一种线粒体未折叠蛋白反应体系的建立方法

    公开(公告)号:CN114958749B

    公开(公告)日:2024-10-18

    申请号:CN202210487593.3

    申请日:2022-05-06

    Abstract: 本发明公开了一种线粒体未折叠蛋白反应体系的建立方法。所述的方法包括以下步骤:1)根据G‑TPP分子式,合成高纯度TRAP1抑制剂G‑TPP;2)将步骤1)中所述的G‑TPP在DMSO中稀释成10mmol/ml的储存液;3)用含10vol%血清的培养基培养人源化细胞,待细胞铺满90%以上,添加步骤2)中的G‑TPP储存液,使其终浓度为10μmol/ml,处理2‑6h。该方法利用TRAP1特异抑制剂G‑TPP处理人源细胞系,其能干扰线粒体蛋白的正确折叠,能快速诱导UPRMT,但不会激活UPRER,这为进一步研究UPRMT的分子机制和UPRMT在人类疾病和病毒感染中的作用提供了技术手段。

    一种线粒体未折叠蛋白反应体系的建立方法

    公开(公告)号:CN114958749A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202210487593.3

    申请日:2022-05-06

    Abstract: 本发明公开了一种线粒体未折叠蛋白反应体系的建立方法。所述的方法包括以下步骤:1)根据G‑TPP分子式,合成高纯度TRAP1抑制剂G‑TPP;2)将步骤1)中所述的G‑TPP在DMSO中稀释成10mmol/ml的储存液;3)用含10vol%血清的培养基培养人源化细胞,待细胞铺满90%以上,添加步骤2)中的G‑TPP储存液,使其终浓度为10μmol/ml,处理2‑6h。该方法利用TRAP1特异抑制剂G‑TPP处理人源细胞系,其能干扰线粒体蛋白的正确折叠,能快速诱导UPRMT,但不会激活UPRER,这为进一步研究UPRMT的分子机制和UPRMT在人类疾病和病毒感染中的作用提供了技术手段。

    羔羊睾丸支持细胞永生化细胞系及其建立方法和应用

    公开(公告)号:CN109837250B

    公开(公告)日:2021-10-12

    申请号:CN201910087613.6

    申请日:2019-01-29

    Abstract: 本发明公开了一种羔羊睾丸支持细胞永生化细胞系及其建立方法和应用。所述的羔羊睾丸支持细胞永生化细胞系,命名为羔羊睾丸支持细胞永生化细胞系hTERT‑LSC,其保藏编号为CCTCC NO:C2018202。试验发现,hTERT–LSC细胞系可以连续传代60代以上,且生长增殖特性保持不变,该细胞系对接种羊痘病毒较为敏感,可以高效增殖羊痘病毒,且可以保证病毒的均一、稳定。用该细胞系所增殖的羊痘病毒滴度与羔羊睾丸支持细胞LSC相当,且细胞分种率高于LSC,分种率可达1:3。同时利用该永生化细胞系来制备疫苗,简化了生产工艺、缩短了生产周期,降低了生产成本,同时还保证了制备得到的羊痘病毒疫苗的质量稳定。因此,本发明的提出对羊痘病毒疫苗的规模化生产提供了新的技术手段。

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