公开(公告)号：CN104745527A

公开(公告)日：2015-07-01

申请号：CN201510193606.6

申请日：2015-04-22

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李碧春 ,  张亚妮 ,  张振韬 ,  左其生 ,  李东 ,  张蕾 ,  连超 ,  肖天荣 ,  汤贝贝

IPC: C12N5/073

Abstract: 本发明公开了一种新的快速鸡胚盘的分离方法：首先将鸡胚钝端向上握在手中，用镊子尖头轻轻在受精蛋中部钻出一个小孔后，将镊子一端插入小孔，沿着赤道线方向，依次用镊子夹碎蛋壳，延赤道线分离蛋壳一圈后，轻轻的剥离钝端蛋壳，在此过程中应尽量保持鸡胚水平，防止卵黄随蛋清流出；剥离蛋壳后，用镊子将蛋清从卵黄中分离；使用镊子的侧面拨动卵黄，寻找胚盘；找到胚盘后，尽量将胚盘拨到正中央，用剪刀沿胚盘四周呈正方形剪开，此时，使用镊子夹住将含有胚盘的正方形卵黄膜一角，沿水平方向轻轻拉出来，将此卵黄膜放入37℃的PBS的培养皿中，轻轻晃动培养皿,使卵黄和卵黄膜从胚盘上脱离下来，从而获得了完整的胚盘。

公开(公告)号：CN101864427A

公开(公告)日：2010-10-20

申请号：CN201010187618.5

申请日：2010-05-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李碧春 ,  秦玉蓉 ,  许峰 ,  高波 ,  阴彦辉 ,  张振韬 ,  孙敏 ,  田智泉 ,  陈国宏

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/02 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一种徐淮山羊体外重组过氧化氢酶体激活增殖受体的细胞定位方法。该方法是先构建含过氧化氢酶体激活增殖受体基因的载体pMD19-T-PPAR，再构建含有增强型绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-C1-PPAR：最后通过聚乙烯亚胺介导pEGFP-C1-PPAR转染NIH-3T3细胞，48h后于荧光倒置显微镜下观察细胞的发荧光部位，以确定过氧化氢酶体激活增殖受体蛋白的细胞亚定位情况。

公开(公告)号：CN104745527B

公开(公告)日：2018-01-05

申请号：CN201510193606.6

申请日：2015-04-22

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李碧春 ,  张亚妮 ,  张振韬 ,  左其生 ,  李东 ,  张蕾 ,  连超 ,  肖天荣 ,  汤贝贝

IPC: C12N5/073

Abstract: 本发明公开了一种新的快速鸡胚盘的分离方法：首先将鸡胚钝端向上握在手中，用镊子尖头轻轻在受精蛋中部钻出一个小孔后，将镊子一端插入小孔，沿着赤道线方向，依次用镊子夹碎蛋壳，延赤道线分离蛋壳一圈后，轻轻的剥离钝端蛋壳，在此过程中应尽量保持鸡胚水平，防止卵黄随蛋清流出；剥离蛋壳后，用镊子将蛋清从卵黄中分离；使用镊子的侧面拨动卵黄，寻找胚盘；找到胚盘后，尽量将胚盘拨到正中央，用剪刀沿胚盘四周呈正方形剪开，此时，使用镊子夹住将含有胚盘的正方形卵黄膜一角，沿水平方向轻轻拉出来，将此卵黄膜放入37℃的PBS的培养皿中，轻轻晃动培养皿,使卵黄和卵黄膜从胚盘上脱离下来，从而获得了完整的胚盘。

公开(公告)号：CN101899433A

公开(公告)日：2010-12-01

申请号：CN201010187641.4

申请日：2010-05-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李碧春 ,  许峰 ,  秦玉蓉 ,  阴彦辉 ,  张振韬 ,  高波 ,  陈国宏

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明涉及基因克隆等领域，具体涉及一种克隆湖羊肌细胞生成素基因编码区全序列的方法。该方法是依据已发表的波尔山羊肌细胞生成素基因序列，针对三个外显子设计三对具有末端互补序列的特异性引物并引入酶切位点，以湖羊基因组DNA为模板，扩增肌细胞生成素外显子并切胶回收，以回收的片段为模板，通过重叠PCR将其拼接得到湖羊肌细胞生成素基因编码区全序列，其与FJ607135序列，同源性达99％。