-
公开(公告)号:CN117683705A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311756853.3
申请日:2023-12-20
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明公开一种鸡多能干细胞体外培养方法,属于畜牧学和生物技术领域;通过添加FGF2、IWR‑1和XAV‑93,并以STO细胞为饲养层,建立FIX培养体系,从鸡新鲜种蛋EGK.X期分离胚盘明区细胞,在FIX培养体系中,采用5%CO2、饱和湿度的37℃培养箱进行培养,每天更换培养液,每2‑3天传代一次,进行鸡多能干细胞PSCs体外培养;本发明提供的方法可以在短期内使鸡PSCs快速增殖,且维持其多能性和分化潜能;为研究鸡PSCs生物学特性提供了材料,为家禽的良种扩繁、基因修饰、家禽分子设计育种和种质资源冷冻保存等提供了新的方法、奠定了实验基础。
-
公开(公告)号:CN116656735A
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202310721034.9
申请日:2023-06-19
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/53
Abstract: 本发明提供了一种鸡CYP19A1基因可诱导敲除系统及其构建方法和应用,属于基因编辑技术领域。本发明的鸡CYP19A1基因可诱导敲除系统,包括TRE‑CAS9‑rtTA‑Puro载体和sgRNA‑sy004载体。本发明将由TRE‑CAS9‑rtTA‑Puro载体和sgRNA‑sy004载体组成的鸡CYP19A1基因可诱导敲除系统转染入待敲除细胞中,能够在Dox的作用下,诱导CAS9表达,以此控制鸡CYP19A1基因敲除程度,避免基因过度敲除,无法控制激素水平,影响鸡体存活。
-
公开(公告)号:CN115885975A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202211589326.3
申请日:2022-12-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种高效的鸡胚组织块冻存复苏的方法,属于生物技术领域。本发明在鸡胚中分离组织块,加入组织块冷冻保护液后进行冻存,复苏组织块后游离出鸡成纤维细胞;本发明为稀缺物种(如地方畜禽品种)的细胞建库以进行大规模组织块冻存以及种质资源保存提供依据。
-
公开(公告)号:CN1821393A
公开(公告)日:2006-08-23
申请号:CN200610038612.5
申请日:2006-03-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 鸡胚原始生殖细胞的玻璃化冷冻方法,涉及对发育至第19期(孵化约3天)和第28期(孵化约5.5天)鸡胚性腺原始生殖细胞进行玻璃化冷冻保存的方法。将鸡胚原始生殖细胞加入玻璃化冷冻液后,移入冷冻管,于4℃±1℃下平衡5min±0.5min,液氮面上静置1min±0.5min,最后,直接投入液氮。本发明操作简单、快捷,克服了常规慢速冷冻保存方法中需长时间平衡和逐步降温的特点,保存效果稳定、可靠,可以作为传统的禽类遗传资源保存方式的拓展。
-
公开(公告)号:CN117683813A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311701086.6
申请日:2023-12-12
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
Abstract: 本发明提供了DF‑1细胞中EE0.6位点敲除载体和NC_006127.4位点敲除载体,属于基因编辑技术领域。本发明通过设计靶向EE0.6序列的sgRNA和靶向NC_006127.4位点的sgRNA,设计oligo引物,将双链oligo与PX458质粒、PX461连接,获得不同的重组质粒,本发明还制备了双sgRNA敲除载体,并将不同的重组质粒导入DF‑1细胞中,获得了不同的EE0.6位点和NC_006127.4的敲除载体,并进行了敲除效率验证。结果表明,DF‑1细胞中EE0.6位点敲除载体以及NC_006127.4位点敲除载体构建成功,为DF‑1细胞外源靶基因高效整合奠定了基础。
-
公开(公告)号:CN116042715A
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202310028001.6
申请日:2023-01-09
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明提供了一种鸡TDRD1基因启动子区域组蛋白甲基化水平的调控方法,属于基因编辑技术领域。本发明的方法包括如下步骤:(1)设计并扩增得到靶向鸡TDRD1基因启动子区域的sgRNA;(2)将酶切后的dCas9‑LSD1载体与步骤(1)的sgRNA连接,得到具有靶向性的dCas9‑LSD1打靶载体;(3)将所述dCas9‑LSD1打靶载体转染入细胞中,来调控鸡TDRD1基因启动子区域组蛋白甲基化水平。本发明构建的dCas9‑LSD1打靶载体可以作用于特定基因局部的启动子区位点,可以调控区域性的组蛋白甲基化水平,还可以明确在鸡SSC发育过程中组蛋白甲基化修饰区域。
-
公开(公告)号:CN116179670A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202310096548.X
申请日:2023-02-10
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
IPC: C12Q1/6876 , C12N15/11 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明属于基因检测技术领域,本发明提供了一种快速鉴定外源cop‑GFP的方法。本发明根据cop‑GFP的DNA序列设计合成地高辛探针,使用离心柱纯化法提取待测样本的DNA,将所述待测样本的DNA进行煮沸处理后加到薄膜上,将膜DNA面与预杂交液混合进行预杂交,再取出与含地高辛探针的杂交液混合进行杂交过夜,漂洗得探针交联膜,最后使用核酸检测试剂盒对所述探针交联膜进行显影实验,判定结果。本发明可以较快地检测到cop‑GFP绿色荧光在细胞内的表达。且本发明可以一次检测多个样品,并且后续可以通过斑点印迹分析cop‑GFP在细胞内的表达量。
-
公开(公告)号:CN100494358C
公开(公告)日:2009-06-03
申请号:CN200610038612.5
申请日:2006-03-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 鸡胚原始生殖细胞的玻璃化冷冻方法,涉及对发育至第19期(孵化约3天)和第28期(孵化约5.5天)鸡胚性腺原始生殖细胞进行玻璃化冷冻保存的方法。将鸡胚原始生殖细胞加入玻璃化冷冻液后,移入冷冻管,于4℃±1℃下平衡5min±0.5min,液氮面上静置1min±0.5min,最后,直接投入液氮。本发明操作简单、快捷,克服了常规慢速冷冻保存方法中需长时间平衡和逐步降温的特点,保存效果稳定、可靠,可以作为传统的禽类遗传资源保存方式的拓展。
-
公开(公告)号:CN221028489U
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202322540840.4
申请日:2023-09-19
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
Abstract: 本实用新型公开了一种新的基于电子控制的鸡胚血管注射装置,涉及生物工程技术领域。包括氮气瓶、气流控制阀、手持注射器和玻璃注射针;氮气瓶的出气口与气流控制阀的进气口连通,气流控制阀的出气口与手持注射器的进气口通过套管连通;手持注射器的出气口与玻璃注射针的进口连通;气流控制阀包括脚踏板,脚踏板用于控制气流控制阀的气流开合。本实用新型装置简单、操作难度低,易于上手,且注射量精准,能极大地提高鸡胚血管注射的效率。
-
-
-
-
-
-
-
-