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公开(公告)号:CN114921495A
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202210673666.8
申请日:2022-06-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 一种猪瘟病毒病毒样颗粒疫苗的制备方法,将编码完整的猪瘟病毒结构蛋白的基因通过重组载体分别转染哺乳动物细胞,或将编码完整的猪瘟病毒结构蛋白的基因构建到杆状病毒载体上,繁殖出重组载体杆状病毒P3代病毒,并分别感染昆虫细胞,在体外成功表达出重组猪瘟病毒样颗粒疫苗,将其命名为CSFVVLPs,以其作为抗原免疫动物,能够刺激机体产生抗猪瘟病毒的特异性抗体,所获得的重组猪瘟病毒样颗粒疫苗CSFVVLPs作为预防猪瘟的新型抗原。
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公开(公告)号:CN113355275A
公开(公告)日:2021-09-07
申请号:CN202110656125.X
申请日:2021-06-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种羔绵羊睾丸支持细胞、睾丸支持细胞亚克隆及其分离方法和应用,其中,所述支持细胞SCST的保藏编号为CCTCC No.C2019203,将其转染SV40大T抗原基因使其永生化,然后进行压力粗筛、压力分种以及持续传代,得到细胞亚克隆SCST‑T F13,其保藏编号为CCTCC No.C202130,可用于牛结节性皮肤病、羊痘及羊口疮等病毒的分离及规模化繁殖。所述细胞亚克隆可以用含国产血清的培养基培养,降低了生产成本,适合规模化生产应用。本发明的细胞亚克隆与常规原代细胞相比,而且能够明显提高牛结节性皮肤病毒的分离率,且牛结节性皮肤病毒的致病变时间明显缩短、分离病毒的拷贝数比传统细胞提高100倍以上,可以为牛结节性皮肤病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号:CN108912226B
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN201810844879.6
申请日:2018-07-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C07K1/34 , G01N33/535 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于双峰驼抗山羊痘病毒VHH‑4‑2及用途,属于生物技术领域。包含抗山羊痘病毒VHH‑4‑2,VHH‑4‑2的筛选、表达、纯化、功能化标记以及活性验证,山羊痘病毒的浓缩、纯化,试剂盒各项指标的优化等。本发明使用了功能化标记的VHH‑4‑2,避免了一抗、二抗以及抗抗体等步骤,提高了灵敏性、稳定性,缩短了时间,节约了资源。突破了传统Elisa方法费时、费力等缺陷。本发明的提出为建立敏感山羊痘病毒的临床诊断方法,研究病毒的感染机理奠定基础;也为本发明研制出具有完全自主知识产权的山羊痘病毒抗体固相竞争Elisa试剂盒提供了关键标识物;另外,利用山羊痘弱毒苗经细胞扩大培养、浓缩、纯化后作为包被抗原,提高了灵敏度。
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公开(公告)号:CN105693832B
公开(公告)日:2020-05-08
申请号:CN201610226026.7
申请日:2016-04-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/23 , A61K39/10 , A61P31/04 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开一种布鲁氏菌Omp10蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是:其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1或/和SEQ ID N0.2或/和SEQ ID N0.3或/和SEQ ID N0.4或/和SEQ ID N0.5,或者由前述序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽,也可以是前述序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成,经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4,可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清,或制备Omp10蛋白单克隆抗体的抗原。
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公开(公告)号:CN105669846B
公开(公告)日:2019-11-05
申请号:CN201610233920.7
申请日:2016-04-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/23 , A61K39/10 , A61P31/04 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开一种布鲁氏菌Yajc蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是:其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1或/和SEQ ID N0.2或/和SEQ ID N0.4或/和SEQ ID N0.5,或者由前述序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽,也可以是前述序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成,经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4,可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清,或制备Yajc蛋白单克隆抗体的抗原。
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公开(公告)号:CN105968176B
公开(公告)日:2019-08-13
申请号:CN201610225924.0
申请日:2016-04-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/23 , A61K39/10 , A61P31/04 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开一种布鲁氏菌L7/L12蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是:其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1,或SEQ ID N0.1所示的序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽,也可以是氨基酸序列为SEQ ID N0.1所示的序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的SEQ ID N0.1多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成,经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4,可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清,或制备L7/L12蛋白单克隆抗体的抗原。
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公开(公告)号:CN107064502B
公开(公告)日:2019-07-12
申请号:CN201710301560.4
申请日:2017-05-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N21/31 , G01N21/78
Abstract: 本发明公开了一种猪病毒性传染病血清IgG抗体多重ELISA检测试剂盒及其检测方法,属于生物领域,以解决现有血清抗体ELISA试剂盒是只适合单一病原产生的抗体检测,无法同时检测多种病原产生的血清抗体的问题。本发明利用SPA蛋白具有特异性结合猪血清中所有IgG抗体的生物学功能。SPA蛋白可以特异性结合猪血清样品中的所有类型IgG抗体,如果待检测样品中存在抗三种病原编码的4种蛋白的抗体,也能够与SPA蛋白发生特异性结合,实现一种抗原同时捕获3种病原感染或免疫后产生的4血清IgG抗体(抗CSFV的E2蛋白抗体、抗PCV2的Cap蛋白抗体和抗PrV的gB和gE蛋白抗体的)的目的。
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公开(公告)号:CN105693833B
公开(公告)日:2019-05-17
申请号:CN201610233914.1
申请日:2016-04-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/23 , G01N33/68 , G01N33/569 , A61K39/10 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开一种布鲁氏菌Omp25蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是:其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1,或SEQ ID N0.1所示的序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽,也可以是氨基酸序列为SEQ ID N0.1所示的序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的SEQ ID N0.1多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成,经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4,可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清,或制备Omp25蛋白单克隆抗体的抗原。
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公开(公告)号:CN107064501B
公开(公告)日:2019-04-16
申请号:CN201710301443.8
申请日:2017-05-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N21/31 , G01N21/78
Abstract: 本发明公开了一种定量检测猪瘟病毒IgG抗体竞争ELISA试剂盒及其检测方法,属于生物领域,以解决现有CSFV血清抗体检测ELISA试剂盒存在的稳定性差和保质期短等问题。本发明试剂盒是将特异性鉴定和筛选来自猪瘟病毒疫苗株C‑株编码的E2蛋白两个重复的抗原结构域A通过柔性氨基酸接头、半胱氨酸、疏水氨基酸进行融合串联,并在大肠杆菌E.coli中成功获得重组表达蛋白,重组蛋白命名为r2E2,以其作为抗原建立的定量检测抗猪瘟病毒E2蛋白IgG抗体竞争ELISA试剂盒。本试剂盒的检测结果能够反应接种疫苗过程中,机体抗CSFV血清IgG抗体变化规律,为养猪户CSF防控提供科学合理的技术支持。
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公开(公告)号:CN109517060A
公开(公告)日:2019-03-26
申请号:CN201811341948.8
申请日:2015-12-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体,编码所述抗体的核苷酸序列为:SEQ ID NO.3。本发明的效果在于:利用噬菌体展示技术构建PEDV M蛋白双峰驼源免疫文库,筛选获得8株来自双峰驼IgG重链抗体高变区抗M蛋白VHH抗体基因编码序列,对其进行可溶性表达和ELISA实验证明其均可以同M蛋白相结合,吸光度OD405值的不同表明其同M蛋白结合能力各有差异。8株VHH抗体可通过E.coli的表达,而制备体外重组的基因工程抗体。
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