一套等位基因高效替换系统及其建立方法

    公开(公告)号:CN111944847A

    公开(公告)日:2020-11-17

    申请号:CN202010889546.2

    申请日:2020-08-28

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一套等位基因高效替换系统及其建立方法。该系统依赖于一套双筛选表达盒,所述双筛选表达盒针对位于两条姐妹染色单体的等位基因,分别引入了两种不同的荧光蛋白、两种不同的抗性基因,并分别添加胸腺激酶负向筛选基因。利用该表达盒和对应的基因替换系统,我们提供了一种新的基于SSA修复机制的精确编辑思路,可以在实现高效基因组精确编辑的同时,有效避免传统基于Cre/LoxP重组酶系统的LoxP序列残留、转座子系统敲出的筛选基因序列在基因组“跳跃”造成的插入,以及同源重组修复系统二次HDR筛选效率低等问题,为基因组精确编辑提供了一条简洁高效的新思路。

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