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公开(公告)号：CN102382900B
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201010271159.9
申请日：2010-08-31
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：1)首先设计并合成特异性引物和探针；2)目的片段的获得：配制PCR反应体系，按照PCR反应程序进行反应得到目的片段；3)配制连接反应液；4)转化并提取质粒模板；5)定性PCR检测；6)定量PCR检测。本发明的检测方法简单、快速、灵敏度高、特性性强、重复性好，并且检测的定量极限和检测极限极低，灵敏度高，可准确定量检测出猪圆环病毒2型，达到预防和控制猪圆环病毒2型流行的作用。
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公开(公告)号：CN102268078B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110208371.5
申请日：2009-04-01
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C07K14/08 , G01N33/576 , A61K39/29 , A61P31/14 , A61P1/16
Abstract: 本发明公开了一种猪戊型肝炎病毒抗原表位及其应用，所述猪戊型肝炎病毒抗原表位序列如SEQ ID No：5所示。通过计算机软件筛选和实验验证得到的猪戊肝病毒的抗原表位，一方面可以将其应用于快速特异猪戊肝诊断试剂盒，用于猪戊肝的快速诊断，特别是研制疫苗免疫抗体和自然隐性感染抗体的鉴别诊断技术用于猪戊肝流行的监控；另一方面也可以设计特异、安全和高效的猪戊肝疫苗用于猪戊肝的预防、控制猪戊肝的流行和阻断戊肝由猪向人传播。
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公开(公告)号：CN102268078A
公开(公告)日：2011-12-07
申请号：CN201110208371.5
申请日：2009-04-01
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C07K14/08 , G01N33/576 , A61K39/29 , A61P31/14 , A61P1/16
Abstract: 本发明公开了一种猪戊型肝炎病毒抗原表位及其应用，所述猪戊型肝炎病毒抗原表位序列如SEQ ID No：5所示。通过计算机软件筛选和实验验证得到的猪戊肝病毒的抗原表位，一方面可以将其应用于快速特异猪戊肝诊断试剂盒，用于猪戊肝的快速诊断，特别是研制疫苗免疫抗体和自然隐性感染抗体的鉴别诊断技术用于猪戊肝流行的监控；另一方面也可以设计特异、安全和高效的猪戊肝疫苗用于猪戊肝的预防、控制猪戊肝的流行和阻断戊肝由猪向人传播。
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公开(公告)号：CN101550182B
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN200910048702.6
申请日：2009-04-01
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C07K14/08 , G01N33/576 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 一种猪戊型肝炎病毒抗原表位，如SEQ ID No：1-8所示。通过计算机软件筛选和实验验证得到的猪戊肝病毒的抗原表位，一方面可以将其单独或组合应用于快速特异猪戊肝诊断试剂盒，用于猪戊肝的快速诊断，特别是研制疫苗免疫抗体和自然隐性感染抗体的鉴别诊断技术用于猪戊肝流行的监控；另一方面也可以设计特异、安全和高效的猪戊肝疫苗用于猪戊肝的预防、控制猪戊肝的流行和阻断戊肝由猪向人传播。
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公开(公告)号：CN102094039A
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN201010578641.7
申请日：2010-12-08
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种转基因水稻Bt蛋白cry2a的原核表达及纯化方法，包括以下步骤：1)根据华中农业大学测序好的cry2a的基因，以及所要连接的载体PMD18-T的多克隆位点设计正、反向引物，进行PCR扩增和回收，并对PCR回收物进行DNA连接反应；2)大肠杆菌感受态细胞DH5α的制备和转化；3)表达质粒的重组构建、重组菌的诱导表达；4)表达蛋白Ni-NTA亲和层析纯化。采用本发明方法得到的目的蛋白纯度达到90％以上，同时利用本发明制备的高纯度转基因水稻Bt蛋白cry2a可获得抗体，并可制作成胶体金免疫层析试纸条，以便在转基因植物检测中快速、准确的检测出Bt基因。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101726595A
公开(公告)日：2010-06-09
申请号：CN200910200682.X
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: G01N33/576 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种猪戊型肝炎病毒ELISA诊断试剂盒的制备方法，包括以下步骤：1)抗原表位的计算机筛选；2)抗原的制备；3)血清的采集；4)间接ELISA方法的建立；5)间接ELISA方法的敏感性和特异性验证；6)试剂盒的稳定性验证；7)对屠宰场进行临床检测。该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。应用本发明制得的试剂盒能有效检出感染猪的戊型肝炎病毒，适用于大批量发病样本的检测，可用于猪戊肝的快速诊断，并预防、控制猪戊肝病毒的流行和阻断戊肝病毒由猪向人传播。
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公开(公告)号：CN102276700B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110208356.0
申请日：2009-04-01
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C07K14/08 , G01N33/576 , A61K39/29 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪戊型肝炎病毒抗原表位及它的应用，所述猪戊型肝炎病毒抗原表位序列如SEQ ID No：8所示。通过计算机软件筛选和实验验证得到的猪戊肝病毒的抗原表位，一方面可以将其应用于快速特异猪戊肝诊断试剂盒，用于猪戊肝的快速诊断，特别是研制疫苗免疫抗体和自然隐性感染抗体的鉴别诊断技术用于猪戊肝流行的监控；另一方面也可以设计特异、安全和高效的猪戊肝疫苗用于猪戊肝的预防、控制猪戊肝的流行和阻断戊肝由猪向人传播。
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公开(公告)号：CN102382900A
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201010271159.9
申请日：2010-08-31
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：1)首先设计并合成特异性引物和探针；2)目的片段的获得：配制PCR反应体系，按照PCR反应程序进行反应得到目的片段；3)配制连接反应液；4)转化并提取质粒模板；5)定性PCR检测；6)定量PCR检测。本发明的检测方法简单、快速、灵敏度高、特性性强、重复性好，并且检测的定量极限和检测极限极低，灵敏度高，可准确定量检测出猪圆环病毒2型，达到预防和控制猪圆环病毒2型流行的作用。
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公开(公告)号：CN102276700A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110208356.0
申请日：2009-04-01
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C07K14/08 , G01N33/576 , A61K39/29 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪戊型肝炎病毒抗原表位及它的应用，所述猪戊型肝炎病毒抗原表位序列如SEQ ID No：8所示。通过计算机软件筛选和实验验证得到的猪戊肝病毒的抗原表位，一方面可以将其应用于快速特异猪戊肝诊断试剂盒，用于猪戊肝的快速诊断，特别是研制疫苗免疫抗体和自然隐性感染抗体的鉴别诊断技术用于猪戊肝流行的监控；另一方面也可以设计特异、安全和高效的猪戊肝疫苗用于猪戊肝的预防、控制猪戊肝的流行和阻断戊肝由猪向人传播。
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公开(公告)号：CN102094038A
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN201010578268.5
申请日：2010-12-08
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种转基因水稻Bt蛋白crylc的原核表达及纯化方法，包括以下步骤：1)根据华中农业大学测序好的crylc的基因，以及所要连接的载体PMD18-T的多克隆位点设计正、反向引物，进行PCR扩增和回收，并对PCR回收物进行DNA连接反应；2)大肠杆菌感受态细胞DH5α的制备和转化；3)表达质粒的重组构建、重组菌的诱导表达；4)表达蛋白Ni-NTA亲和层析纯化。采用本发明方法得到的目的蛋白纯度达到90％以上，同时利用本发明制备的高纯度转基因水稻Bt蛋白crylc可获得抗体，并可制作成胶体金免疫层析试纸条，以便在转基因植物检测中快速、准确的检测出Bt基因。
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