一种生防酵母菌活性冻干粉及其制备方法

    公开(公告)号:CN109055248A

    公开(公告)日:2018-12-21

    申请号:CN201810989147.6

    申请日:2018-08-28

    申请人: 江苏大学

    CPC分类号: C12R1/84 A23L3/3571 C12N1/04

    摘要: 本发明涉及一种生防酵母菌活性冻干粉及其制备方法,属于生物防治技术领域;本发明所述的冻干粉中包括季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)Y35‑1、海藻糖、谷胱甘肽;本发明首先取活化后的季也蒙毕赤酵母菌接入NYDB种子培养基培养,再取种子液接入NYTB发酵培养基中发酵;将酵母菌发酵液离心并用无菌水清洗后,所得沉淀用无菌水洗下并制成酵母菌悬液;添加海藻糖及谷胱甘肽作为冻干保护剂后混匀分装在平板中,真空冷冻干燥得到冻干粉;本发明提供的生防酵母菌活性冻干粉的生防效果良好,活性冻干粉复水后的酵母菌悬液处理,油桃果实发病率、果实病斑直径均明显低于对照组,且与之存在显著性差异,可见冻干粉制剂复水后能有效抑制油桃果实的炭疽病腐烂病害。

    一种表达重组菌丝霉素的毕赤酵母

    公开(公告)号:CN107699507A

    公开(公告)日:2018-02-16

    申请号:CN201710939331.5

    申请日:2017-10-11

    IPC分类号: C12N1/19 C12P21/00 C12R1/84

    CPC分类号: C12R1/84 C07K14/37

    摘要: 本发明公开了一种表达重组菌丝霉素的毕赤酵母,该毕赤酵母依次经过pTRP-NZ2114、pPIC9K-NZ2114、pPIC6αA-NZ2114三种不同菌丝霉素表达载体转化,并且每次转化得到的菌株选用不同的抗生素高拷贝筛选,得到菌丝霉素高表达量的毕赤酵母工程菌,所述毕赤酵母中菌丝霉素的最高表达量达6.0g/L,大大高出目前已公开的技术;同时三种表达载体选用三种不同的整合位点,提高了多拷贝菌株中基因组的菌丝霉素表达盒的分散性,在一定程度上减少了菌丝霉素表达盒拷贝数的丢失,从而提高菌株的稳定性。

    糖基化改造提高脂肪酶表达的方法、突变酶及其应用

    公开(公告)号:CN104762277B

    公开(公告)日:2017-07-14

    申请号:CN201510195799.9

    申请日:2015-04-22

    申请人: 江南大学

    发明人: 喻晓蔚 徐岩

    摘要: 本发明公开了糖基化改造提高脂肪酶表达的方法、突变酶及其应用,属于酶工程领域。本发明是将米根霉脂肪酶的前导肽序列进行N‑糖基化突变,将SAS和/或NT氨基酸分别改造为N‑糖基化位点NGT和/或NLT,得到的突变体酶proROLA、proROLB、proROLAB的胞外蛋白浓度分别比未进行糖基化的proROL提高了211%、188%、233%,发酵罐培养时酶活分别达到8210U·mL‑1、8457U·mL‑1和9366U·mL‑1,而未突变的proROL的胞外酶活几乎为零。本发明的米根霉脂肪酶具有显著提高的脂肪酶酶活,可以应用于食品、化工及生物能源等领域。

    一种产小分子透明质酸的重组毕赤酵母及其构建方法

    公开(公告)号:CN104263666A

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201410467076.5

    申请日:2014-09-12

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种产小分子透明质酸的重组毕赤酵母及其构建方法,属于生物工程技术领域。本发明采用兽疫链球菌来源的透明质酸合酶hasA和枯草芽孢杆菌来源的UDP-葡萄糖脱氢酶tuaD,重组Pichia pastoris GS115宿主中表达,实现了透明质酸的生产;同时,采用水蛭来源的透明质酸酶整合至毕赤酵母基因组上,分别置于不同强度的组成型启动子下分泌表达,通过控制透明质酸酶的分泌表达量来制备不同分子量大小的小分子透明质酸产物,制备的产物分子量范围有差异,对于微生物直接生产特定范围的小分子透明质酸具有重要的指导借鉴意义。本发明为高效制备小分子透明质酸奠定了一定的基础,适合于工业化生产应用。