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公开(公告)号：CN114015660B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202111334156.X
申请日：2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 冯涛 , 马昭 , 刘华南 , 李攀 , 石正旺 , 申超超 , 吴盼雪 , 齐晓兰 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及缺失十个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失了I177L、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株；所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康，且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
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公开(公告)号：CN114058619A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111392731.1
申请日：2021-11-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/55 , C12N5/10 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及RIPLET敲除细胞系的构建及作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中RIPLET基因表达能促进小核糖核酸病毒科病毒，尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向RIPLET的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向RIPLET基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了RIPLET基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小核糖核酸病毒科病毒，尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制，提高小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN112057611B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN202010932707.1
申请日：2020-09-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及非洲猪瘟病毒E120R蛋白作为免疫抑制剂的应用及免疫抑制位点敲除毒株的构建。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒E120R蛋白能够抑制cGAS/STING和poly(dA:dT)诱导的IFN‑β的激活，抑制cGAS/STING和poly(dA:dT)诱导的IFN‑β及其下游因子ISG56和ISG15的mRNA表达，抑制cGAS/STING和poly(dA:dT)诱导的IRF3的磷酸化，具有较强的免疫抑制作用，可作为免疫抑制剂应用；其次本发明发现了非洲猪瘟病毒E120R蛋白的免疫抑制位点，并通过基因工程手段构建获得了E120R蛋白的免疫抑制位点敲除的非洲猪瘟重组病毒，所述非洲猪瘟重组病毒的天然免疫的能力显著增强，可作为重组疫苗株，能够促进早期免疫应答，诱导高水平抗体产生，提高了生物安全性，及免疫保护效力，具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114058619B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202111392731.1
申请日：2021-11-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/55 , C12N5/10 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及RIPLET敲除细胞系的构建及作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中RIPLET基因表达能促进小核糖核酸病毒科病毒，尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向RIPLET的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向RIPLET基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了RIPLET基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小核糖核酸病毒科病毒，尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制，提高小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN112899290B
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110253372.5
申请日：2021-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种天然免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株及应用。本发明发现ASFV MGF‑110‑9L具有抑制干扰素产生的功能，在非洲猪瘟原始病毒株中缺失ASFV MGF‑110‑9L基因，能够降低亲本毒株的毒力，获得了一种减毒非洲猪瘟病毒株；所述的减毒非洲猪瘟病毒株对猪的毒力显著致弱，提升了毒株的安全性。通过在亲本毒株中缺失了基因ASFV MGF‑110‑9L，进而降低了亲本毒株的毒性，为未来成功制备非洲猪瘟疫苗提供了理论依据和实践参考，研究人员可以通过同时敲除ASFV MGF‑110‑9L及已公开的一种或几种毒力基因(例如CD2V、MGF360‑12L、MGF360‑13L、MGF360‑14L、MGF360‑505R等)，最终制备出安全有效的非洲猪瘟疫苗候选株。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113025629A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202110433736.8
申请日：2021-04-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种天然免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株及应用。本发明发现ASFV MGF‑505‑7R能够抑制干扰素的产生；在非洲猪瘟原始毒株中缺失ASFV MGF‑505‑7R基因，获得了一株安全性较好的减毒非洲猪瘟病毒株，为未来成功制备非洲猪瘟疫苗提供了理论依据和实践参考。更进一步，研究人员可以通过同时敲除ASFV MGF‑505‑7R及已公开的一种或几种毒力基因(例如CD2V、MGF360‑12L、MGF360‑13L、MGF360‑14L、MGF360‑505R等)，最终制备出安全有效的非洲猪瘟疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN112899290A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110253372.5
申请日：2021-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种天然免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株及应用。本发明发现ASFV MGF‑110‑9L具有抑制干扰素产生的功能，在非洲猪瘟原始病毒株中缺失ASFV MGF‑110‑9L基因，能够降低亲本毒株的毒力，获得了一种减毒非洲猪瘟病毒株；所述的减毒非洲猪瘟病毒株对猪的毒力显著致弱，提升了毒株的安全性。通过在亲本毒株中缺失了基因ASFV MGF‑110‑9L，进而降低了亲本毒株的毒性，为未来成功制备非洲猪瘟疫苗提供了理论依据和实践参考，研究人员可以通过同时敲除ASFV MGF‑110‑9L及已公开的一种或几种毒力基因(例如CD2V、MGF360‑12L、MGF360‑13L、MGF360‑14L、MGF360‑505R等)，最终制备出安全有效的非洲猪瘟疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN112063633A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202010233449.8
申请日：2020-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种天然免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株及应用。本发明发现ASFV MGF‑110‑9L具有抑制干扰素产生的功能，在非洲猪瘟原始病毒株中缺失ASFV MGF‑110‑9L基因，能够降低亲本毒株的毒力，获得了一种减毒非洲猪瘟病毒株；所述的减毒非洲猪瘟病毒株对猪的毒力显著致弱，提升了毒株的安全性。通过在亲本毒株中缺失了基因ASFV MGF‑110‑9L，进而降低了亲本毒株的毒性，为未来成功制备非洲猪瘟疫苗提供了理论依据和实践参考，研究人员可以通过同时敲除ASFV MGF‑110‑9L及已公开的一种或几种毒力基因(例如CD2V、MGF360‑12L、MGF360‑13L、MGF360‑14L、MGF360‑505R等)，最终制备出安全有效的非洲猪瘟疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN113151354B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN202110300094.4
申请日：2021-03-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于在病毒或细胞基因组上条件性敲除目的基因的条件性敲除片段、质粒及条件性敲除目的基因的方法，所述条件性敲除片段包括目的基因左同源重组臂LA、筛选标记物基因表达元件、lac阻遏子基因表达元件、lac操纵子基因表达元件、目的基因右同源重组臂RA；同时构建了含有所述条件性敲除片段的质粒；并提供了一种运用上述质粒进行目的基因条件性敲除的方法。相对于现有技术，本发明仅通过一个条件敲除片段或含有条件敲除的质粒就实现了目的基因的条件性敲除，具有操作流程简单，敲除效率高，筛选过程便捷等优势。
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公开(公告)号：CN114107228A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111335696.X
申请日：2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 冯涛 , 李攀 , 刘华南 , 石正旺 , 马昭 , 申超超 , 齐晓兰 , 吴盼雪 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种缺失十二个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失G‑ACD‑00190、MGF 110‑9L、G‑ACD‑00210、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株；所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康、免疫后在猪血液内检测不到病毒的存在，且能够对ASFVCN/GS/2018强毒株攻毒提供100％免疫保护，可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
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