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公开(公告)号:CN116589538A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310373357.3
申请日:2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号:CN114773438B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202210571389.X
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白,显著促进了E0蛋白的表达,产量可达0.35mg/ml,而且不影响E0蛋白的免疫原性,可用于牛病毒性腹泻亚单位疫苗的制备;在上述牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将E0截短蛋白的160‑162位氨基酸由IAA突变为GGG,能够使E0截短蛋白的表达量进一步提升30%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN114276446B
公开(公告)日:2023-04-18
申请号:CN202210011200.1
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及A型口蹄疫病毒结构蛋白VP2的抗体m12、制备方法及应用。本发明筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体m12。所述单克隆抗体m12与结构蛋白VP2特异性反应,对A型谱系代表毒株具有广谱反应性,而不和O型谱系代表毒株反应。利用鼠单克隆抗体m12和A型结构蛋白兔抗血清建立A型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒,相较于现有抗体,具有更好的灵敏度和特异性,适用于A型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,同时,也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号:CN114853912A
公开(公告)日:2022-08-05
申请号:CN202210571495.8
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种牛病毒性腹泻病毒E2‑E0融合蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种将牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白与牛病毒性腹泻病毒E2蛋白融合,不仅能够促进E0蛋白的表达,而且不影响E0蛋白的免疫原性,可用于牛病毒性腹泻亚单位疫苗的制备;在上述牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的160‑162位氨基酸由IAA突变为GGG,能够使E2‑E0融合蛋白的表达量进一步提升18%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN114276446A
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202210011200.1
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及A型口蹄疫病毒结构蛋白VP2的抗体m12、制备方法及应用。本发明筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体m12。所述单克隆抗体m12与结构蛋白VP2特异性反应,对A型谱系代表毒株具有广谱反应性,而不和O型谱系代表毒株反应。利用鼠单克隆抗体m12和A型结构蛋白兔抗血清建立A型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒,相较于现有抗体,具有更好的灵敏度和特异性,适用于A型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,同时,也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号:CN105567872B
公开(公告)日:2019-10-22
申请号:CN201610034074.6
申请日:2016-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种快速检测小反刍兽疫病毒的RT‑RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针,所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明的试剂盒能够特异性的检测小反刍兽疫病毒,并且在同等条件下对绵羊痘病毒、山羊痘病毒、羊口疮病毒以及口蹄疫病毒等其他重要的羊感染病毒没有扩增,说明该方法具有很好的特异性。灵敏度实验表明本发明所设计的用于检测小反刍兽疫病毒的RT‑RPA引物和探针能够在40℃下,扩增20min的条件下最少可检出150个拷贝的模板,且与RT‑qPCR具有很高的符合度。因此,本发明的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测小反刍兽疫病毒,为小反刍兽疫病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN109735499A
公开(公告)日:2019-05-10
申请号:CN201910037462.3
申请日:2019-01-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系及其建立方法和应用。所述的新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系,命名为新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系hTERT-NBSC,其保藏编号CCTCC NO:C2018201。试验发现,hTERT-NBSC可以连续传代65代以上,且生长增殖特性保持不变。该细胞系对接种ORFV较为敏感,可以高效增殖ORFV病毒,且可以保证病毒的均一、稳定。用该细胞系所增殖的ORFV病毒滴度与新生牛睾丸支持细胞相当,且细胞分种率高于NBSC,分种率可达1:3。同时利用该传代细胞系来制备疫苗,简化了生产工艺、缩短了生产周期,降低了生产成本,同时还保证了制备得到的羊传染性脓疱病疫苗的质量稳定。因此,本发明的提出对羊传染性脓疱病疫苗的规模化生产提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN105567871B
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201610029446.6
申请日:2016-01-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种快速检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT‑RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针,所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明的试剂盒能够特异性的检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP‑PRRSV),与猪瘟病毒、C型‑猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪2型圆环病毒、猪伪狂犬病毒以及口蹄疫病毒等不反应。实验证明,本发明的试剂盒能够在40℃,扩增20min的条件下检出最少70个拷贝的模板,且与RT‑qPCR具有很高的符合度。由此说明,本发明的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测HP‑PRRSV,本发明的提出为HP‑PRRSV的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN105567872A
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201610034074.6
申请日:2016-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速检测小反刍兽疫病毒的RT-RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针,所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明的试剂盒能够特异性的检测小反刍兽疫病毒,并且在同等条件下对绵羊痘病毒、山羊痘病毒、羊口疮病毒以及口蹄疫病毒等其他重要的羊感染病毒没有扩增,说明该方法具有很好的特异性。灵敏度实验表明本发明所设计的用于检测小反刍兽疫病毒的RT-RPA引物和探针能够在40℃下,扩增20min的条件下最少可检出150个拷贝的模板,且与RT-qPCR具有很高的符合度。因此,本发明的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测小反刍兽疫病毒,为小反刍兽疫病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN105567871A
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201610029446.6
申请日:2016-01-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114 , C12Q2521/507 , C12Q2521/107 , C12Q2521/319
Abstract: 本发明公开了一种快速检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针,所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明的试剂盒能够特异性的检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV),与猪瘟病毒、C型-猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪2型圆环病毒、猪伪狂犬病毒以及口蹄疫病毒等不反应。实验证明,本发明的试剂盒能够在40℃,扩增20min的条件下检出最少70个拷贝的模板,且与RT-qPCR具有很高的符合度。由此说明,本发明的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测HP-PRRSV,本发明的提出为HP-PRRSV的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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