一种高效基因转录激活系统及其应用

    公开(公告)号:CN119372231A

    公开(公告)日:2025-01-28

    申请号:CN202310880326.7

    申请日:2023-07-18

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明涉及一种高效的基因转录激活系统及其应用。所述系统包括正调控基因,以及位于该正调控基因上游并且被该正调控基因所表达的正调控蛋白结合的DNA序列及其相应的启动子。该系统通过利用受正调控基因所表达的正调控蛋白结合的UAS序列及其相应的启动子来表达该正调控基因,刚合成的正调控蛋白可以马上结合到上游的UAS序列,通过与σ54因子互作刺激相应启动子下游正调控基因表达,合成更多的正调控蛋白,形成正反馈转录调控表达循环。本发明提供了以nifA基因作为正调控基因的基因转录激活系统,有效提高了高固氮酶酶活,以及吲哚‑3‑乙酸和灵菌红素产量。本发明还提供了以slnR基因作为正调控基因的基因转录激活系统,有效提高了盐霉素产量。

    通过改造白色链霉菌ZD11-M4菌株提高柔红霉素发酵水平的方法

    公开(公告)号:CN119101715A

    公开(公告)日:2024-12-10

    申请号:CN202411239791.3

    申请日:2024-09-05

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种通过改造白色链霉菌ZD11‑M4菌株提高柔红霉素发酵水平的方法。本发明通过在白色链霉菌ZD11‑M4中过表达来自天蓝淡红链霉菌CICC 11043菌株的转运蛋白基因drrAB2和DNA损伤修复蛋白基因drrC2,显著增强了柔红霉素的外排效率和DNA损伤修复能力,从而提高柔红霉素的发酵水平:过表达drrAB2的工程菌株的柔红霉素产量提高了至少41%,而过表达drrC2的工程菌株的柔红霉素产量提高了至少64%。本发明提供了一种高效且稳定的柔红霉素生产策略,具有广泛的产业化应用前景。

    一种添加茶多酚促进聚赖氨酸发酵生产的方法

    公开(公告)号:CN116751822A

    公开(公告)日:2023-09-15

    申请号:CN202310771625.7

    申请日:2023-06-28

    Abstract: 本发明公开了一种添加茶多酚促进聚赖氨酸发酵生产的方法。本发明在ε‑聚赖氨酸发酵中,按照添加茶多酚浓度在0.5‑2.5g/L范围进行分批发酵,能有效生产ε‑聚赖氨酸。在摇瓶中添加1.4g/L茶多酚时,ε‑聚赖氨酸产量和菌体浓度分别比对照高15.1%和10.9%。在罐分批发酵中,ε‑聚赖氨酸产量和细胞干重分别比对照高21.3%和25.5%。结合补料分批发酵,流加浓缩碳源和混合氮源,同时间隔补加茶多酚,ε‑聚赖氨酸产量和菌体浓度分别达43.4g/L和42.0g/L,产物产率达5.21g/(L·d)。同时发现,细胞活力和呼吸强度明显增强,有利于促进细胞代谢和产物积累。转录组结果也表明,茶多酚有利于某些氨基酸和蛋白质的产生,进而促进了ε‑聚赖氨酸合成。本发明将茶多酚应用于ε‑聚赖氨酸发酵,实现ε‑聚赖氨酸高效生产。

    一种在白色链霉菌中高效合成默诺霉素A的方法

    公开(公告)号:CN112410278B

    公开(公告)日:2023-01-10

    申请号:CN202011374492.2

    申请日:2020-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种在白色链霉菌中高效合成默诺霉素A的方法;是基于默诺霉素A生物合成基因簇异源表达宿主Streptomyces.albus导入定点突变型A类青霉素结合蛋白基因优化其异源宿主的方法,默诺霉素A通过作用于细菌细胞壁aPBP的肽聚糖糖基转移酶结构域活性位点,来高效抑制革兰氏阳性细菌细胞壁的合成。通过基因工程的手段对默诺霉素生物合成基因簇进行大片段组装和启动子优化,在优化菌株II中导入默诺霉素A抗性基因MaPBP进一步提高菌株II默诺霉素耐受性。最终在菌株LX03中默诺霉素A异源表达产量相比出发菌株I提高了110%。本发明不仅阐述了大片段基因簇的基因工程改造方法,同时也开启了抗性基因优化Streptomyces.albus宿主来提高目标化合物产量的先河。

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