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公开(公告)号：CN119020423A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411243241.9
申请日：2024-09-05
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/89 , C12N15/85 , C12N15/55 , C12N15/113 , C12N15/62 , A01K67/0278
Abstract: 本发明公开了一种小鼠SMARCA4‑AID敲入模型的制备方法。利用In‑Fusion技术构建含有AID tag序列的Donor载体；基于CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术，通过将Donor载体、Cas9mRNA和gRNA显微注射小鼠受精卵，使AID tag序列敲入小鼠基因组；将受精卵移植代孕鼠，并对出生的小鼠进行鉴定，再通过与野生型小鼠杂交，从而得到了表达SMARCA4‑AID融合蛋白的小鼠，即小鼠SMARCA4‑AID敲入模型。本发明具有操作周期短、效率高的优势，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN118621023B
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202410819599.5
申请日：2024-06-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , G01N33/68 , A61K45/00 , A61P31/06
Abstract: 本发明公开了一种牛DDX58基因的单碱基/氨基酸突变在抗结核病中的应用，属于牛结核病防治技术领域，一种牛DDX58基因的单碱基突变在抗结核病中的应用，所述牛DDX58基因的CDS序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述单碱基突变位于牛基因组ARS‑UCD1.2版本参考序列8号染色体上5′端起第11603839个核苷酸。本发明提供的牛DDX58基因的单碱基突变对I型干扰素的生成量以及巨噬细胞对结核分枝杆菌的清除效果具有显著影响，与牛抗结核病性状高度连锁；提供的牛DDX58基因的单碱基/氨基酸突变可以作为牛结核病抗性连锁位点，用于牛结核病抗性育种中基因型选育，进而简化选育方法、缩短选育时间。
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公开(公告)号：CN119776444A
公开(公告)日：2025-04-08
申请号：CN202510056799.4
申请日：2025-01-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/89 , C12N15/65 , C07K14/475 , C12N15/12 , A01K67/0271 , C12N9/22 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种快速降解MSTN蛋白的小鼠模型的构建方法，包括：在Donor载体上依次接入5’同源臂、3xEAAAK、FKBP1A基因同义突变序列、3xEAAAK、红色荧光蛋白mCherry序列和3’同源臂，得到Donor重组载体；基于Mstn基因的第三外显子设计gRNA，将gRNA、Cas9蛋白和Donor重组载体混合后注射到小鼠受精卵，体外培养，移植，得到F0代小鼠；将F0代小鼠与野生型杂交，或者将杂交后代继续配繁，获得敲入小鼠模型。本发明利用dTAG靶向蛋白降解技术，将所得纯合敲入小鼠进行dTAG给药，可以实现对MSTN蛋白快速、可逆的降解与清除。
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公开(公告)号：CN118931964A
公开(公告)日：2024-11-12
申请号：CN202411043530.4
申请日：2024-07-31
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/29 , A01K67/0278
Abstract: 本发明公开了一种表达植物基因OsTir1的转基因小鼠模型构建方法，利用CRISPR/cas9介导的基因工程技术在C57BL/6J小鼠Rosa26位点敲入CAG promoter‑loxP‑PGK‑Neo‑6*SV40pA‑loxP‑Kozak‑OsTIR1(F74G)‑V5tag‑rBG pA序列，得到含有植物基因OsTir1的转基因小鼠。将所得转基因小鼠与Cre工具鼠配种繁育，得到通过同源重组去除以6*SV40pA为核心的Loxp‑Stop‑Loxp序列的Ostir1杂合且Cre阳性的后代，可以为构建蛋白快速降解系统小鼠模型提供能够高效表达OsTIR1蛋白的小鼠样本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118621023A
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410819599.5
申请日：2024-06-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , G01N33/68 , A61K45/00 , A61P31/06
Abstract: 本发明公开了一种牛DDX58基因的单碱基/氨基酸突变在抗结核病中的应用，属于牛结核病防治技术领域，一种牛DDX58基因的单碱基突变在抗结核病中的应用，所述牛DDX58基因的CDS序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述单碱基突变位于牛基因组ARS‑UCD1.2版本参考序列8号染色体上5′端起第11603839个核苷酸。本发明提供的牛DDX58基因的单碱基突变对I型干扰素的生成量以及巨噬细胞对结核分枝杆菌的清除效果具有显著影响，与牛抗结核病性状高度连锁；提供的牛DDX58基因的单碱基/氨基酸突变可以作为牛结核病抗性连锁位点，用于牛结核病抗性育种中基因型选育，进而简化选育方法、缩短选育时间。
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公开(公告)号：CN101629209A
公开(公告)日：2010-01-20
申请号：CN200910023595.1
申请日：2009-08-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛Six6基因单核苷酸多态性的方法，以包含Six6基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增黄牛Six6基因；用限制性内切酶HhaI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳；根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定黄牛Six6基因第2015位的单核苷酸多态性；由于Six6基因功能涉及日增重、体高、体重、体斜长、坐骨端宽等生长性状，本发明提供的检测方法为Six6基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS)，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN102174576A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110027367.9
申请日：2011-01-25
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/861 , C12N9/22 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明一种由锌指核酸酶介导的哺乳动物内源基因定向敲除的方法和该锌指核酸酶及其表达载体，属于基因工程技术领域。其中所述的方法包括：(1)内源基因靶位点的选择；(2)构建穿梭载体pAdTrack-CMV-T2A；(3)制备重组ZFN腺病毒载体pAd-T2A-ZFN；(4)腺病毒包装，得到ZFN腺病毒；(5)步骤(4)得到的ZFN腺病毒转染哺乳动物细胞。本发明利用ZFN技术，使动物哺乳细胞基因突变效率达到13％，大大提高了内源基因的定向敲除效率。
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公开(公告)号：CN102206631A
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN201110054992.2
申请日：2011-03-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明一种开源方式筛选靶向结合人DYRK1A基因靶位点的锌指蛋白的方法，属于基因工程技术领域。该方法包括：(1)3个锌指蛋白库的构建；(2)报告载体和报告菌株的构建；(3)有效锌指库的筛选；(4)有效锌指库的连接、组装；(5)利用细菌双杂交原理筛选出具有较高特异性和亲和力的三锌指蛋白。本发明所述的方法具有获得的锌指蛋白特异性和亲和性较高，组装的锌指核酸酶有更高的效率的优点。
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公开(公告)号：CN101629209B
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN200910023595.1
申请日：2009-08-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛Six6基因单核苷酸多态性的方法，以包含Six6基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增黄牛Six6基因；用限制性内切酶HhaI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳；根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定黄牛Six6基因第2015位的单核苷酸多态性；由于Six6基因功能涉及日增重、体高、体重、体斜长、坐骨端宽等生长性状，本发明提供的检测方法为Six6基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS)，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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