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公开(公告)号:CN114316036B
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202210011206.9
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1,所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性,而不和A型毒株进行反应;而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
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公开(公告)号:CN114316036A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210011206.9
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1,所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性,而不和A型毒株进行反应;而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
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公开(公告)号:CN114316035A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210010319.7
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得两株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了两种鼠单克隆抗体m33和m77。免疫印迹和间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m33和m77对O型不同谱系病毒和A型谱系不同病毒均具有广谱反应性。m33和m77抗体特异性结合在FMDV结构蛋白中的型间保守抗原表位,相较于现有抗体,显著提高了检测结果的灵敏度和特异性,适用于O型和A型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法。
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公开(公告)号:CN113082049B
公开(公告)日:2022-01-14
申请号:CN202110442821.0
申请日:2021-04-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K33/18 , A61P31/20 , A61K31/4155
Abstract: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域,具体涉及碘化钾或含有碘化钾的组合物用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明意外发现,碘化钾(KI)能够抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72和p30的表达,抑制非洲猪瘟病毒基因拷贝数和病毒滴度,能够抑制ASFV的复制和感染,用于预防或治疗非洲猪瘟;同时,本发明发现,碘化钾(KI)联合ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒蛋白p30、p72的表达,阻止病毒入侵宿主细胞,可用于抑制ASFV感染的整个时期;并且碘化钾(KI)联合ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒的复制,降低非洲猪瘟病毒感染后的病毒滴度,可作为非洲猪瘟病毒的抑制剂,用于预防或治疗非洲猪瘟。
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公开(公告)号:CN109735499B
公开(公告)日:2021-10-15
申请号:CN201910037462.3
申请日:2019-01-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系及其建立方法和应用。所述的新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系,命名为新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系hTERT‑NBSC,其保藏编号CCTCC NO:C2018201。试验发现,hTERT‑NBSC可以连续传代65代以上,且生长增殖特性保持不变。该细胞系对接种ORFV较为敏感,可以高效增殖ORFV病毒,且可以保证病毒的均一、稳定。用该细胞系所增殖的ORFV病毒滴度与新生牛睾丸支持细胞相当,且细胞分种率高于NBSC,分种率可达1:3。同时利用该传代细胞系来制备疫苗,简化了生产工艺、缩短了生产周期,降低了生产成本,同时还保证了制备得到的羊传染性脓疱病疫苗的质量稳定。因此,本发明的提出对羊传染性脓疱病疫苗的规模化生产提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN113082049A
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202110442821.0
申请日:2021-04-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K33/18 , A61P31/20 , A61K31/4155
Abstract: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域,具体涉及碘化钾或含有碘化钾的组合物用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明意外发现,碘化钾(KI)能够抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72和p30的表达,抑制非洲猪瘟病毒基因拷贝数和病毒滴度,能够抑制ASFV的复制和感染,用于预防或治疗非洲猪瘟;同时,本发明发现,碘化钾(KI)联合ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒蛋白p30、p72的表达,阻止病毒入侵宿主细胞,可用于抑制ASFV感染的整个时期;并且碘化钾(KI)联合ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒的复制,降低非洲猪瘟病毒感染后的病毒滴度,可作为非洲猪瘟病毒的抑制剂,用于预防或治疗非洲猪瘟。
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公开(公告)号:CN107034309B
公开(公告)日:2020-06-16
申请号:CN201610076566.1
申请日:2016-02-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的实时荧光RPA试剂盒及其用途,还公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的试纸条RPA试剂盒及其用途。该两种试剂盒分别包括SEQ ID NO.1及SEQ ID NO.2所示的引物及各自的探针,虽然针对同一靶标序列,但引物和探针的修饰碱基和检测平台不同。实验证明本发明的两个试剂盒的敏感性均为102拷贝/反应,并均只能特异性检测猪伪狂犬病毒。分别用本发明的两个试剂盒检测猪伪狂犬病毒疑似样品,结果表明这两个试剂盒的检测结果与qPCR的符合度均为100%。因此,本发明的两个试剂盒均能快捷、高效、灵敏的检测猪伪狂犬病毒,为猪伪狂犬病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN110229793A
公开(公告)日:2019-09-13
申请号:CN201910534638.6
申请日:2019-06-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种腺病毒颗粒获得方法,具体涉及腺病毒获取领域,具体操作步骤如下:S1、pshuttle-cmv-hTERT穿梭质粒的构建;S2、BJ5183/p超级感受态的制备;S3、同源重组腺病毒质粒构建;S4、腺病毒颗粒收集。本发明通过pshuttle-cmv-hTERT穿梭质粒的构建、BJ5183/p超级感受态的制备、同源重组腺病毒质粒构建以及腺病毒颗粒收集共四个步骤,能够稳定的获取腺病毒,且每次获取的腺病毒颗粒数都能够保持稳定,相比于现有技术中腺病毒的获取,获取效率以及稳定性都得到了很大的提高。
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公开(公告)号:CN120060362A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202410826564.4
申请日:2024-06-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株、方法及应用,通过在基因Ⅱ型非洲猪瘟病毒中抑制ASFV‑G‑ACD‑01020基因表达、缺失或条件性敲除ASFV‑G‑ACD‑01020基因制备减毒非洲猪瘟病毒株的应用,所述的ASFV‑G‑ACD‑01020基因序列如SEQ ID NO.4所示;制备得到的非洲猪瘟病毒株ASFV 01020i对猪完全致弱、免疫猪无典型ASF临床症状、且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控ASF疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN116672443B
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202310647769.1
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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