一种HBD3气管上皮特异性表达载体及其构建的重组细胞

    公开(公告)号:CN102533857A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210039495.X

    申请日:2012-02-21

    Abstract: 本发明公开了一种包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞,构建了一种包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体Muc1-loxp-EGFP-HBD3,以及基于该载体的包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞系,利用该细胞系作为核供体细胞,为解决奶牛结核病的转基因奶牛提供坚实的基础。本发明通过电转染法将外源性表达载体Muc1-loxp-EGFP-HBD3导入牛胎儿成纤维细胞,荧光显微镜观察标记基因EGFP的表达情况,并经G418筛选获得阳性细胞,经PCR鉴定,证实目的基因HBD3整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组;最后,将转染HBD3基因的牛胎儿成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚。

    一种基于AquaCrop模型与SVR的作物灌溉需水量预测方法

    公开(公告)号:CN114638146A

    公开(公告)日:2022-06-17

    申请号:CN202210306622.1

    申请日:2022-03-25

    Abstract: 本发明提供了一种基于AquaCrop模型与SVR的作物灌溉需水量预测方法,包括以下步骤:S1、获取种植区域气象站数据、种植区域土壤数据、作物参数数据和田间管理数据;S2、通过试错法进行AquaCrop模型的本地化调试;S3、利用AquaCrop模型选择合适的灌溉策略,进行不同灌溉制度模拟;S4、基于AquaCrop模型模拟结果,结合SVR预测下一年生育期的作物日灌溉需水量。本发明利用现有的气象站数据与作物种植管理数据,将作物模型与机器学习方法结合,能够根据不同区域的水资源供需状况及作物生长需水特征选择适宜的灌溉策略,通过支持向量机结合粒子群寻优算法,预测下一年的作物日灌溉需水量,提高了预测精度,可以为当地农业规划用水提供有效的参考依据。

    用于生产外源蛋白的山羊β-乳球蛋白基因座打靶载体构建方法

    公开(公告)号:CN102226199A

    公开(公告)日:2011-10-26

    申请号:CN201110109950.4

    申请日:2011-04-29

    Abstract: 本发明公开了一种用于生产外源蛋白的山羊β-乳球蛋白基因座打靶载体构建方法,以山羊β-乳球蛋白基因5’端调控序列BLG5作为5’端同源臂,以山羊β-乳球蛋白基因3’端包含第6、第7外显子及下游的序列BLG3作为3’端同源臂,以第5外显子和第5内含子的部分序列E5作为连接序列用以将正筛选标记基因置于第5内含子中;将BLG5、目的基因及E5顺次连接,再和BLG3分别连接到通用型打靶载体中正筛选标记两侧。在需要时可以将目标蛋白的基因组DNA或cDNA序列插入到该通用打靶载体的目的基因位置处或直接置换掉原来的目的基因,然后用所获得的打靶载体转染山羊胎儿成纤维细胞或其他细胞,筛选出中靶的细胞,通过体细胞核移植技术获得能在乳腺中生产目标蛋白的转基因山羊。

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