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公开(公告)号：CN114805500B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202210240936.6
申请日：2022-03-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及非洲猪瘟病毒I73R蛋白作为免疫抑制剂的应用及免疫抑制位点突变毒株的构建。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒I73R蛋白能够抑制SeV诱导的IFN‑β的表达，具有较强的免疫抑制作用，可用于制备免疫抑制剂；其次，本发明发现非洲猪瘟病毒I73R蛋白的免疫抑制位点，并构建了I73R蛋白的免疫抑制位点突变的非洲猪瘟重组病毒，所述非洲猪瘟重组病毒的天然免疫的能力显著增强，毒力明显减弱，感染重组毒实验动物存活率较感染野毒实验动物明显升高，提高了生物安全性，及免疫保护效力，可作为重组疫苗株，具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114316037B
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202210011223.2
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s作为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，获得一株高效分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体m19。间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m19对O型不同谱系毒株均具有很好的反应性，而不和A型不同谱系毒株反应。利用单克隆抗体m19和O型结构蛋白兔抗血清建立了O型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒，相较于现有抗体，显著提高了检测结果的灵敏度和特异性，适用于O型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，同时，也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号：CN114835782A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210570210.9
申请日：2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/85 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种猪瘟病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种猪瘟病毒E0截短蛋白，显著促进了E0蛋白的表达，产量可达0.38 mg/ml，而且不影响E0蛋白的免疫原性，可用于猪瘟亚单位疫苗的制备；在上述猪瘟病毒E0截短蛋白的基础上，本发明发现，将E0截短蛋白的第160位、162位、165位和166位氨基酸均突变为甘氨酸G，能够使E0截短蛋白的表达量进一步提升30％以上，且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号：CN112076313B
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202011018201.6
申请日：2020-09-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 茹毅 , 刘华南 , 张贵财 , 杨帆 , 李丹 , 郭建宏 , 何继军 , 张娇燕 , 李亚军 , 马坤 , 伍春平 , 郝荣增 , 卢炳州 , 田宏 , 朱紫祥 , 张克山 , 曹伟军 , 刘永杰 , 靳野 , 马旭升 , 党文
IPC: A61K39/135 , A61K39/295 , A61K39/39 , A61P31/14 , C07K19/00 , C07K1/22 , C12P21/06 , C12N15/62 , C12N15/70
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明首先确定了两种作为口蹄疫疫苗抗原来源的我国口蹄疫O型和A型流行病毒；其次获得了分别或同时含有上述两种病毒结构蛋白VP0、VP3和VP1的口蹄疫亚单位疫苗；所述的口蹄疫亚单位疫苗全保护免疫剂量可低至单组份20μg/头份，且分别或同时对我国多株代表性O型口蹄疫流行毒或A型口蹄疫流行毒具有免疫保护作用。
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公开(公告)号：CN111996203B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202010212917.3
申请日：2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 宁建刚 , 马坤 , 郝荣增 , 张伟 , 郑敏 , 魏婷 , 蒋保余 , 田宏 , 张克山 , 党文 , 马旭升 , 李丹 , 茹毅 , 何继军 , 郭建宏 , 刘湘涛
IPC: C12N15/41 , C12N15/42 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种重组O型口蹄疫病毒表位基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明获得SVV/FJ/001株全长cDNA，并对其5'UTR进行缺失及突变改造，同时在SVA cDNA中融合进串联的O型FMDV的重组表位基因，构建得到重组口蹄疫抗原表位的塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的口蹄疫B细胞表位和T细胞表位，且表达产物具有良好的反应原性，重组病毒的致病性显著降低甚至对猪无致病性，显著提高了毒株的生物安全性；制备的灭活疫苗具有良好的免疫原性，在有效激发SVA中和抗体的同时还能产生针对FMDV的特异性抗体，可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111773383B
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN202010630218.0
申请日：2020-07-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 茹毅 , 刘华南 , 张贵财 , 杨帆 , 李丹 , 郭建宏 , 何继军 , 张娇燕 , 李亚军 , 马坤 , 伍春平 , 郝荣增 , 田宏 , 张克山 , 曹伟军 , 马旭升 , 党文 , 靳野
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种具有交叉保护作用的O型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明首先通过血清交叉中和试验，筛选中意外地发现对我国O型口蹄疫流行毒具有广泛交叉中和作用的毒株；以该毒株三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的氨基酸序列为基础进行优化设计，并借助小泛素样融合蛋白(SUMO)，筛选出单个质粒在大肠杆菌中同时高效、均一、可溶性表达这三种结构蛋白，且三种病毒结构蛋白成功在体外自组装；最终获得的目标蛋白约占菌体总蛋白30％‑35％，纯化后目标蛋白产量最高可达150mg/L。由这三种口蹄疫病毒结构蛋白配制的口蹄疫疫苗，最小全保护免疫剂量可低至20μg/头份，且对我国多株O型口蹄疫流行毒具有广泛交叉保护作用。
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公开(公告)号：CN112076313A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011018201.6
申请日：2020-09-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 茹毅 , 刘华南 , 张贵财 , 杨帆 , 李丹 , 郭建宏 , 何继军 , 张娇燕 , 李亚军 , 马坤 , 伍春平 , 郝荣增 , 卢炳州 , 田宏 , 朱紫祥 , 张克山 , 曹伟军 , 刘永杰 , 靳野 , 马旭升 , 党文
IPC: A61K39/135 , A61K39/295 , A61K39/39 , A61P31/14 , C07K19/00 , C07K1/22 , C12P21/06 , C12N15/62 , C12N15/70
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明首先确定了两种作为口蹄疫疫苗抗原来源的我国口蹄疫O型和A型流行病毒；其次获得了分别或同时含有上述两种病毒结构蛋白VP0、VP3和VP1的口蹄疫亚单位疫苗；所述的口蹄疫亚单位疫苗全保护免疫剂量可低至单组份20μg/头份，且分别或同时对我国多株代表性O型口蹄疫流行毒或A型口蹄疫流行毒具有免疫保护作用。
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公开(公告)号：CN116731127B
公开(公告)日：2025-04-15
申请号：CN202310911311.2
申请日：2023-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , C12N15/85 , C12N5/10 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于遗传密码子扩展技术在口蹄疫病毒VP1蛋白的特定氨基酸残基定点引入提前终止密码子，利用生物正交翻译系统通读琥珀终止密码子UAG，在非天然氨基酸存在或不存在的条件下，不仅可以条件性的控制VP1蛋白的表达，将非天然氨基酸定点引入口蹄疫病毒VP1蛋白，还可利用含特殊基团的非天然氨基酸特异性标记口蹄疫病毒VP1蛋白，通过光照交联在与细胞内相互作用的蛋白质间形成稳定共价键，为口蹄疫病毒与宿主蛋白质相互作用研究提供有力的手段；也可用于制备VP1蛋白特定位点突变的复制缺陷型重组口蹄疫病毒及疫苗。
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公开(公告)号：CN119464505A
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202411589773.8
申请日：2024-11-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/41 , C12N7/01 , A61K31/713 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物基因工程技术领域，具体涉及一种3D蛋白突变的A型塞内卡重组病毒株及其构建与应用。本发明首先发现下调RSAD1能够显著抑制SVA的复制，RSAD1作为靶点可用于筛选抑制SVA的药物；其次，SVA 3D蛋白的第398位氨基酸是宿主含RSAD1介导的氧化修饰的关键位点，将3D蛋白的第398位氨基酸突变为A后，影响了3D蛋白的稳定性，抑制了SVA的复制，降低了病毒滴度；最后，本发明将3D蛋白的第398位氨基酸突变为A构建并成功拯救获得了SVA重组病毒株rSVA‑3DM398A，与野生型SVA相比，rSVA‑3DM398A的毒价显著降低，毒力降低，可作为重组疫苗株，具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN116672443B
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202310647769.1
申请日：2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合，其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒；所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应；其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗，所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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