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公开(公告)号：CN108823331A
公开(公告)日：2018-11-16
申请号：CN201810646156.5
申请日：2018-06-21
摘要： 本发明公开了一种GII.6型诺如病毒基因组的扩增引物和扩增方法。本发明针对GII.6型诺如病毒基因组特征采用了“4+1+1”的分段扩增策略，在保守区域设计了六组扩增引物和两条基因组末端测序引物，以目标病毒RNA为模板进行RT-PCR扩增与测序，再通过拼接比对，获得GII.6型诺如病毒基因组序列。将该扩增方法应用于实际检出样本，成功获得我国来源的GII.6型诺如病毒基因组序列。本发明方法具有操作简单、周期短、易推广等优点，可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求及相应的科研领域。
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公开(公告)号：CN108796130A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810646146.1
申请日：2018-06-21
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6869 , C12N15/11
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6869 , C12Q2531/113 , C12Q2535/122
摘要： 本发明公开了一种GII.2型诺如病毒基因组的扩增引物和扩增方法。本发明基于GII.2型诺如病毒基因组所包含的三个开放阅读框，采用了“4+1+1”的分段扩增策略，在保守区域设计了六组扩增引物和两条基因组末端测序引物，以目标病毒RNA为模板进行RT‑PCR扩增与测序，再通过拼接比对，获得GII.2型诺如病毒基因组序列。将该扩增方法应用于实际检出样本，成功获得我国来源的GII.2型诺如病毒基因组序列。本发明方法具有操作简单、周期短、易推广等优点，可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求及相应的科研领域。
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公开(公告)号：CN108796128A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810646112.2
申请日：2018-06-21
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6869 , C12Q1/686 , C12N15/11 , C12R1/93
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q1/6869 , C12Q2521/107
摘要： 本发明公开了一种GII.8型诺如病毒基因组的扩增引物和扩增方法。本发明针对GII.8型诺如病毒基因组特征采用了“4+1+1”的分段扩增策略，在保守区域设计了六组扩增引物和两条基因组末端测序引物，以目标病毒RNA为模板进行RT‑PCR扩增与测序，再通过拼接比对，获得GII.8型诺如病毒基因组序列。将该扩增方法应用于实际检出样本，成功获得我国来源的GII.8型诺如病毒基因组序列。本发明方法具有操作简单、周期短、易推广等优点，可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求及相应的科研领域。
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公开(公告)号：CN107475209A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710640633.2
申请日：2017-07-31
CPC分类号： C12N9/0069 , C12N15/815 , C12Y113/12007
摘要： 本发明公开了一种荧光素酶的制备方法，本发明方法包括：荧光素酶基因的克隆与表达载体的构建、荧光素酶表达载体转化毕赤酵母和筛选转化子、荧光素酶的表达及粗酶液的提取、荧光素酶的分离和纯化。本发明荧光素酶的制备方法简便、高效，在菌体培养过程中，具有培养条件要求简单、无需添加抗生素维持基因的稳定性、诱导剂成本低、培养周期短等优点。本发明制备方法可生产大小为70kDa且带有α-因子分泌肽的融合荧光素酶。本发明制备方法中，胞内胞外的粗酶液均具有较好的酶活性，且粗酶纯化后的比活可达7.0×108RLU/mg，摇瓶发酵产量可达到48mg/L，为荧光素酶的大量生产提供了新的方法，具有良好的应用前景和市场价值。
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公开(公告)号：CN108823331B
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN201810646156.5
申请日：2018-06-21
摘要： 本发明公开了一种GII.6型诺如病毒基因组的扩增引物和扩增方法。本发明针对GII.6型诺如病毒基因组特征采用了“4+1+1”的分段扩增策略，在保守区域设计了六组扩增引物和两条基因组末端测序引物，以目标病毒RNA为模板进行RT‑PCR扩增与测序，再通过拼接比对，获得GII.6型诺如病毒基因组序列。将该扩增方法应用于实际检出样本，成功获得我国来源的GII.6型诺如病毒基因组序列。本发明方法具有操作简单、周期短、易推广等优点，可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求及相应的科研领域。
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公开(公告)号：CN108796128B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201810646112.2
申请日：2018-06-21
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6869 , C12Q1/686 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种GII.8型诺如病毒基因组的扩增引物和扩增方法。本发明针对GII.8型诺如病毒基因组特征采用了“4+1+1”的分段扩增策略，在保守区域设计了六组扩增引物和两条基因组末端测序引物，以目标病毒RNA为模板进行RT‑PCR扩增与测序，再通过拼接比对，获得GII.8型诺如病毒基因组序列。将该扩增方法应用于实际检出样本，成功获得我国来源的GII.8型诺如病毒基因组序列。本发明方法具有操作简单、周期短、易推广等优点，可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求及相应的科研领域。
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公开(公告)号：CN109797232B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201910095638.0
申请日：2019-01-31
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6869 , C12Q1/04 , C12R1/01
摘要： 本发明公开了一种丙二酸盐克罗诺杆菌CRISPR分型方法。本方法通过对丙二酸盐克罗诺杆菌的四种CRISPR分子进行DNA测序，提取序列中的间隔序列，根据几者的间隔序列组合确定丙二酸盐克罗诺杆菌的CRISPR型别。本发明方法简单、快速、低成本、分辨率高于MLST分型方法，无环境污染，对实验室设备要求低，且CRISPR分子保存有历史侵染的噬菌体及质粒等诸多信息，可联合数据库实现全国甚至全球标准化分子溯源，适合推广至食品、检验检疫等领域。
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公开(公告)号：CN110093392A
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201910272325.8
申请日：2019-04-04
摘要： 本发明公开了一种四霉素A高产菌株YB101及其筛选方法和发酵生产方法。本发明对化学诱变复合紫外诱变处理后的大量菌株进行筛选时，利用多孔板培养技术并结合酶标仪检测结合于一体的简便、快速、精准、高效的高通量筛选技术应用于筛选高产目标产物的活性菌株，从而得到高产TMA活性菌株。本发明因此能够大大减轻工作量，提高筛选效率，并且操作程序简单，方法稳定，重现性好。在发酵培养过程中，利用优化的发酵条件，向发酵培养液中加入甘油，其最佳添加量的体积比为8.0％，用此含有甘油的发酵培养液对白色链霉菌进行发酵培养，通过优化发酵条件，最终检测TMA在发酵液中的产量为960.0μg/mL，相比菌株YB101的产量385.0μg/mL，提高了2.5倍。
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公开(公告)号：CN108893467A
公开(公告)日：2018-11-27
申请号：CN201810644193.2
申请日：2018-06-21
摘要： 本发明公开了一种GI.1型札幌病毒基因组扩增引物和扩增方法。本发明针对GI.1型札幌病毒基因群，根据其基因组特征采用了“4+1+1”的分段扩增策略，在保守区域设计了六组扩增引物和一条5'端测序引物，以目标病毒RNA为模板进行RT-PCR扩增与测序，再通过拼接比对，获得GI.1型札幌病毒基因组全长序列。在优化反应条件下，六组扩增引物的灵敏度均能达到或超过常规检测引物；将该扩增引物应用于实际检出样本，获得了我国GI.1型札幌病毒样本的基因组序列。本发明可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有札幌病毒检测需求的机构以及相应的科研领域。
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公开(公告)号：CN107389919A
公开(公告)日：2017-11-24
申请号：CN201710626026.0
申请日：2017-07-27
IPC分类号： G01N33/533 , G01N33/558 , G01N33/543
摘要： 本发明公开了一种免标记荧光适配体传感器及其制备方法和在快速检测虾致敏蛋白中的应用。本发明免标记荧光适配体传感器包括磁性纳米微球、捕获探针和适配体，磁性纳米微球表面修饰有捕获探针，捕获探针与适配体通过碱基互补配对连接形成双链DNA；适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，捕获探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明免标记荧光适配体传感器用于虾致敏蛋白的快速检测，具有抗干扰能力强、检测准确度高、稳定性好、重复性强等优点，具有良好的应用前景和市场价值。
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