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公开(公告)号：CN118480488A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410566134.3
申请日：2024-05-09
申请人： 上海市农业科学院 , 上海大度农业科技有限公司
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/32 , C12N15/29 , C12N15/62 , C12N15/70 , C07K14/325 , C07K14/415 , C07K14/81 , A01N63/20 , A01P7/04 , C12R1/19
摘要： 本发明提供一种同时表达Bt蛋白和CpTI蛋白的工程菌及其构建方法和应用，属于微生物技术领域。本发明所述工程菌的菌株名称为E.coli Rosett a(DE3)‑PGEX4T‑1‑Cry1AB/AC+CpTI，保藏编号为GDMCC No：64437。本发明通过构建重组表达载体，将Cry1AB/AC基因和CpTI基因整合到大肠杆菌中，构建了具有抗生素选择标记基因的双价杀虫大肠杆菌工程菌。该工程菌可以同时生产Bt杀虫蛋白(Cry1AB/AC)和豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cowp ea Trypsin Inhibitor，CpTI)，对棉铃虫和小菜蛾具有较高的杀虫效果，具有广谱的杀虫效果。
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公开(公告)号：CN109662307A
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201811630278.1
申请日：2018-12-29
申请人： 上海市农业科学院
发明人： 王金斌 , 唐雪明 , 李文 , 蒋玮 , 黄艳娜 , 宋丽莉 , 曾海娟 , 赵琪 , 刘华 , 吴潇 , 吕贝贝 , 李鹏 , 武国干 , 白蓝 , 陈一帆 , 孙宇 , 潘爱虎 , 贾军伟
IPC分类号： A23L29/30 , A23L33/125 , C08B30/04 , C08B37/00 , A23L7/104
摘要： 一种富含慢消化淀粉的复合青稞粉及其制备方法，其以棕色双孢蘑菇和青稞为原料经酶解制成，其各组分及重量百分含量为：慢消化淀粉30-56％；快消化淀粉10-40％；耐消化淀粉10-40％。该复合青稞粉含有丰富的慢消化淀粉，慢消化淀粉中有较高含量的β-葡聚糖，可缓慢消化，利用本发明的复合青稞粉产品制作食品，在肠胃中存留的时间长，促进肠道充分蠕动，可以在较长时间内维持饱腹感，具有持续释放能量、血糖生成指数低、葡萄糖利用率高的特点。
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公开(公告)号：CN109182472A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811189026.X
申请日：2018-10-12
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/6851 , C12N15/11
摘要： 一种鉴定转基因青蒿基因型的ddPCR检测方法，提取待测样品的DNA作为模板，将内参基因引物对和探针、外源基因的引物对和探针加入到扩增反应体系中，进行ddPCR扩增反应；反应过程：95℃预变性10min；94℃变性15-30s，58-62℃退火1min，35-45个循环；98℃固化10min；扩增结束后，得到内参基因和外源基因的拷贝数，判断待测样品为转基因杂合型。本发明中，采用双通道微滴数字PCR技术，以青蒿GEL4基因作为内标基因，建立了Epsps转基因青蒿纯合子的鉴定方法，可以同时对转基因青蒿幼苗整合型进行快速鉴定，准确率为100％。
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公开(公告)号：CN105296639B
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201510785854.X
申请日：2015-11-16
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一个猪6号染色体上用于溯源的SNP分子标记及其应用，所述的SNP分子标记是通过NCBI数据库序列比对获得的，该SNP分子标记由HinfI限制性内切酶识别，共570bp，第403位碱基处有一个碱基替换，为403T或403G，其序列如SEQ ID NO.1所示。通过在包括10个猪品种或品系的试验群体中分析SNP分子标记在试验群体中等位基因的分布情况，发现本发明的SNP分子标记在不同的品种或品系中的等位基因频率接近，多态性丰富，品种或品系间等位基因频率分布差异小，并且杂合度都大于0.3，该SNP标记可用作猪肉产品DNA溯源。
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公开(公告)号：CN105256013B
公开(公告)日：2018-08-31
申请号：CN201510629306.8
申请日：2015-09-29
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
摘要： 一种同步检测猪羊牛动物源性成分的微滴PCR引物体系及检测方法，包括如下步骤：以样品总DNA为模板，利用所述引物对I、引物对II和引物对III组成的微滴PCR引物体系进行微滴PCR扩增实验，反应结束后根据琼脂糖凝胶电泳判定结果。其中，所述样品总DNA模板为猪、羊、牛物种肉产品中的一种以上。本发明公开了一种快速、准确、灵敏的微滴PCR同步检测3种动物源性成分的方法，能有效缩短实验时间，大大提高效率，且节省成本，从而有效鉴定猪羊牛制品的真伪及掺假情况。此外，本发明设计的微滴PCR引物体系配合相关试剂制成试剂盒，方便使用，同时为工业化生产及应用提供了可能。
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公开(公告)号：CN108034757A
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201810061953.7
申请日：2018-01-23
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 一种检测转基因玉米Bt11品系的RPA引物及检测方法，根据转基因玉米Bt11外源基因草丁膦乙酰转移酶基因PAT及玉米基因组连接区域的序列，设计了RPA引物，该RPA引物包括正向引物F和反向引物R，具体序列为：F：5’‑CTGGGAGGCCAAGGTATCTAATCAGCCATCCC‑3’；R：5’‑CTGCTGTAGCTGGCCTAATCTCAACTGGTCTCC‑3’，建立了基于重组酶聚合酶等温扩增技术的快速检测方法，对转基因玉米Bt11品系进行快速鉴定，特异性强，灵敏度高，短时间内即能实现对目的片段的指数扩增，对环境设备要求低，操作简便，在转基因产品成分检测领域具有广阔的推广应用前景。
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公开(公告)号：CN107974449A
公开(公告)日：2018-05-01
申请号：CN201710235246.0
申请日：2017-04-12
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12N15/10
摘要： 一种提取大型真菌基因组DNA的方法，利用物理方法和化学方法破碎大型真菌子实体或菌丝细胞结构，采用酚、氯仿和异戊醇去除蛋白质，再用异丙醇沉淀基因组DNA，加入灭菌蒸馏水或缓冲液溶解基因组DNA，采用核酸吸附柱吸附收集基因组DNA，经异硫氰酸胍和乙醇纯化，获得基因组DNA，获得的基因组DNA具有较好的完整性，经琼脂糖凝胶电泳后染色，DNA条带清晰且单一，无拖尾，无杂带，获得的基因组DNA纯度高，其OD260和OD280比值在1.8～2.0之间，产量高，基因组DNA的浓度为20～50ng/μl，操作简单、成本低，适用于各种大型真菌子实体和菌丝的分子生物学研究。
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公开(公告)号：CN105177150A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510631054.2
申请日：2015-09-29
申请人： 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q2600/16
摘要： 一种快速检测猪羊牛动物源性成分的多重PCR引物体系及检测方法，包括如下步骤：以待检样品总DNA为模板，利用所述引物对I、引物对II和引物对III组成的多重PCR引物体系进行多重PCR扩增实验，反应结束后根据琼脂糖凝胶电泳判定结果；其中，所述样品总DNA模板为猪、羊、牛物种肉产品中的一种或多种。本发明所述多重PCR检测方法能快速、高特异性检测猪羊牛肉制品的真伪及是否有掺假，大大提高检测效率，节约时间，而且节省检测成本，特别适用于猪羊牛制品的快速防伪鉴定。此外，本发明所设计的多重PCR引物体系配合相关试剂制成试剂盒，方便使用，同时为工业化生产及应用提供了可能。
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公开(公告)号：CN101705304B
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN200910250218.1
申请日：2009-12-08
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 适合转基因康乃馨外源基因检测的内标准基因，本发明依据内标准基因的种内非特异性、种间特异性、单拷贝或低拷贝数三个标准，通过生物信息学分析和分子生物学实验验证，在康乃馨中寻找到了符合上述标准ANS基因作为转基因康乃馨定性、定量PCR检测的内标准基因。定性PCR引物为ANS-F1/ANS-R1，定量PCR引物为ANS-F2/ANS-R2，定量PCR探针为ANS-probe。ANS基因作为转基因康乃馨定性、定量PCR检测及拷贝数分析的内标准基因。
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公开(公告)号：CN102719552A
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201210244815.5
申请日：2012-07-16
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 本发明公开了一种转基因香石竹Moonshade的品系特异性定性、定量PCR检测方法，包括以下步骤：1）转基因香石竹Moonshade基因组DNA的提取；2）转基因香石竹Moonshade外源基因插入位点的左边界旁邻序列的分离和确认；3）转基因香石竹Moonshade定性PCR检测；4）转基因香石竹Moonshade定量PCR检测。本发明建立了适用于转基因香石竹Moonshade的品系特异性定性、定量PCR检测方法，并验证了该检测方法的特异性和灵敏度，为转基因香石竹的进口检测、监管及环境安全评价提供重要依据。
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