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公开(公告)号：CN109517747A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811445149.5
申请日：2018-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位的黄酒酵母，属于遗传工程领域。本发明是以黄酒酵母XZ-11(MATa，Δura3，Δtrp1)作为出发菌株，通过敲除雷帕霉素结合亚基编码基因FPR1，阻断雷帕霉素与内源基因FPR1编码产物的结合。同时将TOR1基因1972位的丝氨酸残基突变为精氨酸，使菌株生长不受雷帕霉素抑制。由此构建的重组菌JNZ01(MATa,Δura3,Δtrp1，TOR1 S1972R，Δfpr1)在含有1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL雷帕霉素的培养基中生长良好，为运用雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位提供了基础。
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公开(公告)号：CN109504699A
公开(公告)日：2019-03-22
申请号：CN201811443792.4
申请日：2018-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降低黄酒酵母尿素积累的方法及应用，属于遗传工程领域。本发明是以重组黄酒酵母JNZ01(MATa,Δura3,Δtrp1,TOR1S1972R,Δfpr1)作为出发菌株，在基因组上融合表达DAL80、FKBP12、在质粒上融合表达RPS1B、FRB，通过添加雷帕霉素，使FKBP12和FRB结合。在此基础上，Dal80在细胞质定位蛋白Rps1B的作用下，转移到细胞质，激活尿素利用相关基因的转录，使发酵过程中尿素的积累降低42.43％，降低到9.39mg/L。
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公开(公告)号：CN119193449A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411457598.7
申请日：2022-07-04
Applicant: 华熙生物科技股份有限公司 , 江南大学 , 江苏华熙益能生物科技有限公司
IPC: C12N1/21 , C12N15/54 , C12N15/70 , C12N15/31 , C12P19/30 , A61K8/67 , A61K8/99 , A61K31/706 , A61K35/74 , A61P17/18 , A61P39/06 , A61Q19/08 , A23L33/135 , A23K10/18 , A23K10/16 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种生产NMN的重组大肠杆菌及其制备方法和应用，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌中表达如SEQ ID NO.1所示的烟酰胺磷酸核糖基转移酶NAMPT，表达如SEQ ID NO.2所示的PRPP合酶BaPRS，表达如SEQ ID NO.3所示的转运蛋白BMpnuC，并敲除pncC基因、ushA基因、nadR基因和purR基因，提高了大肠杆菌细胞中的NMN的积累量。本发明还通过优化发酵条件，使NMN可以在胞外高效积累，在5L发酵体系下可获得20g/L以上的NMN，在药品、化妆品、饲料、纺织品等领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN115747240A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202210935167.1
申请日：2022-08-05
Applicant: 华熙生物科技股份有限公司 , 江南大学 , 江苏华熙益能生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种生产雌马酚的重组大肠杆菌工程菌株及应用，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明对大肠杆菌基因组中的一个或多个进行敲除，并表达了Asaccharobactercelatus来源的大豆苷元还原酶Ac_DZNR，Lactococcus garvieae来源的二氢大豆苷元消旋酶Lg_DDRC，Slackia isoflavoniconvertens的二氢大豆苷元还原酶Si_DHDR和四氢大豆苷元还原酶Si_THDR实现了雌马酚的合成。通过构建NADPH调控质粒、引入soxR/soxS传感器系统和组成型启动子控制相关基因的表达以增强NADPH的产生，提高了菌株生产雌马酚的能力，使发酵66h的雌马酚产量达1.9g/L。
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公开(公告)号：CN109517835B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201811445146.1
申请日：2018-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种将Gzf3定位于细胞质以降低黄酒酵母尿素积累的方法，属于遗传工程领域。本发明是以重组黄酒酵母JNZ01(MATa,Δura3,Δtrp1,TOR1S1972R,Δfpr1)作为出发菌株，在基因组上融合表达GZF3、FKBP12、在质粒上融合表达RPL13A、FRB，通过添加雷帕霉素，使FKBP12和FRB结合。在此基础上，Gzf3在细胞质定位蛋白Rpl13A的作用下，转移到细胞质，激活尿素利用相关基因的转录，使发酵过程中尿素的积累降低21.51％，降低到12.80mg/L。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109517746A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811443815.1
申请日：2018-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种调控转录激活因子以降低黄酒酵母尿素积累的方法，属于遗传工程领域。本发明是以重组黄酒酵母JNZ01(MATa,Δura3,Δtrp1,TOR1S1972R,Δfpr1)作为出发菌株，在基因组上融合表达GLN3、FKBP12或GAT1、FKBP12，并在质粒上融合表达SPT15、FRB，通过添加雷帕霉素，使FKBP12和FRB结合。在此基础上，Gln3和Gat1在细胞核定位蛋白Spt15的作用下，转移到细胞核，激活尿素利用相关基因的转录，使发酵过程中尿素的积累分别降低49.45％和38.98％，分别降低到8.25mg/L和9.95mg/L。
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公开(公告)号：CN116004489B
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202210781815.2
申请日：2022-07-04
Applicant: 华熙生物科技股份有限公司 , 江南大学 , 江苏华熙益能生物科技有限公司
IPC: C12N1/21 , C12N15/54 , C12N15/70 , C12N15/31 , C12P19/30 , A61K8/67 , A61K8/99 , A61K31/706 , A61K35/74 , A61P17/18 , A61P39/06 , A61Q19/08 , A23L33/135 , A23K10/18 , A23K10/16 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种生产NMN的重组大肠杆菌及其应用，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌中表达如SEQ ID NO.1所示的烟酰胺磷酸核糖基转移酶NAMPT，表达如SEQ ID NO.2所示的PRPP合酶BaPRS，表达如SEQ ID NO.3所示的转运蛋白BMpnuC，并敲除pncC基因、ushA基因、nadR基因和purR基因，提高了大肠杆菌细胞中的NMN的积累量。本发明还通过优化发酵条件，使NMN可以在胞外高效积累，在5L发酵体系下可获得20g/L以上的NMN，在食品、药品、化妆品、饲料、纺织品等领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN115725614A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202210935141.7
申请日：2022-08-05
Applicant: 华熙生物科技股份有限公司 , 江南大学 , 江苏华熙益能生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种生产雌马酚的菌株及其应用，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明提供了6‑磷酸果糖激酶的基因pfkA，NAD(P)+转氢酶基因sthA和/或GNAT家族N‑乙酰转移酶基因elaA的新用途，通过对大肠杆菌基因组内源的pfkA，sthA，elaA中的一个或多个基因进行敲除，提高了雌马酚的生产能力，使摇瓶水平的雌马酚产量由90mg/L提高至110.6～224.1mg/L不等。
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公开(公告)号：CN114806999A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210757779.6
申请日：2022-06-30
Applicant: 华熙生物科技股份有限公司 , 江南大学 , 江苏华熙益能生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种基因工程菌及其在制备二氢大豆苷元中的应用，属于生物工程技术领域。本发明通过全细胞催化实验筛选了并鉴定出一组具有大豆苷元还原酶活性的酶，其中氨基酸序列如SEQ ID NO.2~SEQ ID NO.6所示的酶具有大豆苷元还原酶活性，其中有氨基酸序列如SEQ ID NO.2的酶催化活性显著高于来源于Slackia isoflavoniconvertens的大豆苷元还原酶，转化率高达58%。氨基酸序列如SEQIDNO.13~SEQIDNO.16所示的酶的转化率分别为6%、3%、8%、7%。本发明为大豆苷元还原成二氢大豆苷元提供丰富的可选酶，也为大豆苷元的进一步还原提供更多的可用的酶元件，为促进下游高附加值产品的产量提供了可能性，推动高性能大豆苷元还原酶和二氢大豆苷元的产业化。
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公开(公告)号：CN109517747B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201811445149.5
申请日：2018-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位的黄酒酵母，属于遗传工程领域。本发明是以黄酒酵母XZ‑11(MATa，Δura3，Δtrp1)作为出发菌株，通过敲除雷帕霉素结合亚基编码基因FPR1，阻断雷帕霉素与内源基因FPR1编码产物的结合。同时将TOR1基因1972位的丝氨酸残基突变为精氨酸，使菌株生长不受雷帕霉素抑制。由此构建的重组菌JNZ01(MATa,Δura3,Δtrp1，TOR1 S1972R，Δfpr1)在含有1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL雷帕霉素的培养基中生长良好，为运用雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位提供了基础。
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