基于等温压缩系数扰动对酶进行再设计的方法、应用及通过此方法筛选出的突变体

    公开(公告)号:CN114220492A

    公开(公告)日:2022-03-22

    申请号:CN202111546549.7

    申请日:2021-12-16

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于等温压缩系数扰动对酶进行再设计的方法、应用及通过此方法筛选出的突变体,属于计算化学,生物信息学,基因工程以及蛋白质工程技术领域。该方法包括以下步骤:通过等温压缩系数扰动筛选出位于蛋白质表面远离活性中心的高波动区域,对筛选出的高波动区域上的氨基酸进行虚拟饱和突变,筛选出突变后吉布斯自由能变小的突变体,得到再设计后的酶;其中,等温压缩系数的扰动模式为加压。本发明的方法克服了现有技术中筛选高波动区域缺乏全局性的问题,以及酶的稳定性和活性不能同时提高的问题,为酶的设计优化提供了一种能够广泛适用的方法,提高了酶在工业上的应用价值。

    一种基于长链脂肪酸脂质体的块状脂肪模拟物及其制备方法

    公开(公告)号:CN113973930A

    公开(公告)日:2022-01-28

    申请号:CN202111327515.9

    申请日:2021-11-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于食品油脂加工领域,公开了一种基于长链脂肪酸脂质体的块状脂肪模拟物及其制备方法,该块状脂肪模拟物,由以下组分制得:磷脂、植物甾醇、表面活性剂、长链脂肪酸、魔芋粉、海藻酸钠、食品级碳酸钙、缓冲液和水。本发明利用脂质体包封脂肪酸,结合魔芋胶与海藻酸钠复配凝胶特性制备块状脂肪替代物,有效地保留了脂肪替代物不饱和脂肪酸的营养价值,实现了与动物块状脂肪更接近的柔嫩度、粘结性、油水混合感和固态质地,提升了感官接受度;同时应用于肉制品的加工中,增加了体系的保水性和热稳定性,减少了肉制品蒸煮损失。

    巴戟天中香豆素类化合物的萃取方法

    公开(公告)号:CN113899839A

    公开(公告)日:2022-01-07

    申请号:CN202111183435.0

    申请日:2021-10-11

    Abstract: 本发明属于化合物提取分析技术领域,具体涉及一种巴戟天中香豆素类化合物的萃取方法,该方法包括以下步骤:调节巴戟天提取液的pH为1‑7;加入三氯甲烷,得到混合液体;将所述混合液体在10‑60℃条件下处理后,进行超声波辅助萃取;将超声处理后的混合液体进行离心,获得沉降物,完成萃取。本发明结合高效液相色谱法,测定巴戟天中的5种香豆素类化合物灵敏度高,检出限在0.5‑0.9ng/mL;所使用的萃取溶剂少,耗费时间短,可以用于大批次的巴戟天样品中香豆素类化合物的测定。

    巴氏醋酸杆菌启动子及其应用

    公开(公告)号:CN111518806B

    公开(公告)日:2021-09-28

    申请号:CN202010362209.8

    申请日:2020-04-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了巴氏醋酸杆菌启动子及其应用,属于基因和代谢工程领域。本发明选取巴氏醋酸杆菌中组成型基因与上一基因间的核苷酸序列作为候选启动子,采用加强型绿色荧光蛋白基因egfp作为报告基因,构建启动子荧光探针质粒。随后通过荧光定量PCR和荧光酶标仪检测重组菌株中报告基因egfp的转录水平和蛋白表达水平确定启动子的强度;最终筛选出组成型强启动子。本发明的启动子具有在巴氏醋酸杆菌中有效表达内源或外源基因的功能,与报道的常用启动子Padh相比具有更高的启动活性,可用于醋酸高产基因工程菌的构建。

    一种适用于雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位的黄酒酵母

    公开(公告)号:CN109517747B

    公开(公告)日:2021-07-27

    申请号:CN201811445149.5

    申请日:2018-11-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种适用于雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位的黄酒酵母,属于遗传工程领域。本发明是以黄酒酵母XZ‑11(MATa,Δura3,Δtrp1)作为出发菌株,通过敲除雷帕霉素结合亚基编码基因FPR1,阻断雷帕霉素与内源基因FPR1编码产物的结合。同时将TOR1基因1972位的丝氨酸残基突变为精氨酸,使菌株生长不受雷帕霉素抑制。由此构建的重组菌JNZ01(MATa,Δura3,Δtrp1,TOR1 S1972R,Δfpr1)在含有1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL雷帕霉素的培养基中生长良好,为运用雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位提供了基础。

    结合高压分子动力学模拟、自由能计算改善水解酶鲁棒性

    公开(公告)号:CN112582031A

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN202011551804.2

    申请日:2020-12-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了结合高压分子动力学模拟、自由能计算改善水解酶鲁棒性,属于计算化学、生物信息学、基因工程以及蛋白质工程领域。本发明方法先通过高压扰动结合分子动力学模型模拟计算,寻找强鲁棒性相关区域和关键氨基酸位点,再对关键区域上的氨基酸进行虚拟饱和突变,构建突变体库,然后通过用多尺度自由能计算软件从蛋白质动力学、蛋白质热力学、预测算法上对上述突变体进行稳定性预测,经多轮虚拟选择尽可能排除假阳性突变体。利用上述方法构建筛选水解酶突变体,阳性突变体频率高达62.5%,有效降低筛选工作量,获得的突变体鲁棒性强,具有很高的工业应用潜力。

    一种抑菌剂及其制备方法
    79.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110123885A

    公开(公告)日:2019-08-16

    申请号:CN201910468232.2

    申请日:2019-05-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种抑菌剂及其制备方法,属于微生物技术领域以及发酵技术领域。大黄中富含大黄酸、大黄素、大黄素甲醚以及芦荟大黄素等蒽醌化合物,这些化合物能够对细菌细胞核酸和蛋白质的合成起到阻碍作用,因此,大黄具有抗菌作用且抗菌谱广、作用强,但是,大黄中的这些蒽醌化合物多为结合态形式,结合型蒽醌会使得大黄具有强烈的泻下作用,对人体危害较大,这使得大黄并不适合作为一种抑菌剂运用于食品、药品和化妆品等与人体接触的产品中,本发明则通过使大黄经红曲霉(monascus)发酵,大大降低了大黄中结合型蒽醌的含量,缓解了其泻下作用,同时,增强了其抑菌活性。

    一种复合菌种降低酱油中氮代谢危害物含量的方法

    公开(公告)号:CN109938243A

    公开(公告)日:2019-06-28

    申请号:CN201910238580.0

    申请日:2019-03-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种复合菌种降低酱油中氮代谢危害物含量的方法,属于微生物技术领域。利用木糖葡萄球菌和嗜盐四联球菌联合发酵,使其分别从降低生物胺和氨基甲酸乙酯的积累两个方面共同控制酱油中氮代谢危害物。在酱油发酵过程中,以1:1的数量比例于成曲与盐水混合时同时接种木糖葡萄球菌和嗜盐四联球菌进行发酵时,可将酱油成品中总生物胺含量降低64.2%,氨基甲酸乙酯含量降低77.2%,同时氨基态氮提升61.1%。

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