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公开(公告)号:CN102337264B
公开(公告)日:2012-10-03
申请号:CN201110309096.6
申请日:2011-10-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , A61K48/00 , A61P31/20 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开一个可抑制羊痘病毒的siRNA序列,这个序列为GUGCUCCUAUUAUACUAAU。相关的实验提示本发明的这一序列可以抑制羊痘病毒P32基因的表达,可在制备抗羊痘病毒的疫苗中的应用,也可在制备抗羊痘病毒的药物中的应用,更进一步讲,本发明的序列可在培育具有抗羊痘病毒的羊品种中应用。
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公开(公告)号:CN114924069B
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202210524481.0
申请日:2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , C12Q1/6804 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑2免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQIDNO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑2通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑2免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑2蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠,免疫磁珠富集山羊痘病毒后,无需提取基因组RNA,可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久,不容易在病毒复制高峰期发现,采集病料病毒含量低微,所以检出率低,容易漏检等现象;以及提取基因组DNA时费时、费财、费力,操作时污染环境等一系列难题,而且高效、灵敏、特异、稳定、实用,本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号:CN110819684B
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN201910834074.8
申请日:2019-09-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/04
Abstract: 本发明公开一种简单比较山羊支原体山羊肺炎亚种菌株毒力的方法。发明的方法就将等浓度的经复苏的山羊支原体山羊肺炎亚种接种于鸡胚上,再将接种后的鸡胚置于恒温箱内培养,定时检测鸡胚状态及死亡情况,统计各个菌株的鸡胚致死率,以此进行比较判定。本发明的方法具有操作简单、成本低、无需复杂动物饲养条件、实验动物易得、耗时短、重复性好等优点,大大减少动物试验工作量,避免了现有技术实验动物山羊存在价格较为昂贵、个体差异较大且饲养要求较高、试验操作复杂、试验周期长、工作量大等不足。
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公开(公告)号:CN111323602A
公开(公告)日:2020-06-23
申请号:CN202010178953.2
申请日:2020-03-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种筛选绵羊肺炎支原体和山羊支原体山羊肺炎亚种血清学阴性羊的iELISA方法,包括如下步骤:(1)将山羊支原体山羊肺炎亚种1801菌株接于MTB培养基中扩培后,菌液离心、灭菌、PBS超声重悬,分离得到抗原;(2)用所述抗原包被酶标板,37℃温箱1h后4℃过夜;加入封闭液,37℃封闭2h;加入200倍稀释的血清样品,37℃孵育1h;加入用5%脱脂奶粉稀释5000倍的兔抗羊二抗,37℃孵育1h;(3)用PBST洗板后加入TMB显色液,37℃孵育10min;加入终止液终止反应;酶标仪读取OD450nm值。本发明iELISA方法敏感性可达98%,操作简单,样本处理量大,不仅可用于Mccp和Mo两种病原血清学阴性羊的筛选,还可用于实验中Mccp抗体水平的监测。
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公开(公告)号:CN110256555A
公开(公告)日:2019-09-20
申请号:CN201910483526.2
申请日:2019-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种丝状支原体簇单克隆抗体及其制备方法和应用,所述丝状支原体单克隆抗体通过支原体培养和免疫原制备、动物免疫、细胞融合及阳性杂交瘤细胞筛选和克隆获得,所述支原体为山羊支原体山羊肺炎亚种M1601,细胞融合时髓瘤细胞和脾细胞的数量比为1/5~1/10,得到的丝状支原体簇单克隆抗体杂交瘤细胞株为5E5,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为C201972。所述的丝状支原体簇单克隆抗体可用于区分丝状支原体簇和细菌/病毒类病原体。本发明的杂交瘤细胞株能够分泌稳定的丝状支原体簇单克隆抗体特异性好,能够有效区分丝状支原体簇和其他常见反刍动物支原体。
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公开(公告)号:CN109536625A
公开(公告)日:2019-03-29
申请号:CN201811514557.1
申请日:2018-12-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2527/101
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体的iiPCR检测方法及检测试剂盒。本发明通过以牛支原体的P80基因序列为模板,从P80基因克隆出包含R1序列的M.b序列,以该R1序列为目标设计探针M.b-specific-Probe;其中,所述M.b序列如SEQ ID NO:1所示。相应的,本发明的检测试剂盒,其成分除了商品化的Premix Ex Taq外,主要包括特别设计的牛支原体特异性的引物、探针及配套试剂:M.b-specific-Forward,M.b-specific-Reverse,M.b-specific-Probe,Nuclease-free water,阳性对照模板。本发明除了用于实验室常规检测牛支原体核酸外,特别适用于无实验室条件下(如基层兽医部门、养殖场等)的现场检测,具有高特异性和灵敏性,是一种快速、准确的牛支原体核酸检测试剂盒,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN104789694A
公开(公告)日:2015-07-22
申请号:CN201410464737.9
申请日:2014-09-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2537/143 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开一种可同时用于口蹄疫(A型、O型和Asia 1型)、猪水泡病和水疱性口炎检测的引物、由这些引物构成的试剂盒和制备方法,以及这种试剂盒非疾病诊断目的的使用方法。本发明的用于检测口蹄疫A型、O型和Asia 1型病毒的引物基因序列共10条,试剂盒中除主十条引物外还包括2条通用引物。相关实验表明本发明的敏感性高于普通荧光定量PCR技术,与荧光定量PCR相比可大大的节省时间,可以避免非特异性产物的扩增,同时有效地避免了引物的偏好向现象,提高了检测的灵敏性。
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公开(公告)号:CN104342501A
公开(公告)日:2015-02-11
申请号:CN201410465734.7
申请日:2014-09-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/701
Abstract: 本发明公开一种检测猪水泡病病毒的引物、检测试剂盒和制备方法。本发明用于检测猪水泡病病毒的引物基因序列为SEQIDNo.1(SVDV-F)、SEQIDNo.2(SVDV-R)、SEQIDNo.3(UWD-F)、和SEQIDNo.4(UEV-R)。相关的实验表明,本发明的引物序列可特异性快速扩增水疱性口炎病毒的核酸,通过核酸电泳检测到特异性条带,并具有特异性。本发明可在制备快速鉴别猪水泡病病毒的GeXP诊断中的应用,并在猪水泡病流行病学研究中应用。
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公开(公告)号:CN104212916A
公开(公告)日:2014-12-17
申请号:CN201410465735.1
申请日:2014-09-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q2600/16
Abstract: 本发明公开一种用于检测口蹄疫A型病毒的试剂盒,及试剂盒制备方法和这种试剂盒的非疾病诊断目的的使用方法。本发明的扩增口蹄疫A型病毒的引物的基因序列有四条;本发明的检测口蹄疫A型病毒的试剂盒内包括有前述基因序列的四条引物。相关的实验表明,本发明的可特异性快速扩增口蹄疫A型病毒的核酸,通过核酸电泳检测到特异性条带,同时具有特异性。相关的实验提示本发明的序列可在制备快速鉴别口蹄疫A型病毒的GeXP诊断试剂盒中的应用,并在口蹄疫病毒流行病学研究中应用。
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公开(公告)号:CN103160616B
公开(公告)日:2014-10-15
申请号:CN201310077132.X
申请日:2013-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种用于猪水疱病检测的试剂盒。本发明的猪水疱病检测试剂盒中包括两对引物,分别是上游外引物SEQ№1,下游外引物SEQ№2,上游内引物SEQ№3和下游内引物SEQ№4。本发明与现有技术相比具有检测时不需要任何特殊设备,检测敏感性高于现有技术,检测用时较短,特异性高的优点。
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