一种产芳樟醇的解脂耶氏酵母基因工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN108998383A

    公开(公告)日:2018-12-14

    申请号:CN201710419622.1

    申请日:2017-06-06

    摘要: 本发明公开了一种产芳樟醇的解脂耶氏酵母基因工程菌及其应用。该基因工程菌是将来自猕猴桃(Actinidia arguta)的芳樟醇合成酶基因LIS经优化后,转化解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)Po1f;在此基础上同时过表达内源HMG1、IDI1或ERG中的一种或多种基因。此外,通过对该基因工程菌发酵时添加的碳源如葡萄糖、甘油、果糖、柠檬酸以及丙酮酸及其浓度进行选择,进一步提高芳樟醇的产量。芳樟醇的产量最高能达到6.96mg/L,以及单位胞内芳樟醇含量939.04μg/g细胞干重(DCW)的极高产量。该基因工程菌能用于大规模商业化生产,前景良好。

    重组鱼类白细胞介素-2的工程菌及其产物的制备方法

    公开(公告)号:CN108949598A

    公开(公告)日:2018-12-07

    申请号:CN201810658538.X

    申请日:2018-09-13

    CPC分类号: C07K14/55 C12N15/81

    摘要: 本发明公开了重组鱼类白细胞介素‑2的工程菌及其产物的制备方法,该工程菌的制备方法为:将鱼淋巴细胞的分离,丝裂原诱导,提取总mRNAs,再将总mRNAs逆转录成cDNA模版,PCR扩增得白细胞介素‑2基因片段;将IL2序列和pYES2质粒双酶切,回收相应的酶切片段后连接IL2基因和载体,连接液转化宿主菌,筛选,获得重组的IL2‑pYES2质粒;将质粒电转化导入酵母菌株中,获得酵母工程菌。有益效果为:本发明工程菌能成功、高效表达出鱼干扰素重组蛋白,工程菌产物‑重组鱼类白细胞介素‑2的产量高,重组白细胞介素‑2基因易于诱导表达且表达稳定性,不需要进行纯化即可应用。

    一种基于异肽键扫描的蛋白质工程方法及其在蛋白质工程中应用

    公开(公告)号:CN108715846A

    公开(公告)日:2018-10-30

    申请号:CN201810546685.8

    申请日:2018-05-31

    IPC分类号: C12N15/10 C12N15/81 C40B40/10

    摘要: 本发明涉及一种异肽键扫描方法及其在蛋白质工程中应用,所述方法利用微生物为宿主,利用SpyTag与SpyCatcher系统可自催化形成异肽键的特性,将SpyTag或SpyCatcher随机替换某目标蛋白质肽链的任意氨基酸或插入某目标蛋白质肽链任意位置所得肽链的编码序列,置于合适的启动子及终止子,构建表达盒,在宿主控制下,实现转录及翻译,得到在多肽链不同氨基酸间自发形成了异肽键的目标蛋白质产物的集合。配合适当的筛选方法,可获得不同的改性蛋白质。本发明针对重组蛋白改性而开发,本发明提供了一蛋白质快速人工进化的方法。

    一种酿酒酵母菌株高产乳酸乙酯的新途径及其应用

    公开(公告)号:CN108642095A

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201810477707.X

    申请日:2018-05-18

    摘要: 本发明属于生物工程技术领域,尤其是一种酿酒酵母菌株高产乳酸乙酯的新途径及其应用。通过将乳酸脱氢酶、丙酰辅酶A转移酶与醇酰基转移酶同时在酿酒酵母中异源表达来实现高产乳酸乙酯。在出发菌株中完全敲除丙酮酸脱羧酶,过表达乳酸脱氢酶,以获得一定L-乳酸产生能力的酵母菌株;选用强启动子TEF1过表达丙酰辅酶A转移酶及强启动子PGK1过表达醇酰基转移酶,以同宗配合的基因HO作为整合位点,增加一个丙酰辅酶A转移酶的拷贝数,获得乳酸乙酯显著提高的酵母菌株,其乳酸乙酯的产量达353.1mg/L,与出发菌株相比,异戊醇降低49.9%,苯乙醇降低59.2%,满足白酒相关领域对酵母的较高要求,具有广阔的应用前景。