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公开(公告)号：CN110759348B
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN201911078617.4
申请日：2019-11-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于纳米材料领域，涉及一种具有多级孔结构的二氧化硅材料的制备方法。本发明以原硅酸四乙酯为硅源，三乙醇胺为碱性催化剂，水杨酸钠和十六烷基三甲基溴化铵为结构导向剂和模板剂，在水溶液中制备具有多级孔结构的二氧化硅材料。该方法制备的二氧化硅材料粒径均一、孔体积较大，不仅具有从内到外发射状的树枝状大孔道结构，而且具有尺寸较小的介孔结构。本发明的方法制备简单、成本较低，重复性好，环境友好，粒径大小在50~500 nm范围可调，而且可以实现大规模制备。本发明制备的具有多级孔结构的二氧化硅材料可用于药物递送载体，尤其是对小分子药物和大分子量蛋白的共同负载具有显著的优势。
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公开(公告)号：CN115028744A
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202210771918.0
申请日：2022-06-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种口蹄疫病毒VP1嵌合纳米颗粒及其制备方法和应用，涉及生物医药技术领域。本发明所述VP1嵌合纳米颗粒，为将O型/A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1和天然蛋白质纳米骨架蛋白共价连接得到。本发明在制备所述VP1嵌合纳米颗粒时，通过蛋白骨架共价连接口蹄疫VP1结构蛋白，将其展示在纳米笼外部，并且采用小泛素样修饰蛋白原核表达系统，既促进了目的蛋白的正确折叠，提高可溶性表达，又兼顾了原核表达系统表达效率高，成本低等优点。本发明的O型/A型口蹄疫病毒VP1嵌合纳米颗粒可在制备用于预防O型/A型口蹄疫病毒引起疾病的疫苗中应用，也可在制备用于检测O型/A型口蹄疫病毒的检测试剂中应用。
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公开(公告)号：CN114437183A
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202210146783.9
申请日：2022-02-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K17/08 , C07K17/04 , A61K39/135 , A61K39/385 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种基于金属有机框架仿生矿化提高病毒样颗粒(VLPs)热稳定性的方法。本发明运用二甲基咪唑与硝酸锌配位作用成功将VLPs包封在沸石咪唑框架‑8(ZIF‑8)内部从而形成VLPs‑ZIF‑8纳米颗粒。本发明通过在病毒样颗粒外封装由金属离子与有机物配位形成的框架架构，提高了VLPs疫苗的耐热性，解决了冷链运输所带来的大量人力、物力消耗等问题。本发明制备的ZIF‑8金属有机框架成本低廉、方法简单、合成过程温和。金属有机框架仿生矿化的VLPs疫苗的细胞免疫应答水平明显提升，本发明的提出为提升VLPs疫苗细胞免疫水平提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN108486069B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN201810570334.0
申请日：2018-06-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)低含量样品的病毒分离方法，还公开了用于猪流行性腹泻病毒富集和分离的免疫纳米磁珠，该免疫纳米磁珠具有磁性的Fe2O3核心和偶联有PEDV膜蛋白特异性单域抗体的表面。传统方法从多重感染和低PEDV含量样品中分离病毒，需要病毒纯化和长时间盲传，分离效率低，限制了PEDV的研究工作。本发明利用纳米磁珠和PEDV特异性单域抗体制备了免疫纳米磁珠，能够有效捕获和富集粪便、组织等多种样品中的PEDV。样品经处理后利用免疫纳米磁珠进行病毒捕获和富集，将结合病毒的免疫纳米磁珠直接接种到Vero细胞，即可实现对病毒分离。本发明制备的免疫纳米磁珠和PEDV分离方法，适用于临床复杂和低病毒含量样品中PEDV的快速、有效分离。
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公开(公告)号：CN110684824B
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN201911093383.0
申请日：2019-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6804 , C12Q1/689 , C12Q1/04
Abstract: 本发明涉及一种用于检测布鲁氏菌抗原的免疫磁珠试剂盒，属于生物技术领域。所述试剂盒包括：免疫磁珠、qPCR反应混合液、检测布鲁氏菌的上游引物、下游引物和探针；所述免疫磁珠为鼠抗布鲁氏菌M5抗原单克隆IgG抗体与磁珠的偶联物。本发明所述试剂盒灵敏度高、稳定性好，快速有效，与传统分离方法相比，克服了布鲁氏菌病料检出率低以及直扩抗原检测过程中布鲁氏菌病原易降解，且病原DNA提取过程中使用的待检液体体积有限导致所提取的DNA无法达到qPCR检测的最低要求。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109438573B
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN201811341154.1
申请日：2015-12-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体，编码所述抗体的核苷酸序列为：SEQ ID NO.8。本发明的效果在于：利用噬菌体展示技术构建PEDV M蛋白双峰驼源免疫文库，筛选获得8株来自双峰驼IgG重链抗体高变区抗M蛋白VHH抗体基因编码序列，对其进行可溶性表达和ELISA实验证明其均可以同M蛋白相结合，吸光度OD405值的不同表明其同M蛋白结合能力各有差异。8株VHH抗体可通过E.coli的表达，而制备体外重组的基因工程抗体。
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公开(公告)号：CN109517060B
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN201811341948.8
申请日：2015-12-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体，编码所述抗体的核苷酸序列为：SEQ ID NO.3。本发明的效果在于：利用噬菌体展示技术构建PEDV M蛋白双峰驼源免疫文库，筛选获得8株来自双峰驼IgG重链抗体高变区抗M蛋白VHH抗体基因编码序列，对其进行可溶性表达和ELISA实验证明其均可以同M蛋白相结合，吸光度OD405值的不同表明其同M蛋白结合能力各有差异。8株VHH抗体可通过E.coli的表达，而制备体外重组的基因工程抗体。
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公开(公告)号：CN106191304B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201610537118.7
申请日：2016-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 内蒙古河套农牧业技术研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测小反刍兽疫病毒抗原的免疫磁珠试剂盒及其用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV H蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN106086239B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201610536855.5
申请日：2016-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6804
Abstract: 本发明公开了一种用于小反刍兽疫病毒抗原检测的免疫磁珠试剂盒及其用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV全病毒IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN109400702A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201811341949.2
申请日：2015-12-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体，编码所述抗体的核苷酸序列为：SEQ ID NO.2,SEQ ID NO.5，SEQ ID NO.7。本发明的效果在于：利用噬菌体展示技术构建PEDV M蛋白双峰驼源免疫文库，筛选获得8株来自双峰驼IgG重链抗体高变区抗M蛋白VHH抗体基因编码序列，对其进行可溶性表达和ELISA实验证明其均可以同M蛋白相结合，吸光度OD405值的不同表明其同M蛋白结合能力各有差异。8株VHH抗体可通过E.coli的表达，而制备体外重组的基因工程抗体。
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