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公开(公告)号：CN102268078B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110208371.5
申请日：2009-04-01
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C07K14/08 , G01N33/576 , A61K39/29 , A61P31/14 , A61P1/16
Abstract: 本发明公开了一种猪戊型肝炎病毒抗原表位及其应用，所述猪戊型肝炎病毒抗原表位序列如SEQ ID No：5所示。通过计算机软件筛选和实验验证得到的猪戊肝病毒的抗原表位，一方面可以将其应用于快速特异猪戊肝诊断试剂盒，用于猪戊肝的快速诊断，特别是研制疫苗免疫抗体和自然隐性感染抗体的鉴别诊断技术用于猪戊肝流行的监控；另一方面也可以设计特异、安全和高效的猪戊肝疫苗用于猪戊肝的预防、控制猪戊肝的流行和阻断戊肝由猪向人传播。
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公开(公告)号：CN101712953B
公开(公告)日：2012-06-20
申请号：CN200910200684.9
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种用于评价动物肠道微生物群落多样性的DNA提取方法。在细胞裂解以前先对样品进行前处理，将胞外DNA及污染物进行去除，避免了纯化步骤存在污染物去除困难和DNA回收率低的问题。本发明提取过程不使用酚、氯仿，减少了对实验人员的身体健康伤害、所获DNA完整，分子片段大于10kb，产量高。所提取的肠道微生物DNA的OD260/OD230及OD260/OD280接近标准值，可直接应用于分子操作，以评价动物肠道微生物群落多样性。
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公开(公告)号：CN102399850A
公开(公告)日：2012-04-04
申请号：CN201010282911.X
申请日：2010-09-16
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12Q1/44
Abstract: 本发明涉及一种检测农药残留的速测卡及其制备方法和应用。所述速测卡包括：盖膜、第一塑料板、加样孔、酶片、塑料膜、第二塑料板和底物片。其中，所述盖膜粘贴于第一塑料板的表面上；所述第一塑料板的表面上设有至少两个加样孔，加样孔的背面粘贴有固定了家蝇乙酰胆碱酯酶的酶片，所述酶片位置与加样孔相对；所述第二塑料板上设有与所述酶片位置相对应的粘贴有固定了乙酰靛酚的底物片；所述塑料膜置于第一、第二塑料板中间。本发明的速测卡其采用的酶是经过分子进化的家蝇乙酰胆碱酯酶，具有比活性高、灵敏性好、稳定性强等优点，因而可快速简便地应用于农产品、食品、土壤尤其是蔬菜、水果中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中。
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公开(公告)号：CN102286618A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110206191.3
申请日：2011-07-22
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12Q1/68 , C12Q1/04 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种应用于转基因作物根际土壤微生态安全性评价的PCR-DGGE技术，具体包括以下步骤：1)收集不同生育期的转基因作物、非转基因作物的根际土壤样品，进行基因组DNA提取；2)使用细菌、真菌、放线菌的特异性引物对对上述提取的各基因组DNA片段进行PCR扩增，扩增程序采用降落PCR；3)DGGE电泳分离得指纹印记图谱；4)对图谱进行数字化处理及UPGMA聚类分析。本发明可用于评价转基因作物对根际土壤微生物群落结构的影响，并由此评价转基因作物对根际土壤微生态系统的潜在安全风险。
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公开(公告)号：CN101712963B
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN200910200683.4
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种突变的家蝇乙酰胆碱酯酶基因及其表达。所述基因是在现有的家蝇乙酰胆碱酯酶基因的氨基酸序列SEQ ID NO.1的第180、327和374三个位点发生氨基酸定点突变而得。所述基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，该基因能在酵母表达系统中快速高效地获得表达。本发明的突变的乙酰胆碱酯酶基因对低浓度的有机磷及氨基甲酸酯农药具有显著的敏感性，可以用于农产品中农药残留的检测，为研制农药生物学检测产品提供更为灵敏的蛋白酶材料，具有很大的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101812466A
公开(公告)日：2010-08-25
申请号：CN200910201071.7
申请日：2009-12-14
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12N15/31 , C07K14/195 , C12Q1/68 , C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种编码单增李斯特溶血素O蛋白的核苷酸基因序列。通过突变增强单增李斯特溶血素O的抗原性，制得突变用质粒模版—单增李斯特菌溶血素O核苷酸序列；然后再对该质粒模版进行定点突变，即制得本发明的核苷酸基因序列。本发明的核苷酸基因序列不但可以提高单增李斯特菌溶血素O蛋白的抗原性，而且还能显著提高乐食品中单增李斯特菌的检测灵敏度，为开发食源性病原菌检测方法提供了有用的候选基因资源。
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公开(公告)号：CN101768596A
公开(公告)日：2010-07-07
申请号：CN200810208190.0
申请日：2008-12-30
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 一种编码家蝇乙酰胆碱酯酶的核苷酸序列。该序列来源于家蝇，其编码的氨基酸序列包含以下2个突变：Y406D和I453D。所述核苷酸序列与SEQ？IDNO.1相同，其编码的氨基酸序列与SEQ？ID？NO.3相同；对SEQ？ID？NO.1序列进行定点突变，突变后的核苷酸序列与SEQ？ID？NO.2相同，其编码的氨基酸序列与SEQ？ID？NO.4相同。本发明公开了该核苷酸序列的制备方法，通过人工分子进化获得新型基因资源；突变的乙酰胆碱酯酶对低浓度的有机磷及氨基甲酸酯类农药具有更显著的敏感性，用于农药残留的检测，为研制农药生物学检测产品提供了基因资源。
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公开(公告)号：CN101709304A
公开(公告)日：2010-05-19
申请号：CN200910199141.X
申请日：2009-11-20
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了通过基因工程改造得到突变的家蝇乙酰胆碱酯酶基因及其表达载体。本发明所述的突变的家蝇乙酰胆碱酯酶表达的蛋白与现有的SEQ IDNO.1氨基酸序列相比，发生第262、327和374三个位点的氨基酸取代。本发明得到的突变后的乙酰胆碱酯酶对低浓度的有机磷及氨基甲酸酯农药具有显著的敏感性，可以用于农产品中农药残留的检测，为研制农药生物学检测产品提供更为灵敏的蛋白酶材料，具有很大的应用价值。
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公开(公告)号：CN101705304A
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200910250218.1
申请日：2009-12-08
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 适合转基因康乃馨外源基因检测的内标准基因，本发明依据内标准基因的种内非特异性、种间特异性、单拷贝或低拷贝数三个标准，通过生物信息学分析和分子生物学实验验证，在康乃馨中寻找到了符合上述标准ANS基因作为转基因康乃馨定性、定量PCR检测的内标准基因。定性PCR引物为ANS-F1/ANS-R1，定量PCR引物为ANS-F2/ANS-R2，定量PCR探针为ANS-probe。ANS基因作为转基因康乃馨定性、定量PCR检测及拷贝数分析的内标准基因。
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公开(公告)号：CN102382900B
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201010271159.9
申请日：2010-08-31
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：1)首先设计并合成特异性引物和探针；2)目的片段的获得：配制PCR反应体系，按照PCR反应程序进行反应得到目的片段；3)配制连接反应液；4)转化并提取质粒模板；5)定性PCR检测；6)定量PCR检测。本发明的检测方法简单、快速、灵敏度高、特性性强、重复性好，并且检测的定量极限和检测极限极低，灵敏度高，可准确定量检测出猪圆环病毒2型，达到预防和控制猪圆环病毒2型流行的作用。
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