公开(公告)号：CN119020423A

公开(公告)日：2024-11-26

申请号：CN202411243241.9

申请日：2024-09-05

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 任刚 ,  王生轩 ,  张家强 ,  李文莹 ,  宋霖节 ,  孙乐 ,  朱小贝

IPC: C12N15/89 ,  C12N15/85 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  C12N15/62 ,  A01K67/0278

Abstract: 本发明公开了一种小鼠SMARCA4‑AID敲入模型的制备方法。利用In‑Fusion技术构建含有AID tag序列的Donor载体；基于CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术，通过将Donor载体、Cas9mRNA和gRNA显微注射小鼠受精卵，使AID tag序列敲入小鼠基因组；将受精卵移植代孕鼠，并对出生的小鼠进行鉴定，再通过与野生型小鼠杂交，从而得到了表达SMARCA4‑AID融合蛋白的小鼠，即小鼠SMARCA4‑AID敲入模型。本发明具有操作周期短、效率高的优势，应用前景广阔。

公开(公告)号：CN119776444A

公开(公告)日：2025-04-08

申请号：CN202510056799.4

申请日：2025-01-14

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 任刚 ,  朱小贝 ,  魏玉雯 ,  潘麟茜 ,  刘自晓 ,  王生轩

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/89 ,  C12N15/65 ,  C07K14/475 ,  C12N15/12 ,  A01K67/0271 ,  C12N9/22 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种快速降解MSTN蛋白的小鼠模型的构建方法，包括：在Donor载体上依次接入5’同源臂、3xEAAAK、FKBP1A基因同义突变序列、3xEAAAK、红色荧光蛋白mCherry序列和3’同源臂，得到Donor重组载体；基于Mstn基因的第三外显子设计gRNA，将gRNA、Cas9蛋白和Donor重组载体混合后注射到小鼠受精卵，体外培养，移植，得到F0代小鼠；将F0代小鼠与野生型杂交，或者将杂交后代继续配繁，获得敲入小鼠模型。本发明利用dTAG靶向蛋白降解技术，将所得纯合敲入小鼠进行dTAG给药，可以实现对MSTN蛋白快速、可逆的降解与清除。

公开(公告)号：CN118931964A

公开(公告)日：2024-11-12

申请号：CN202411043530.4

申请日：2024-07-31

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 任刚 ,  王生轩 ,  孙真真 ,  孙圣杰 ,  海佳怡 ,  孙乐 ,  宋霖节

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/29 ,  A01K67/0278

Abstract: 本发明公开了一种表达植物基因OsTir1的转基因小鼠模型构建方法，利用CRISPR/cas9介导的基因工程技术在C57BL/6J小鼠Rosa26位点敲入CAG promoter‑loxP‑PGK‑Neo‑6*SV40pA‑loxP‑Kozak‑OsTIR1(F74G)‑V5tag‑rBG pA序列，得到含有植物基因OsTir1的转基因小鼠。将所得转基因小鼠与Cre工具鼠配种繁育，得到通过同源重组去除以6*SV40pA为核心的Loxp‑Stop‑Loxp序列的Ostir1杂合且Cre阳性的后代，可以为构建蛋白快速降解系统小鼠模型提供能够高效表达OsTIR1蛋白的小鼠样本。