出安全有效的非洲猪瘟疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN113181154A
公开(公告)日:2021-07-30
申请号:CN202110293021.7
申请日:2021-03-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/195 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域,具体涉及一种EGTA用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明意外发现,EGTA能够显著抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72的表达,阻止病毒入侵宿主细胞,可用于抑制非洲猪瘟病毒的感染;并且EGTA能够显著抑制非洲猪瘟病毒的复制,降低非洲猪瘟病毒感染后的病毒滴度,可作为非洲猪瘟病毒的抑制剂,用于预防或治疗非洲猪瘟。
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公开(公告)号:CN112500478B
公开(公告)日:2021-07-16
申请号:CN202011452597.5
申请日:2020-12-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种抗非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ6及其制备方法。ScFv抗体VH‑VLλ6的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,ScFv抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明从自然感染非洲猪瘟免疫耐过猪的外周血中分离得到淋巴细胞,提取分离淋巴细胞的总mRNA,通过RT‑PCR的方法得到总cDNA片段,以cDNA为模板,在相应的带有Linker接头的引物的作用下,通过SOE‑PCR的方法得到猪源ScFv抗体基因序列,将ScFv抗体基因序列构建至PET‑30a载体,转化BL21(DE3)感受态细胞,筛选得到一个针对于非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ6,对筛选得到的ScFv抗体VH‑VLλ6进行初步活性鉴定发现此抗体具有非洲猪瘟反应活性。本发明的提出为非洲猪瘟的早期诊断与防控提供新的材料,为尽快控制非洲猪瘟的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号:CN113025629A
公开(公告)日:2021-06-25
申请号:CN202110433736.8
申请日:2021-04-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种天然免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株及应用。本发明发现ASFV MGF‑505‑7R能够抑制干扰素的产生;在非洲猪瘟原始毒株中缺失ASFV MGF‑505‑7R基因,获得了一株安全性较好的减毒非洲猪瘟病毒株,为未来成功制备非洲猪瘟疫苗提供了理论依据和实践参考。更进一步,研究人员可以通过同时敲除ASFV MGF‑505‑7R及已公开的一种或几种毒力基因(例如CD2V、MGF360‑12L、MGF360‑13L、MGF360‑14L、MGF360‑505R等),最终制备出安全有效的非洲猪瘟疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN111621526B
公开(公告)日:2021-06-18
申请号:CN202010522276.1
申请日:2020-06-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/90 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种TOB1基因敲除单克隆细胞系的构建方法和应用。本发明发现在猪肾上皮细胞系IBRS‑2中通过基因编辑技术敲除TOB1基因能够获得了一种抑制FMDV复制的单克隆细胞系细胞TOB1‑KOs;细胞系TOB1‑KOs经FMDV攻毒后,检测不到病毒核酸和蛋白,表明在IBRS‑2中敲除TOB1基因获得的单克隆细胞系TOB1‑KOs对具有FMDV抗性表型,能够完全抑制FMDV的复制,为未来预防或抑制FMDV感染提供一种可行策略。
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公开(公告)号:CN112899290A
公开(公告)日:2021-06-04
申请号:CN202110253372.5
申请日:2021-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种天然免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株及应用。本发明发现ASFV MGF‑110‑9L具有抑制干扰素产生的功能,在非洲猪瘟原始病毒株中缺失ASFV MGF‑110‑9L基因,能够降低亲本毒株的毒力,获得了一种减毒非洲猪瘟病毒株;所述的减毒非洲猪瘟病毒株对猪的毒力显著致弱,提升了毒株的安全性。通过在亲本毒株中缺失了基因ASFV MGF‑110‑9L,进而降低了亲本毒株的毒性,为未来成功制备非洲猪瘟疫苗提供了理论依据和实践参考,研究人员可以通过同时敲除ASFV MGF‑110‑9L及已公开的一种或几种毒力基因(例如CD2V、MGF360‑12L、MGF360‑13L、MGF360‑14L、MGF360‑505R等),最终制备出安全有效的非洲猪瘟疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN111744000B
公开(公告)日:2021-03-23
申请号:CN202010676834.X
申请日:2020-07-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于兽药生物制品技术领域,具体涉及一种免疫抑制功能降低的口蹄疫重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用。本发明首先发现了FMDV 3B蛋白具有免疫抑制功能,并发现了发挥免疫抑制功能的关键位点;其次通过在FMDV 3B蛋白的三个重复拷贝中分别引入关键位点氨基酸突变,构建了FMDV 3B蛋白免疫抑制功能丧失的口蹄疫重组疫苗株,所述口蹄疫重组疫苗株在干扰素通路缺陷的口蹄疫生产细胞系BHK‑21中稳定传代,且不影响病毒滴度,而其在猪源宿主细胞(PK‑15)中毒力下降,发挥了更强的天然免疫应答诱导能力;最后,将获得的重组疫苗株制备成灭活疫苗,能够促进早期免疫应答,诱导高水平抗体产生,提高了生物安全性及免疫保护效力,具备良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN110564698B
公开(公告)日:2021-03-16
申请号:CN201910933902.3
申请日:2019-09-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种使用悬浮细胞系制备塞内卡病毒的方法,所述方法包括如下步骤:(1)将贴壁的ST细胞系驯化为悬浮ST‑S细胞系;(2)使用步骤(1)得到的悬浮ST‑S细胞系培养制备塞内卡病毒。本发明通过采用驯化得到的悬浮ST‑S细胞系进行塞内卡病毒的培养,有效提高了所得病毒的产能,为规模化大量生产塞内卡疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号:CN112245568A
公开(公告)日:2021-01-22
申请号:CN202011121313.4
申请日:2020-10-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及E184L基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒E184L蛋白能够抑制poly(dA:dT)诱导的IFN‑β、NF‑κB及ISRE启动子的激活,抑制poly(dA:dT)诱导的IFN‑β及其下游因子ISG15、ISG54、IL‑6、MCP1和TNF‑α等细胞因子的产生,具有较强的免疫抑制作用,可作为免疫抑制剂应用;其次本发明通过基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFV CN/GS/2018中缺失E184L基因编码蛋白的免疫抑制功能,降低了亲本毒株的免疫抑制活性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后,降低了猪的免疫抑制活性和致病性,其免疫后能够诱导显著的中和抗体产生,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗毒株,具有极大的社会价值。
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