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公开(公告)号:CN102766207B
公开(公告)日:2014-03-12
申请号:CN201210249621.4
申请日:2012-07-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗猪圆环病毒2型的双峰驼单域重链抗体及其制备方法和用途,属于生物技术领域。本发明首次利用PCV2灭活疫苗免疫双峰驼,利用噬菌体展示技术建立PCV 2免疫VHH抗体库,筛选与PCV特别是PCV 2型病毒抗原具有良好亲和力的高特异性单域重链抗体(VHH),本发明所述的抗体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO.1所示的序列同源性在95%以上的氨基酸序列。本发明的PCV 2单域重链抗体对于研究猪圆环病毒,特别是对于研究猪圆环病毒2型的感染机理和建立高度敏感和特异的抗原快速检测或诊断试剂具有重要意义。
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公开(公告)号:CN103602636A
公开(公告)日:2014-02-26
申请号:CN201310499644.5
申请日:2013-10-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)B2L蛋白的单克隆抗体及其应用。本发明采用原核表达系统,用大肠杆菌表达的ORFV B2L蛋白作为免疫原,免疫小鼠,经细胞融合,筛选得到一株稳定分泌抗B2L蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其微生物保藏号是:CCTCC NO:C2013136。单克隆抗体的特异性试验结果表明,该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体只与ORFV株发生反应,而与羊的其它相关病原,例如FMDV、POXV、JSRV、羊衣原体等不发生交叉反应。因此,本发明单克隆抗体可用于检测ORFV,并且本发明的提出为建立一种快速、简易、特异的ORFV诊断方法及其免疫机制研究、免疫功能检测等提供了物质基础。
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公开(公告)号:CN102702349B
公开(公告)日:2013-11-20
申请号:CN201210148523.1
申请日:2012-05-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/11 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12Q1/70 , C12Q1/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗口蹄疫Asia I型病毒的双峰驼VHH重链抗体及其制备方法和用途,属于生物技术领域。本发明首次利用重组的Asia I型病毒样颗粒抗原免疫双峰驼,利用噬菌体展示技术建立Asia I VHH免疫抗体库,筛选与口蹄疫Asia I型病毒抗原具有良好亲和力的高特异性单域抗体,本发明所述的抗体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO.1所示的序列同源性在98%以上的氨基酸序列。本发明的Asia I VHH重链抗体对于研究Asia I病毒感染机理和建立高度敏感和特异的抗原快速检测或诊断试剂具有重要意义。
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公开(公告)号:CN103276111A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310200393.6
申请日:2013-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种用于检测羊痘病毒的检测方法,通过设计一对引物和一条探针对样品的DNA模板进行实时荧光定量PCR检测;本发明还提供了用上述检测方法检测羊痘病毒的试剂盒。本发明用来检测羊痘病毒的试剂盒设计了针对P32的2条特异引物及1条探针,进行羊痘病毒Taqman实时定量PCR检测,针对该基因建立的实时定量方法特异性高,稳定性好;本发明用来检测羊痘病毒的试剂盒,操作简便,用户只需将待检样品的DNA加入反应管中,根据扩增曲线即可得出检测结果,省时省力,成本较低,时间由原来的3-4小时缩短到1-2小时;并且比普通PCR的灵敏度高,可用于检测低微含量的羊痘病毒。
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公开(公告)号:CN102660544A
公开(公告)日:2012-09-12
申请号:CN201210180327.2
申请日:2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/867 , C12N7/04 , C12N5/07
Abstract: 一种用于抑制猪瘟病毒复制的RNAi及其制备方法,所述包含siRNA序列,shRNA慢病毒表达载体构建,复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染PK-15细胞(猪肾细胞)以及抑制猪瘟病毒复制效果的验证方法,该序列具有明显抑制猪瘟病毒在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索,构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术,有望构建靶向猪瘟病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于猪瘟病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据,为动物的抗病育种提供前期准备。
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公开(公告)号:CN113185594B
公开(公告)日:2022-12-20
申请号:CN202110464125.X
申请日:2021-04-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/455 , C12N15/85 , C07K16/20 , G01N33/569 , A61K39/012 , A61P33/02
Abstract: 本发明提供了一种柔嫩艾美耳球虫的免疫抗原、抗体及其制备方法和应用,属于重组蛋白制备技术领域。一种柔嫩艾美耳球虫的免疫抗原,所述免疫抗原为氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的柔嫩艾美耳球虫水通道蛋白2的胞外区。一种抗柔嫩艾美耳球虫的多克隆抗体,由所述免疫抗原免疫动物得到。本发明首次成功通过转染细胞的方式免疫小鼠制备抗柔嫩艾美耳球虫水通道蛋白EtAQP2多克隆抗体,填补了目前市场上柔嫩艾美耳球虫EtAQP2抗体的空白,为柔嫩艾美耳球虫基因的功能鉴定和疫苗的研发奠定基础。
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公开(公告)号:CN113185594A
公开(公告)日:2021-07-30
申请号:CN202110464125.X
申请日:2021-04-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/455 , C12N15/85 , C07K16/20 , G01N33/569 , A61K39/012 , A61P33/02
Abstract: 本发明提供了一种柔嫩艾美尔球虫的免疫抗原、抗体及其制备方法和应用,属于重组蛋白制备技术领域。一种柔嫩艾美尔球虫的免疫抗原,所述免疫抗原为氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的柔嫩艾美耳球虫水通道蛋白2的胞外区。一种抗柔嫩艾美尔球虫的多克隆抗体,由所述免疫抗原免疫动物得到。本发明首次成功通过转染细胞的方式免疫小鼠制备抗柔嫩艾美耳球虫水通道蛋白EtAQP2多克隆抗体,填补了目前市场上柔嫩艾美耳球虫EtAQP2抗体的空白,为柔嫩艾美耳球虫基因的功能鉴定和疫苗的研发奠定基础。
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公开(公告)号:CN109400702B
公开(公告)日:2020-11-10
申请号:CN201811341949.2
申请日:2015-12-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体,编码所述抗体的核苷酸序列为:SEQ ID NO.2,SEQ ID NO.5,SEQ ID NO.7。本发明的效果在于:利用噬菌体展示技术构建PEDV M蛋白双峰驼源免疫文库,筛选获得8株来自双峰驼IgG重链抗体高变区抗M蛋白VHH抗体基因编码序列,对其进行可溶性表达和ELISA实验证明其均可以同M蛋白相结合,吸光度OD405值的不同表明其同M蛋白结合能力各有差异。8株VHH抗体可通过E.coli的表达,而制备体外重组的基因工程抗体。
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公开(公告)号:CN110684824A
公开(公告)日:2020-01-14
申请号:CN201911093383.0
申请日:2019-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6804 , C12Q1/689 , C12Q1/04
Abstract: 本发明涉及一种用于检测布鲁氏菌抗原的免疫磁珠试剂盒,属于生物技术领域。所述试剂盒包括:免疫磁珠、qPCR反应混合液、检测布鲁氏菌的上游引物、下游引物和探针;所述免疫磁珠为鼠抗布鲁氏菌M5抗原单克隆IgG抗体与磁珠的偶联物。本发明所述试剂盒灵敏度高、稳定性好,快速有效,与传统分离方法相比,克服了布鲁氏菌病料检出率低以及直扩抗原检测过程中布鲁氏菌病原易降解,且病原DNA提取过程中使用的待检液体体积有限导致所提取的DNA无法达到qPCR检测的最低要求。
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公开(公告)号:CN107860919B
公开(公告)日:2019-08-13
申请号:CN201711011298.6
申请日:2017-10-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 杨顺利
IPC: G01N33/569
Abstract: 一种检测猪圆环病毒2型IgM抗体的ELISA试剂盒,包括有:抗原包被微孔板,HRP标记的指示抗原,标准阳性和标准阴性对照血清,底物,洗涤液和终止液;其中抗原包被微孔板,是通过构建串联表位蛋白,用大肠杆菌(E.coli)重组表达,筛选到高亲和活性和特异性的串联表位蛋白CapEpiⅡ和CapEpiⅣ,将CapEpiⅡ作为IgM捕获抗原,以37.5ng/mL的浓度,4℃过夜包被96孔微孔板而得到;HRP标记的指示抗原,是利用HRP标记CapEpiⅣ,并通过已知IgM阳性血清滴定其最佳工作浓度,来作为IgM指示抗原。本发明具有较好的敏感性和特异性,无需对待检血清稀释,操作简单,适用于田间大量样品的快速检测;可有效检测PCV2感染后IgM的产生。
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