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公开(公告)号：CN107760707A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201710381327.1
申请日：2017-05-25
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了增强基因表达的自激活Gal4/UAS系统表达盒的建立，通过优化UAS数目及GAL4激活/结合域类型，找到一种增强效果较好的表达盒，由自身强启动子CMV启动，借助Gal4/UAS系统使转录和翻译效率提高，从而产生自动激活、级联放大的效果；在转染后第5-10天维持较高的增强效果，第8天表达活性最高，说明表达盒增强基因表达的稳定性；在专门生产重组蛋白的CHO细胞中，增强效果大概是9倍。与现有基因表达盒相比，结构简单、增强效果显著，为基因治疗的非病毒转染途径和重组蛋白生产中增强目的基因表达提供了一种途径和新方法。
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公开(公告)号：CN103695327B
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201310647359.3
申请日：2013-12-02
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用，以酵母菌株作为宿主细胞，宿主细胞中转染有shRNA干扰载体，该shRNA干扰载体上设有启动子-shRNA-miR30的元件排列。该口服重组酵母能够穿过活体生物的胃肠道环境，靶向肠道DC细胞传递shRNA新方法，该方法可以有效的解决现有技术中向DC呈递时存在的弊端，能够广泛应用于基因治疗。
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公开(公告)号：CN103520713A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201310485936.3
申请日：2013-10-16
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种ApoB100酵母重组疫苗及其制备方法和应用，该酵母重组疫苗以酵母作为宿主细胞，转染包含ApoB100基因片段的真核表达载体；所述的ApoB100基因片段的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述的真核表达载体为JMB88-HA-OVA-hApoB100。该酵母重组疫苗通过口服的方式饲喂，能够在酵母中被硫酸铜诱导下表达OVA-hApoB融合蛋白，并在体内被裂解释放，经过抗原呈递引起集体的体液和细胞免疫反应，达到缓解和治疗动脉粥样硬化的目的，可应用于动脉粥样硬化的药物的制备。
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公开(公告)号：CN111944847A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN202010889546.2
申请日：2020-08-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一套等位基因高效替换系统及其建立方法。该系统依赖于一套双筛选表达盒，所述双筛选表达盒针对位于两条姐妹染色单体的等位基因，分别引入了两种不同的荧光蛋白、两种不同的抗性基因，并分别添加胸腺激酶负向筛选基因。利用该表达盒和对应的基因替换系统，我们提供了一种新的基于SSA修复机制的精确编辑思路，可以在实现高效基因组精确编辑的同时，有效避免传统基于Cre/LoxP重组酶系统的LoxP序列残留、转座子系统敲出的筛选基因序列在基因组“跳跃”造成的插入，以及同源重组修复系统二次HDR筛选效率低等问题，为基因组精确编辑提供了一条简洁高效的新思路。
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公开(公告)号：CN103695327A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201310647359.3
申请日：2013-12-02
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用，以酵母菌株作为宿主细胞，宿主细胞中转染有shRNA干扰载体，该shRNA干扰载体上设有启动子-shRNA-miR30的元件排列。该口服重组酵母能够穿过活体生物的胃肠道环境，靶向肠道DC细胞传递shRNA新方法，该方法可以有效的解决现有技术中向DC呈递时存在的弊端，能够广泛应用于基因治疗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103305548A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310003808.0
申请日：2013-01-06
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种由口服基因工程发酵酵母介导的小鼠肠道DC细胞表达外源基因和内源基因的方法及应用，属于免疫学和基因工程技术领域。所述基因工程发酵酵母含有真核基因表达载体JMB84-CMV-β-catenin-HA-T2A-GFP-polyA或JMB84-CMV-eGFP-polyA，真核基因表达载体可以整合在酵母基因组或者作为酵母质粒随酵母细胞进行复制。应用该基因工程酵母饲喂6周龄FVB小鼠，5天后分离FVB小鼠肠道DC细胞可检测到目的基因的表达；若饲喂JMB84-CMV-eGFP-polyA载体，口服免疫35天后，能够在小鼠血清中检测到特异性抗体的产生。本发明具有应用基因工程酵母作为功能基因运送载体，靶向调控哺乳动物肠道免疫细胞(树突状细胞)的功能，能够应用于治疗自身免疫疾病和新型口服疫苗开发和生产的优点。
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公开(公告)号：CN111961686B
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202010888329.1
申请日：2020-08-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9和PiggyBac实现双等位精确基因组编辑的系统。构建CRISPR/Cas9表达载体、PiggyBac系统介导的供体载体以及PiggyBac转座酶表达载体，通过CRISPR/Cas9表达载体打靶基因组，造成DNA双链断裂，使用PiggyBac系统介导的供体载体进行HDR修复，再利用PiggyBac转座酶表达载体进行筛选标记的删除，从而实现高效、精确的双等位无筛选标记的基因组编辑，可应用于畜禽转基因育种。
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公开(公告)号：CN104857507A
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201510266475.X
申请日：2015-05-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K39/00 , A61K48/00 , A61K38/38 , A61K39/39 , A61K47/46 , A61P37/04 , C12N1/19 , C12N15/85 , C12N15/12
Abstract: 本发明一种由口服酵母携带DNA片段活体靶向水产动物肠道免疫细胞，诱导水产动物产生免疫反应的制备方法。该疫苗生产成本低，使用方法简单，适合大规模生产，而且与传统减毒疫苗相比对动物无毒力威胁。可用在鱼类贝类等水产动物的多种细菌性、病毒性和寄生虫等口服DNA疫苗的开发应用上，使水产动物健康生长，减少水产业在疾病方面的损失，同时避免目前DNA疫苗所存在的弊端。
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公开(公告)号：CN111850051A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010642589.0
申请日：2020-07-06
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了双供体介导的基于药物/荧光协同筛选的双等位基因编辑系统，系统包括两个供体载体，供体载体序列包含左右两段目的基因同源序列和点突变位点及位于左右两段目的基因同源序列之间的外源序列，外源序列分为带有胸腺激酶筛选基因、绿色荧光蛋白、嘌呤霉素抗性基因的若干个表达盒和带有胸腺激酶筛选基因、红色荧光蛋白、博来霉素抗性基因的若干个表达盒。本发明构建的基因编辑系统可以用于对基因组进行精确、高效的双等位编辑。
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公开(公告)号：CN104031853A
公开(公告)日：2014-09-10
申请号：CN201310429660.7
申请日：2013-09-22
Applicant: 西北农林科技大学 , 陕西省畜牧技术推广总站
Inventor： 张智英 , 张志强 , 辛颖 , 安宁 , 张涛 , 白义春 , 邵斯旻 , 张建峰 , 任充华 , 李铎 , 张龙 , 闫强 , 林娟 , 徐华荣 , 李欣憶 , 刘中天 , 梁明福
Abstract: 本发明公开了一种可用于大规模生产的MSTN酵母菌种的构建方法，该方法步骤为：KanMX4基因片段的扩增和pBlue-KanMX4载体的构建；酵母基因同源臂的插入；pBlue-kan-NTS2-5’3'-MSTN整合载体的构建；将MSTN载体整合入酵母基因组；抗性基因KanMX4的敲除。本发明构建了不含有筛选基因的Myostatin整合型酵母菌株，该菌种可以在富集型培养基中生产，安全可靠成本低，不会造成目的基因丢失，适合于大规模生产重组酵母，采用本发明大规模生产的酵母菌株直接饲喂动物，可在动物体内产生高水平MSTN特异性抗体，解除其抑制作用，促进肌肉生长，这对动物生产具有重要意义。
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