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公开(公告)号：CN103520713A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201310485936.3
申请日：2013-10-16
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种ApoB100酵母重组疫苗及其制备方法和应用，该酵母重组疫苗以酵母作为宿主细胞，转染包含ApoB100基因片段的真核表达载体；所述的ApoB100基因片段的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述的真核表达载体为JMB88-HA-OVA-hApoB100。该酵母重组疫苗通过口服的方式饲喂，能够在酵母中被硫酸铜诱导下表达OVA-hApoB融合蛋白，并在体内被裂解释放，经过抗原呈递引起集体的体液和细胞免疫反应，达到缓解和治疗动脉粥样硬化的目的，可应用于动脉粥样硬化的药物的制备。
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公开(公告)号：CN103146735A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201210580350.0
申请日：2012-12-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明TALE重复单元四聚体库的构建方法、TALEN表达载体的构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。所述四聚体库的构建包括构建TALE单个重复单元、构建TALE单体质粒以及在T4DNA连接酶缓冲液中加入TALE单体质粒，同时加入BsaI内切酶和T4DNA Ligase进行酶切-连接反应得到TALE重复单元四聚体库的过程。TALEN表达载体是基于TALE重复单元四聚体库构建所得。本发明具有通过PCR扩增和酶切-连接过程就可以构建TALE重复序列四聚体质粒库以及基于四聚体质粒库构建得到TALEN表达载体，减少了成本的投入、减化了构建方法的优点。
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公开(公告)号：CN111961686B
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202010888329.1
申请日：2020-08-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9和PiggyBac实现双等位精确基因组编辑的系统。构建CRISPR/Cas9表达载体、PiggyBac系统介导的供体载体以及PiggyBac转座酶表达载体，通过CRISPR/Cas9表达载体打靶基因组，造成DNA双链断裂，使用PiggyBac系统介导的供体载体进行HDR修复，再利用PiggyBac转座酶表达载体进行筛选标记的删除，从而实现高效、精确的双等位无筛选标记的基因组编辑，可应用于畜禽转基因育种。
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公开(公告)号：CN112941107B
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202110365085.3
申请日：2021-04-01
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种原核Argonaute蛋白的基因编辑应用，通过构建源于细菌的Argonaute蛋白的原核表达载体，以及在转化宿主细胞后对该Argonaute蛋白的表达载体和共转化载体的降解的检测以及基因组位点的检测，发现了其具有被特异性转录本激活并靶向特定DNA靶序列的能力，并且在真核细胞中转录的导向RNA的参与下，实现了对基因组靶序列进行inDel频率为3％的基因编辑。实验结果表明原核Argonaute蛋白可以用于细胞内基因编辑工具的开发。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112941107A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110365085.3
申请日：2021-04-01
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种原核Argonaute蛋白的基因编辑应用，通过构建源于细菌的Argonaute蛋白的原核表达载体，以及在转化宿主细胞后对该Argonaute蛋白的表达载体和共转化载体的降解的检测以及基因组位点的检测，发现了其具有被特异性转录本激活并靶向特定DNA靶序列的能力，并且在真核细胞中转录的导向RNA的参与下，实现了对基因组靶序列进行inDel频率为3％的基因编辑。实验结果表明原核Argonaute蛋白可以用于细胞内基因编辑工具的开发。
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公开(公告)号：CN111961686A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010888329.1
申请日：2020-08-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9和PiggyBac实现双等位精确基因组编辑的系统。构建CRISPR/Cas9表达载体、PiggyBac系统介导的供体载体以及PiggyBac转座酶表达载体，通过CRISPR/Cas9表达载体打靶基因组，造成DNA双链断裂，使用PiggyBac系统介导的供体载体进行HDR修复，再利用PiggyBac转座酶表达载体进行筛选标记的删除，从而实现高效、精确的双等位无筛选标记的基因组编辑，可应用于畜禽转基因育种。
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公开(公告)号：CN103520713B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201310485936.3
申请日：2013-10-16
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种ApoB100酵母重组疫苗及其制备方法和应用，该酵母重组疫苗以酵母作为宿主细胞，转染包含ApoB100基因片段的真核表达载体；所述的ApoB100基因片段的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述的真核表达载体为JMB88-HA-OVA-hApoB100。该酵母重组疫苗通过口服的方式饲喂，能够在酵母中被硫酸铜诱导下表达OVA-hApoB融合蛋白，并在体内被裂解释放，经过抗原呈递引起集体的体液和细胞免疫反应，达到缓解和治疗动脉粥样硬化的目的，可应用于动脉粥样硬化的药物的制备。
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公开(公告)号：CN103305548A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310003808.0
申请日：2013-01-06
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种由口服基因工程发酵酵母介导的小鼠肠道DC细胞表达外源基因和内源基因的方法及应用，属于免疫学和基因工程技术领域。所述基因工程发酵酵母含有真核基因表达载体JMB84-CMV-β-catenin-HA-T2A-GFP-polyA或JMB84-CMV-eGFP-polyA，真核基因表达载体可以整合在酵母基因组或者作为酵母质粒随酵母细胞进行复制。应用该基因工程酵母饲喂6周龄FVB小鼠，5天后分离FVB小鼠肠道DC细胞可检测到目的基因的表达；若饲喂JMB84-CMV-eGFP-polyA载体，口服免疫35天后，能够在小鼠血清中检测到特异性抗体的产生。本发明具有应用基因工程酵母作为功能基因运送载体，靶向调控哺乳动物肠道免疫细胞(树突状细胞)的功能，能够应用于治疗自身免疫疾病和新型口服疫苗开发和生产的优点。
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公开(公告)号：CN102174576A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110027367.9
申请日：2011-01-25
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/861 , C12N9/22 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明一种由锌指核酸酶介导的哺乳动物内源基因定向敲除的方法和该锌指核酸酶及其表达载体，属于基因工程技术领域。其中所述的方法包括：(1)内源基因靶位点的选择；(2)构建穿梭载体pAdTrack-CMV-T2A；(3)制备重组ZFN腺病毒载体pAd-T2A-ZFN；(4)腺病毒包装，得到ZFN腺病毒；(5)步骤(4)得到的ZFN腺病毒转染哺乳动物细胞。本发明利用ZFN技术，使动物哺乳细胞基因突变效率达到13％，大大提高了内源基因的定向敲除效率。
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