一种水稻柠檬烯合酶及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN104988131A

    公开(公告)日:2015-10-21

    申请号:CN201510439328.8

    申请日:2015-07-23

    申请人: 南京大学

    CPC分类号: C12N9/88 C12P5/002 C12Y402/03

    摘要: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种水稻柠檬烯合酶及其制备方法和应用。本发明提供了一种水稻中的柠檬烯合酶的基因,它所编码的蛋白具有柠檬烯合酶活性。本发明所述的柠檬烯合酶能够将牻牛儿基焦磷酸环化产生柠檬烯。所述柠檬烯合酶的酶活性良好,可用于工业生产柠檬烯。同时给出了该柠檬烯合酶基因在水稻不同组织中的表达情况以及受机械损伤后的诱导表达情况,对于水稻抗病虫害的基因工程有着积极的意义。

    丹参倍半萜合酶基因SmTPS12、其克隆引物、表达载体、催化产物及应用

    公开(公告)号:CN108795914A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201810647878.2

    申请日:2018-06-22

    发明人: 罗红梅 刘琬菁

    IPC分类号: C12N9/88 C12N15/70 C12P5/00

    摘要: 本发明公开了一条参与合成丹参次生代谢产物α‑金合欢烯的萜类合酶基因序列(SmTPS12);本发明所提供的SmTPS12基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明基于丹参基因组信息获得SmTPS12基因序列,通过构建pGEX‑4T‑1‑SmTPS12原核表达载体并转化大肠杆菌,在大肠杆菌体内检测其催化产物,研究SmTPS12的生物学功能。结果表明SmTPS12具有催化合成α‑金合欢烯等化合物的功能。α‑金合欢烯可以作为柴油和化学品生产的前体化合物;广泛用于皂用、洗涤剂香精中和日化香精中。本发明为丹参功能性代谢化合物关联基因基因奠定研究基础,有利于开发商业开发和生物防治。

    丹参倍半萜合酶基因SmTPS21、其克隆引物、表达载体、催化产物及应用

    公开(公告)号:CN108795915A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201810647880.X

    申请日:2018-06-22

    发明人: 罗红梅 刘琬菁

    IPC分类号: C12N9/88 C12N15/70 C12P5/00

    摘要: 本发明公开了一条参与合成丹参次生代谢产物——β‑榄香烯的萜类合酶基因序列(SmTPS21);本发明所提供的SmTPS21基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明基于丹参基因组注释数据获得SmTPS21基因,通过构建pET28a‑SmTPS21原核表达载体,在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)体内验证SmTPS21的催化功能,结果证明SmTPS21酶具有主要催化合成β‑榄香烯等倍半萜类化合物的功能。本实验提供的SmTPS21具有在E.coli中主要催化产生β‑榄香烯化合物的功能。已有研究表明β‑榄香烯具有直接杀伤肿瘤细胞或干扰肿瘤细胞生长代谢的功能。本发明为开展丹参萜类合酶基因功能鉴定及应用SmTPS21催化生产β‑榄香烯的研究奠定基础,有利于促进医药产品研发。

    一种产芳樟醇的解脂耶氏酵母基因工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN108998383A

    公开(公告)日:2018-12-14

    申请号:CN201710419622.1

    申请日:2017-06-06

    摘要: 本发明公开了一种产芳樟醇的解脂耶氏酵母基因工程菌及其应用。该基因工程菌是将来自猕猴桃(Actinidia arguta)的芳樟醇合成酶基因LIS经优化后,转化解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)Po1f;在此基础上同时过表达内源HMG1、IDI1或ERG中的一种或多种基因。此外,通过对该基因工程菌发酵时添加的碳源如葡萄糖、甘油、果糖、柠檬酸以及丙酮酸及其浓度进行选择,进一步提高芳樟醇的产量。芳樟醇的产量最高能达到6.96mg/L,以及单位胞内芳樟醇含量939.04μg/g细胞干重(DCW)的极高产量。该基因工程菌能用于大规模商业化生产,前景良好。

    一种应用丹参SmTPS3基因合成多种倍半萜类化合物的方法

    公开(公告)号:CN108795960A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201810647877.8

    申请日:2018-06-22

    发明人: 罗红梅 刘琬菁

    摘要: 本发明公开了一条主要参与合成丹参次生代谢产物姜烯等多种倍半萜合成的萜类合酶基因序列(SmTPS3);本发明所提供的SmTPS3基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明基于丹参的基因组和转录组数据获得SmTPS3基因序列,通过构建pET28a‑SmTPS3原核表达载体,在大肠杆菌体内检测SmTPS3的催化产物,验证SmTPS3的基因功能。研究结果表明,SmTPS3具有催化合成多种倍半萜类化合物的功能。本发明提供的SmTPS3具有催化产生姜烯、α‑佛手柑油烯、β‑倍半水芹烯等多种倍半萜类化合物的功能。姜烯具有抗病毒、抗生育、抗溃疡等多种活性,还可作为食品调味剂和化妆品的原料;佛手柑精油在缓解焦虑、抑郁等情绪中具有良好疗效。本发明为基于丹参萜类合酶基因合成倍半萜类化合物的研究奠定基础,促进基于SmTPS3催化合成的产物——姜烯、α‑佛手柑油烯等倍半萜类化合物的药物研发和产业开发。