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公开(公告)号：CN110467593B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201910851903.3
申请日：2019-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07D311/58 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种羧胺类化合物及其应用，属于预防和治疗动物病毒性疫病药物制备技术领域。本发明所述羧胺类化合物为2‑亚氨基‑2H‑色烯‑3‑甲酰胺。本发明所述羧胺类化合物无显著生物毒性，可以在低剂量有效控制水疱性口炎病毒在BHK21细胞中的增殖，延缓细胞病变的发生，在大剂量状态下可以完全阻断病毒的增殖，为水疱性口炎病毒的流行病预防和控制争取到时间窗，也为已患病个体的治疗提供了新药物。
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公开(公告)号：CN112342243A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN201910720664.8
申请日：2019-08-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/867 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及表达人源sting蛋白的猪源细胞的构建方法和应用，属于细胞构建技术领域。本发明利用CRISPR‑Cas9载体构建猪源细胞Sting敲除细胞株，在此基础上利用慢病毒表达载体表达人源sting蛋白。本发明所述构建方法使用人源化Sting蛋白替换猪源细胞内源性sting蛋白，替换后所有针对人源sting蛋白的抗体和抑制剂、激活剂都可以猪源细胞中使用，对于研究Sting蛋白在猪源病毒感染过程中的作用具有广泛的应用。
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公开(公告)号：CN112342242A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN201910720572.X
申请日：2019-08-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及sting敲除猪源细胞的构建方法及应用，属于细胞构建技术领域。本发明利用CRISPR‑Cas9载体及慢病毒包装技术构建猪源细胞Sting敲除细胞株。本发明所述构建方法能够成功构建猪源Sting蛋白缺失的稳定细胞株，该细胞株可作为工具细胞，用于研究Sting蛋白在细胞抗病毒感染过程中的作用抑制；探索其作为疫苗生产细胞株，保护易感动物免受口蹄疫病毒感染的可能性。
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公开(公告)号：CN110467593A
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201910851903.3
申请日：2019-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07D311/58 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种羧胺类化合物及其应用，属于预防和治疗动物病毒性疫病药物制备技术领域。本发明所述羧胺类化合物为2-亚氨基-2H-色烯-3-甲酰胺。本发明所述羧胺类化合物无显著生物毒性，可以在低剂量有效控制水疱性口炎病毒在BHK21细胞中的增殖，延缓细胞病变的发生，在大剂量状态下可以完全阻断病毒的增殖，为水疱性口炎病毒的流行病预防和控制争取到时间窗，也为已患病个体的治疗提供了新药物。
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公开(公告)号：CN110241075A
公开(公告)日：2019-09-17
申请号：CN201910534620.6
申请日：2019-06-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种人正常PDLCs的分离和培养的方法，具体涉及细胞培养技术领域，包括以下步骤：步骤一，取第一前磨牙放置于烧杯容器内，向烧杯容器内倒入pH值在7.2-7.4的PBS缓冲液对第一前磨牙进行冲洗，然后重复冲洗五次，去除第一前磨牙表面的污垢和杂质；步骤二，将冲洗后的第一前磨牙放在无菌环境下进行晾干后，刮取第一前磨牙根部外壁上的1/3牙周膜，添加至容器内。本发明通过对人体牙周膜细胞进行提取，并对提取后的细胞进行多次PBS冲洗，细胞经过PBS清洗会去除细胞中的杂质，能够保持细胞能在适合的PH值范围之内，并对牙周膜细胞进行消化离心，使得分离后的牙周膜细胞便于进行培养，提高了牙周膜细胞在培养过程中的成活率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110229809A
公开(公告)日：2019-09-13
申请号：CN201910534645.6
申请日：2019-06-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种Rochel反转录试剂及其制备方法，具体涉及细胞生物科技领域，包括去离子水、EASY Dilution for Real Time PCR、gDNA Eraser、5x gDNA Eraser Buffer、RNase抑制剂和基因引物，所述基因引物包括端粒酶反转录酶、酸甘油醛脱氢酶、碱性磷酸酶、核心结合因子、骨涎蛋白、骨钙素、骨桥素和Ⅰ型胶原蛋白。本发明通过设有多种组合基因引物，便于骨质细胞繁殖，应用过程中反转录速度快，且成活率高，生长率好，有利于牙周膜再生治疗研究，生产过程中无菌处理，并采用低温储存，反转录试剂质量好，储备时间长，能够满足DNA生物合成需要。
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公开(公告)号：CN107164411A
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201710511865.8
申请日：2017-06-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/867 , C12N5/10 , C12N9/12
CPC classification number: C12N15/86 , C12N9/1205 , C12N2740/15043 , C12N2830/003
Abstract: 本发明公开了一种程序性坏死诱导系统的建立方法，将RIPK3‑2×FKBP目的基因片段连入含有Tet‑On系统的慢病毒载体，构建可诱导表达的系统；经测序正确的载体与慢病毒元件载体共转染至293T细胞，收集病毒液感染Hela细胞和A549细胞，通过嘌呤霉素筛选得到稳定的细胞系；通过向培养基中加入多西环素诱导稳定细胞表达RIPK3‑2×FKBP蛋白，然后再加入二聚物诱导RIPK3二聚化；通过免疫印迹实验以及相关的实验技术手段分析实验结果。本发明的有益效果是通过Dox和Idimer诱导细胞发生程序性坏死，其灵敏度、效率更高，特异性更强，能够快速诱导细胞发生坏死。
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公开(公告)号：CN107034309A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201610076566.1
申请日：2016-02-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/705 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2565/625
Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的实时荧光RPA试剂盒及其用途，还公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的试纸条RPA试剂盒及其用途。该两种试剂盒分别包括SEQ ID NO.1及SEQ ID NO.2所示的引物及各自的探针，虽然针对同一靶标序列，但引物和探针的修饰碱基和检测平台不同。实验证明本发明的两个试剂盒的敏感性均为102拷贝/反应，并均只能特异性检测猪伪狂犬病毒。分别用本发明的两个试剂盒检测猪伪狂犬病毒疑似样品，结果表明这两个试剂盒的检测结果与qPCR的符合度均为100％。因此，本发明的两个试剂盒均能快捷、高效、灵敏的检测猪伪狂犬病毒，为猪伪狂犬病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号：CN114805609B
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202210571519.X
申请日：2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种猪瘟病毒E2‑E0融合蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种猪瘟病毒E0截短蛋白与猪瘟病毒E2蛋白的E2‑E0融合蛋白，不仅能够促进E0蛋白的表达，而且不影响E0蛋白和E2蛋白的免疫原性，可用于猪瘟亚单位疫苗的制备；在上述猪瘟病毒E0截短蛋白的基础上，本发明发现，将猪瘟病毒E0截短蛋白的第160位、162位、165位和166位氨基酸均突变为甘氨酸G，能够使E2‑E0融合蛋白的表达量进一步提升20％以上，且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号：CN116870145A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202310648279.3
申请日：2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白和Y蛋白组成的九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合，其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒；所述九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应；制备的九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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