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公开(公告)号：CN111793721B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN202010779829.1
申请日：2020-08-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/867 , C12N15/113 , C07K14/47 , G01N33/68 , G01N33/569 , A61K45/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种eEF1D蛋白在制备预防或治疗口蹄疫病毒感染药物中的应用。本发明发现感染口蹄疫病毒后eEF1D mRNA的表达增高，同时eEF1D蛋白含量降低，即eEF1D mRNA和eEF1D蛋白可以作为口蹄疫病毒感染后的检测标记物，用于评价是否感染口蹄疫病毒；其次，eEF1D蛋白能够显著降低口蹄疫病毒的结构蛋白VP1、口蹄疫病毒mRNA的表达以及口蹄疫病毒滴度，显著抑制口蹄疫病毒的复制，可用于预防或治疗口蹄疫病毒的感染；最后，敲低eEF1D蛋白后，促进了口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达，提高了口蹄疫病毒mRNA的表达和病毒滴度，因此，可通过基因工程手段在生产细胞株中敲低eEF1D蛋白，获得一种比现有生产细胞系生产口蹄疫病毒疫苗性能更好的细胞系，用于口蹄疫病毒疫苗的生产。
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公开(公告)号：CN111744000B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202010676834.X
申请日：2020-07-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于兽药生物制品技术领域，具体涉及一种免疫抑制功能降低的口蹄疫重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用。本发明首先发现了FMDV 3B蛋白具有免疫抑制功能，并发现了发挥免疫抑制功能的关键位点；其次通过在FMDV 3B蛋白的三个重复拷贝中分别引入关键位点氨基酸突变，构建了FMDV 3B蛋白免疫抑制功能丧失的口蹄疫重组疫苗株，所述口蹄疫重组疫苗株在干扰素通路缺陷的口蹄疫生产细胞系BHK‑21中稳定传代，且不影响病毒滴度，而其在猪源宿主细胞(PK‑15)中毒力下降，发挥了更强的天然免疫应答诱导能力；最后，将获得的重组疫苗株制备成灭活疫苗，能够促进早期免疫应答，诱导高水平抗体产生，提高了生物安全性及免疫保护效力，具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN110564698B
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN201910933902.3
申请日：2019-09-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种使用悬浮细胞系制备塞内卡病毒的方法，所述方法包括如下步骤：(1)将贴壁的ST细胞系驯化为悬浮ST‑S细胞系；(2)使用步骤(1)得到的悬浮ST‑S细胞系培养制备塞内卡病毒。本发明通过采用驯化得到的悬浮ST‑S细胞系进行塞内卡病毒的培养，有效提高了所得病毒的产能，为规模化大量生产塞内卡疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112245568A
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN202011121313.4
申请日：2020-10-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及E184L基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒E184L蛋白能够抑制poly(dA:dT)诱导的IFN‑β、NF‑κB及ISRE启动子的激活，抑制poly(dA:dT)诱导的IFN‑β及其下游因子ISG15、ISG54、IL‑6、MCP1和TNF‑α等细胞因子的产生，具有较强的免疫抑制作用，可作为免疫抑制剂应用；其次本发明通过基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFV CN/GS/2018中缺失E184L基因编码蛋白的免疫抑制功能，降低了亲本毒株的免疫抑制活性，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株；所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后，降低了猪的免疫抑制活性和致病性，其免疫后能够诱导显著的中和抗体产生，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗毒株，具有极大的社会价值。
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公开(公告)号：CN111849979A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010576529.3
申请日：2020-06-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种靶向敲除RPSA基因的sgRNA及RPSA基因敲除细胞系的构建方法。本发明设计了一种特异性靶向RPSA基因的sgRNA；所述的sgRNA能够特异性靶向RPSA基因，应用CRISPR-Cas9技术实现了对宿主细胞中RPSA基因的完全敲除，敲除效率高；本发明还提供了一种通过CRISPR-Cas9技术将所述sgRNA转染于宿主细胞，构建RPSA基因敲除细胞系的方法；敲除宿主细胞中RPSA基因不仅能够促进FMDV病毒的复制，可用于提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量；而且还意外的发现，敲除宿主细胞中RPSA基因能够显著抑制塞内卡谷病毒在细胞内的复制；为进一步研究RPSA基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供研究工具和材料。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111796105A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN202010750289.4
申请日：2020-07-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/96 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明属于免疫检测分析技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒磁微粒化学发光抗体检测试剂盒及其应用，该试剂盒以ASFV P30重组蛋白为磁微粒偶联物，以化学发光标记物标记的羊抗猪IgG为检测抗体。具体由偶联有ASFV P30重组蛋白的磁微粒混悬液、试剂R、定标品、质控品、样品稀释液、洗涤液及发光液组成，所述试剂R为稀释后的化学发光标记物标记的羊抗猪IgG抗体工作液。本发明试剂盒以磁微粒化学发光法为检测技术，同时结合碱性磷酸酶标记技术，具有特异性高、灵敏性好、重复性优、稳定性强等特点，可广泛应用于基层ASFV检测。
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公开(公告)号：CN111793721A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN202010779829.1
申请日：2020-08-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/867 , C12N15/113 , C07K14/47 , G01N33/68 , G01N33/569 , A61K45/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种eEF1D蛋白在制备预防或治疗口蹄疫病毒感染药物中的应用。本发明发现感染口蹄疫病毒后eEF1D mRNA的表达增高，同时eEF1D蛋白含量降低，即eEF1D mRNA和eEF1D蛋白可以作为口蹄疫病毒感染后的检测标记物，用于评价是否感染口蹄疫病毒；其次，eEF1D蛋白能够显著降低口蹄疫病毒的结构蛋白VP1、口蹄疫病毒mRNA的表达以及口蹄疫病毒滴度，显著抑制口蹄疫病毒的复制，可用于预防或治疗口蹄疫病毒的感染；最后，敲低eEF1D蛋白后，促进了口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达，提高了口蹄疫病毒mRNA的表达和病毒滴度，因此，可通过基因工程手段在生产细胞株中敲低eEF1D蛋白，获得一种比现有生产细胞系生产口蹄疫病毒疫苗性能更好的细胞系，用于口蹄疫病毒疫苗的生产。
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公开(公告)号：CN111744000A
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN202010676834.X
申请日：2020-07-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于兽药生物制品技术领域，具体涉及一种免疫抑制功能降低的口蹄疫重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用。本发明首先发现了FMDV 3B蛋白具有免疫抑制功能，并发现了发挥免疫抑制功能的关键位点；其次通过在FMDV 3B蛋白的三个重复拷贝中分别引入关键位点氨基酸突变，构建了FMDV 3B蛋白免疫抑制功能丧失的口蹄疫重组疫苗株，所述口蹄疫重组疫苗株在干扰素通路缺陷的口蹄疫生产细胞系BHK-21中稳定传代，且不影响病毒滴度，而其在猪源宿主细胞(PK-15)中毒力下降，发挥了更强的天然免疫应答诱导能力；最后，将获得的重组疫苗株制备成灭活疫苗，能够促进早期免疫应答，诱导高水平抗体产生，提高了生物安全性及免疫保护效力，具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN107041951B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201710256542.9
申请日：2017-04-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种口蹄疫病毒疫苗组合物，特别是重组口蹄疫O型、A型、Asia1型三价疫苗组合物。本发明还涉及一种制备所述口蹄疫病毒疫苗组合物的方法、以及所述口蹄疫病毒疫苗组合物在制备用于预防和/或控制动物口蹄疫疾病的药物中的用途。
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公开(公告)号：CN106084032B
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201610385207.4
申请日：2016-06-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/705 , C12N15/12 , C12N15/79 , A61K38/17 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及分子生物学领域，公开了一种猪天然免疫分子LGP2的突变体蛋白LGP2S169A及其制备和应用。LGP2S169A突变体蛋白序列为SEQ ID No.4中氨基酸所示。所述构建含有SEQ ID No.4中氨基酸序列的LGP2S169A的质粒所表达的蛋白具有良好的抗口蹄疫病毒的作用,为制备抗口蹄疫病毒药物或佐剂提供了新的靶点和理论支持。
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