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公开(公告)号：CN110272919A
公开(公告)日：2019-09-24
申请号：CN201910593462.1
申请日：2019-07-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/66 , C12N5/10 , C12Q1/686
Abstract: 本发明提供一种寻找胚胎干细胞向原始生殖细胞分化过程中Wnt信号通路的靶基因的方法，涉及生物技术领域，本发明所述方法首先对Wnt信号通路的关键转录因子TCF7L2进行靶基因预测，对预测靶基因进行GO功能注释，筛选出其中共同参与生殖细胞发育及干细胞分化的保守性靶基因作为待选靶基因；通过体内外试验验证Wnt信号对待选靶基因转录水平的调控作用，检测待选靶基因的启动子中所述转录因子结合位点缺失时、Wnt信号对待选靶基因转录水平是否有调节作用，通过ChIP-qPCR验证β-Catenin/转录因子复合物与待选靶基因的结合作用，从而确定待选靶基因是否对Wnt信号具有靶向响应作用。本发明所述方法简单易行。
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公开(公告)号：CN104745527B
公开(公告)日：2018-01-05
申请号：CN201510193606.6
申请日：2015-04-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种新的快速鸡胚盘的分离方法：首先将鸡胚钝端向上握在手中，用镊子尖头轻轻在受精蛋中部钻出一个小孔后，将镊子一端插入小孔，沿着赤道线方向，依次用镊子夹碎蛋壳，延赤道线分离蛋壳一圈后，轻轻的剥离钝端蛋壳，在此过程中应尽量保持鸡胚水平，防止卵黄随蛋清流出；剥离蛋壳后，用镊子将蛋清从卵黄中分离；使用镊子的侧面拨动卵黄，寻找胚盘；找到胚盘后，尽量将胚盘拨到正中央，用剪刀沿胚盘四周呈正方形剪开，此时，使用镊子夹住将含有胚盘的正方形卵黄膜一角，沿水平方向轻轻拉出来，将此卵黄膜放入37℃的PBS的培养皿中，轻轻晃动培养皿,使卵黄和卵黄膜从胚盘上脱离下来，从而获得了完整的胚盘。
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公开(公告)号：CN107389884A
公开(公告)日：2017-11-24
申请号：CN201710607530.6
申请日：2017-07-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及食品学和畜牧学领域，具体涉及一种雪山鸡肉品质综合评价的方法。该方法是测定鸡肉样品的ATP、IMP、屠宰后1小时的pH值、系水力、剪切力、肉色和IMF这7个肉品质评价指标，分别将每个肉品质指标测得数据的平均值转换成对应等级的指标值，代入公式，计算出肉品质性状的适宜选择指数MQI值，依据MQI值得分确定鸡肉品质的优劣。本发明方法选定了7个主要的肉品质评价指标，规范了它们的测定方法，从而能够获得更加准确、可靠地实验数据；通过对各评价指标进行相关性分析，确定它们之间的相互关系，从而为建立统一的评价方法与标准提供参考。
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公开(公告)号：CN101899433A
公开(公告)日：2010-12-01
申请号：CN201010187641.4
申请日：2010-05-28
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及基因克隆等领域，具体涉及一种克隆湖羊肌细胞生成素基因编码区全序列的方法。该方法是依据已发表的波尔山羊肌细胞生成素基因序列，针对三个外显子设计三对具有末端互补序列的特异性引物并引入酶切位点，以湖羊基因组DNA为模板，扩增肌细胞生成素外显子并切胶回收，以回收的片段为模板，通过重叠PCR将其拼接得到湖羊肌细胞生成素基因编码区全序列，其与FJ607135序列，同源性达99％。
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公开(公告)号：CN101717826A
公开(公告)日：2010-06-02
申请号：CN200910234680.2
申请日：2009-11-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种体外重组鸡Mx蛋白的细胞定位方法，该方法利用增强型绿色荧光蛋白基因与鸡抗粘性病毒蛋白Mx基因构建融合表达载体pcDNA3.0/EGFP-Mx，使融合表达载体在NIH-3T3细胞获得表达，然后通过检测融合表达蛋白在细胞水平上的表达位置，建立快速、简捷定位鸡抗病毒蛋白Mx的表达的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100494358C
公开(公告)日：2009-06-03
申请号：CN200610038612.5
申请日：2006-03-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 鸡胚原始生殖细胞的玻璃化冷冻方法，涉及对发育至第19期(孵化约3天)和第28期(孵化约5.5天)鸡胚性腺原始生殖细胞进行玻璃化冷冻保存的方法。将鸡胚原始生殖细胞加入玻璃化冷冻液后，移入冷冻管，于4℃±1℃下平衡5min±0.5min，液氮面上静置1min±0.5min，最后，直接投入液氮。本发明操作简单、快捷，克服了常规慢速冷冻保存方法中需长时间平衡和逐步降温的特点，保存效果稳定、可靠，可以作为传统的禽类遗传资源保存方式的拓展。
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公开(公告)号：CN100366734C
公开(公告)日：2008-02-06
申请号：CN200610038610.6
申请日：2006-03-02
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 一种鸡精原细胞分离纯化方法，涉及转基因、珍稀物种的保存和组织与细胞工程等领域。本发明先分离鸡精原细胞，然后进行Percoll分离、贴壁纯化，本发明首次对不同时期鸡胚的睾丸，比较以组合酶和Percoll介质梯度的分离方法，并依据睾丸细胞不同贴壁特性进行纯化，以探索合适的鸡精原细胞分离方法、时期、及精原细胞纯化的可能性。通过从鸡睾丸组织中分离出精原细胞，并经过Percoll梯度离心和贴壁纯化方法进一步对鸡精原细胞进行纯化，能制备出睾丸细胞数和存活率都较高的生精上皮细胞悬液，而且还能确保去除睾丸中其它体细胞成分。
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公开(公告)号：CN1944636A
公开(公告)日：2007-04-11
申请号：CN200610096971.6
申请日：2006-10-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种家猪耳皮肤组织冷冻保存方法，其特征是将家猪耳皮肤组织置于冷冻保护液中，先在环境温度为18～24℃条件下平衡20～30分钟，然后用液氮蒸气熏蒸至冷冻保护液结冻后，再将家猪耳皮肤组织置于液氮面上8～20小时后，投入液氮中保存。通过本发明可获得对家猪耳皮肤组织冷冻保存，解冻后，皮肤组织生长能力。本发明操作简单，无需特殊冷冻仪器，样本收集非常方便，适合于珍稀动物体细胞的长期保存。
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公开(公告)号：CN1935986A
公开(公告)日：2007-03-28
申请号：CN200610096631.3
申请日：2006-10-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种定向诱导鸡胚精原干细胞分化为成骨细胞的方法，属于细胞工程技术领域。其特征是将所提取获得的鸡精原干细胞接种于无饲养层培养瓶内，利用条件培养液进行诱导培养，所述培养液为：DMEM高糖培养基中含有10％小牛血清、2％的鸡血清、2mmol/L L－谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10－5mol/L β－巯基乙醇、10μl/ml非必需氨基酸、10－7mol/L地塞米松、0.01mol/L β－磷酸甘油钠、0.05g/L维生素C。本发明工艺先进，操作简单，可重复性强，为实施细胞替代疗法，为最终实现组织器官的再生和替换提供可能，并借此希望找到一条建立大规模生产所需细胞平台的途径，进而为发育生物学、医学、遗传学领域开拓一个崭新的研究前景。
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公开(公告)号：CN1935985A
公开(公告)日：2007-03-28
申请号：CN200610096630.9
申请日：2006-10-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 一种获得鸡EPGCs单细胞克隆的方法，其特征是利用第四代的鸡EPGCs进行单细胞克隆制备，并对克隆制备的单细胞进行培养和传代，获得遗传均一的鸡EPGCs细胞。本发明方法简便易行，无需特殊的仪器要求，采用常规的细胞培养操作即可完成单细胞克隆的制作过程。通过对获得的细胞进行形态学和染色鉴定，证明所培养的细胞仍保持其原有特性。单细胞克隆培养获得的细胞可以直接应用于发育生物学研究、基因组印记研究和医学功能研究领域。由于经单细胞克隆制备培养后的细胞遗传可变性减小，所以可用于研究不同因素对于细胞的影响。
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