公开(公告)号：CN1935988A

公开(公告)日：2007-03-28

申请号：CN200610096633.2

申请日：2006-10-13

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李碧春 ,  葛剑辉 ,  陈国宏 ,  秦洁 ,  吴信生 ,  赵文明 ,  徐琪 ,  孙国波 ,  戴建明 ,  孙鹏翔 ,  魏彩霞

IPC: C12N5/06

Abstract: 一种定向诱导鸡胚原始生殖细胞向脂肪细胞分化的方法，属于治疗性克隆、细胞工程、组织工程技术领域。本发明采用诱导剂I(90％DMEM+10％FBS+5.5×10－5β－巯基乙醇+1×10－6mol/L地塞米松+10mg/L胰岛素+5×10－4mol/L 3－异丁基－1－甲基黄嘌呤)与诱导剂II(90％DMEM+10％FBS+5.5×10－5β－巯基乙醇+10mg/L胰岛素)循环诱导法，对鸡胚原始生殖细胞进行体外定向诱导分化为脂肪细胞。本发明工艺先进简单，诱导剂和基础培养基配制科学合理。操作简便、可重复性强。为今后细胞替代疗法和组织治疗甚至器官移植提供新的来源，进而实现人类完美修复或替代因遗传或后天疾病引起的重要组织、器官的缺陷及损伤的理想。

公开(公告)号：CN1821389A

公开(公告)日：2006-08-23

申请号：CN200610038607.4

申请日：2006-03-02

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李碧春 ,  秦洁 ,  孙鹏翔

IPC: C12N5/06

Abstract: 一种禽类原始生殖细胞的体外培养方法，涉及转基因，动物克隆，珍稀动物的保存及组织与细胞工程等领域。将禽类原始生殖细胞接种到CEF饲养层上，再使用在DMEM高糖培养基中添加10％小牛血清、2％的鸡血清、2mmol/L L－谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸纳、5.5×10－5mol/L β－巯基乙醇、10μl/ml非必需氨基酸、15－20ng/ml hSCF、10U/ml mLIF、10－15ng/ml bFGF、0.04ng/ml hIL－11、10ng/ml IGF、100U/ml硫酸庆大霉素的培养液进行培养。本发明操作简便，可重复性强，为利用鸡原始生殖细胞进行体外操作和鸡胚胎PGCs的进一步建系奠定研究基础。

公开(公告)号：CN1935985A

公开(公告)日：2007-03-28

申请号：CN200610096630.9

申请日：2006-10-13

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李碧春 ,  秦洁 ,  戴建明 ,  陈国宏 ,  吴信生 ,  赵文明 ,  徐琪 ,  孙鹏翔 ,  葛剑辉 ,  孙国波 ,  魏彩霞

IPC: C12N5/06

Abstract: 一种获得鸡EPGCs单细胞克隆的方法，其特征是利用第四代的鸡EPGCs进行单细胞克隆制备，并对克隆制备的单细胞进行培养和传代，获得遗传均一的鸡EPGCs细胞。本发明方法简便易行，无需特殊的仪器要求，采用常规的细胞培养操作即可完成单细胞克隆的制作过程。通过对获得的细胞进行形态学和染色鉴定，证明所培养的细胞仍保持其原有特性。单细胞克隆培养获得的细胞可以直接应用于发育生物学研究、基因组印记研究和医学功能研究领域。由于经单细胞克隆制备培养后的细胞遗传可变性减小，所以可用于研究不同因素对于细胞的影响。