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公开(公告)号：CN1944636A
公开(公告)日：2007-04-11
申请号：CN200610096971.6
申请日：2006-10-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种家猪耳皮肤组织冷冻保存方法，其特征是将家猪耳皮肤组织置于冷冻保护液中，先在环境温度为18～24℃条件下平衡20～30分钟，然后用液氮蒸气熏蒸至冷冻保护液结冻后，再将家猪耳皮肤组织置于液氮面上8～20小时后，投入液氮中保存。通过本发明可获得对家猪耳皮肤组织冷冻保存，解冻后，皮肤组织生长能力。本发明操作简单，无需特殊冷冻仪器，样本收集非常方便，适合于珍稀动物体细胞的长期保存。
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公开(公告)号：CN1935986A
公开(公告)日：2007-03-28
申请号：CN200610096631.3
申请日：2006-10-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种定向诱导鸡胚精原干细胞分化为成骨细胞的方法，属于细胞工程技术领域。其特征是将所提取获得的鸡精原干细胞接种于无饲养层培养瓶内，利用条件培养液进行诱导培养，所述培养液为：DMEM高糖培养基中含有10％小牛血清、2％的鸡血清、2mmol/L L－谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10－5mol/L β－巯基乙醇、10μl/ml非必需氨基酸、10－7mol/L地塞米松、0.01mol/L β－磷酸甘油钠、0.05g/L维生素C。本发明工艺先进，操作简单，可重复性强，为实施细胞替代疗法，为最终实现组织器官的再生和替换提供可能，并借此希望找到一条建立大规模生产所需细胞平台的途径，进而为发育生物学、医学、遗传学领域开拓一个崭新的研究前景。
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公开(公告)号：CN1935985A
公开(公告)日：2007-03-28
申请号：CN200610096630.9
申请日：2006-10-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 一种获得鸡EPGCs单细胞克隆的方法，其特征是利用第四代的鸡EPGCs进行单细胞克隆制备，并对克隆制备的单细胞进行培养和传代，获得遗传均一的鸡EPGCs细胞。本发明方法简便易行，无需特殊的仪器要求，采用常规的细胞培养操作即可完成单细胞克隆的制作过程。通过对获得的细胞进行形态学和染色鉴定，证明所培养的细胞仍保持其原有特性。单细胞克隆培养获得的细胞可以直接应用于发育生物学研究、基因组印记研究和医学功能研究领域。由于经单细胞克隆制备培养后的细胞遗传可变性减小，所以可用于研究不同因素对于细胞的影响。
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公开(公告)号：CN100463963C
公开(公告)日：2009-02-25
申请号：CN200610096971.6
申请日：2006-10-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种家猪耳皮肤组织冷冻保存方法，其特征是将家猪耳皮肤组织置于冷冻保护液中，先在环境温度为18～24℃条件下平衡20～30分钟，然后用液氮蒸汽熏蒸至冷冻保护液结冻后，再将家猪耳皮肤组织置于液氮面上8～20小时后，投入液氮中保存。通过本发明可获得对家猪耳皮肤组织冷冻保存，解冻后，皮肤组织生长能力。本发明操作简单，无需特殊冷冻仪器，样本收集非常方便，适合于珍稀动物体细胞的长期保存。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1935987B
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN200610096632.8
申请日：2006-10-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种在体外对鸡胚原始生殖细胞进行定向诱导分化培养能获得成骨细胞的方法。采用由90％DMEM、10％FBS、5.5×10-5β-巯基乙醇、1×10-7mol/L地塞米松、0.01mol/Lβ-甘油磷酸钠、0.05g/L维生素C配制成的诱导剂，对鸡胚原始生殖细胞进行体外诱导分化培养，最终定向分化为成骨细胞。为临床医学研究建立细胞模型，广泛应用于组织工程领域提供可靠的实验数据，为今后细胞替代疗法和组织治疗甚至器官移植提供新的来源，进而实现人类完美修复或替代因遗传或后天疾病引起的重要组织、器官的缺陷及损伤的理想。本发明工艺简单，操作简便、可重复性强。无需特殊的仪器要求，只需要掌握一般的细胞分离和培养的操作。
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公开(公告)号：CN1935987A
公开(公告)日：2007-03-28
申请号：CN200610096632.8
申请日：2006-10-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种在体外对鸡胚原始生殖细胞进行定向诱导分化培养能获得成骨细胞的方法。采用由90％DMEM、10％FBS、5.5×10－5β－巯基乙醇、1×10－7mol/L地塞米松、0.01mol/L β－甘油磷酸钠、0.05g/L维生素C配制成的诱导剂，对鸡胚原始生殖细胞进行体外诱导分化培养，最终定向分化为成骨细胞。为临床医学研究建立细胞模型，广泛应用于组织工程领域提供可靠的实验数据，为今后细胞替代疗法和组织治疗甚至器官移植提供新的来源，进而实现人类完美修复或替代因遗传或后天疾病引起的重要组织、器官的缺陷及损伤的理想。本发明工艺简单，操作简便、可重复性强。无需特殊的仪器要求，只需要掌握一般的细胞分离和培养的操作。
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公开(公告)号：CN100455661C
公开(公告)日：2009-01-28
申请号：CN200610096629.6
申请日：2006-10-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种禽类精原干细胞的体外培养方法，涉及转基因，动物克隆，珍稀动物的保存及组织与细胞工程等领域。将禽类精原干细胞接种到CEF饲养层上，再使用在DMEM高糖培养基中添加10%小牛血清、2%鸡血清、2mmol/L L-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5mol/L β-巯基乙醇、10μl/ml非必需氨基酸、15-20ng/ml hSCF、10U/ml mLIF、10-15ng/ml bFGF、0.04ng/ml hIL-11、10ng/ml IGF、100U/ml硫酸庆大霉素的培养液中培养。此培养方法可为利用鸡精原干细胞进行体外操作和鸡胚胎精原干细胞的进一步建系奠定研究基础。
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公开(公告)号：CN1935988A
公开(公告)日：2007-03-28
申请号：CN200610096633.2
申请日：2006-10-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 一种定向诱导鸡胚原始生殖细胞向脂肪细胞分化的方法，属于治疗性克隆、细胞工程、组织工程技术领域。本发明采用诱导剂I(90％DMEM+10％FBS+5.5×10－5β－巯基乙醇+1×10－6mol/L地塞米松+10mg/L胰岛素+5×10－4mol/L 3－异丁基－1－甲基黄嘌呤)与诱导剂II(90％DMEM+10％FBS+5.5×10－5β－巯基乙醇+10mg/L胰岛素)循环诱导法，对鸡胚原始生殖细胞进行体外定向诱导分化为脂肪细胞。本发明工艺先进简单，诱导剂和基础培养基配制科学合理。操作简便、可重复性强。为今后细胞替代疗法和组织治疗甚至器官移植提供新的来源，进而实现人类完美修复或替代因遗传或后天疾病引起的重要组织、器官的缺陷及损伤的理想。
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公开(公告)号：CN1935984A
公开(公告)日：2007-03-28
申请号：CN200610096629.6
申请日：2006-10-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种禽类精原干细胞的体外培养方法，涉及转基因，动物克隆，珍稀动物的保存及组织与细胞工程等领域。将禽类精原干细胞接种到CEF饲养层上，再使用在DMEM高糖培养基中添加10％小牛血清、2％鸡血清、2mmol/L L－谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10－5mol/L β－巯基乙醇、10μl/ml非必需氨基酸、15－20ng/ml hSCF、10U/ml mLIF、10－15ng/ml bFGF、0.04ng/ml hIL－11、10ng/ml IGF、100U/ml硫酸庆大霉素的培养液中培养。此培养方法可为利用鸡精原干细胞进行体外操作和鸡胚胎精原干细胞的进一步建系奠定研究基础。
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