公开(公告)号：CN111518806A

公开(公告)日：2020-08-11

申请号：CN202010362209.8

申请日：2020-04-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏小乐 ,  高玲 ,  武晓丹 ,  周景文

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12P7/54 ,  C12P7/66 ,  C12R1/02

Abstract: 本发明公开了巴氏醋酸杆菌启动子及其应用，属于基因和代谢工程领域。本发明选取巴氏醋酸杆菌中组成型基因与上一基因间的核苷酸序列作为候选启动子，采用加强型绿色荧光蛋白基因egfp作为报告基因，构建启动子荧光探针质粒。随后通过荧光定量PCR和荧光酶标仪检测重组菌株中报告基因egfp的转录水平和蛋白表达水平确定启动子的强度；最终筛选出组成型强启动子。本发明的启动子具有在巴氏醋酸杆菌中有效表达内源或外源基因的功能，与报道的常用启动子Padh相比具有更高的启动活性，可用于醋酸高产基因工程菌的构建。

公开(公告)号：CN111518806B

公开(公告)日：2021-09-28

申请号：CN202010362209.8

申请日：2020-04-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏小乐 ,  高玲 ,  武晓丹 ,  周景文

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12P7/54 ,  C12P7/66 ,  C12R1/02

Abstract: 本发明公开了巴氏醋酸杆菌启动子及其应用，属于基因和代谢工程领域。本发明选取巴氏醋酸杆菌中组成型基因与上一基因间的核苷酸序列作为候选启动子，采用加强型绿色荧光蛋白基因egfp作为报告基因，构建启动子荧光探针质粒。随后通过荧光定量PCR和荧光酶标仪检测重组菌株中报告基因egfp的转录水平和蛋白表达水平确定启动子的强度；最终筛选出组成型强启动子。本发明的启动子具有在巴氏醋酸杆菌中有效表达内源或外源基因的功能，与报道的常用启动子Padh相比具有更高的启动活性，可用于醋酸高产基因工程菌的构建。