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公开(公告)号：CN101717770B
公开(公告)日：2012-01-04
申请号：CN200910200681.5
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开一种提取苏云金芽胞杆菌大质粒DNA的方法，包括以下步骤：1)菌体的培养与收集；2)原生体的制备；3)细胞的裂解和质粒的提取；4)质粒的纯化。应用该方法得到的质粒DNA可直接用来限制性内切酶消化、PCR扩增等多种分子生物学实验。本发明操作简便、安全、质量高，可同时适用于多种革兰氏阳性细菌质粒DNA的提取，因此具有广泛的适用性。
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公开(公告)号：CN101717771A
公开(公告)日：2010-06-02
申请号：CN200910200685.3
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种用于评价植物根系微生物群落多样性的土壤DNA间接提取方法。利用细菌的平均密度远小于土壤矿物质的平均密度，在细胞裂解以前对样品进行前处理，将微生物细胞从它们土壤样品中分离出来，避免了纯化步骤存在腐殖质去除困难和DNA回收率低的问题。本发明提取过程不使用酚、氯仿，减少了对实验人员的身体健康伤害、所获DNA完整，分子片段大于10kb，产量高。所提取的土壤微生物DNA的OD260/OD230及OD260/OD280接近标准值，可直接应用于分子操作，以评价植物根系微生物群落多样件。
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公开(公告)号：CN101709298A
公开(公告)日：2010-05-19
申请号：CN200910201072.1
申请日：2009-12-14
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种用于评价植物根系土壤微生物群落多样性的微生物基因组DNA提取方法，在细胞裂解以前对样品进行前处理，将胞外DNA及腐殖质进行去除，避免了纯化步骤存在腐殖质去除困难和DNA回收率低的问题。本发明提取过程不使用酚、氯仿，减少了对实验人员的身体健康伤害、所获DNA完整，分子片段大于10kb，产量高。所提取的土壤微生物DNA的OD260/OD230及OD260/OD280接近标准值，可直接应用于分子操作，以评价植物根系微生物群落多样性。
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公开(公告)号：CN101717771B
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN200910200685.3
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种用于评价植物根系微生物群落多样性的土壤DNA间接提取方法。利用细菌的平均密度远小于土壤矿物质的平均密度，在细胞裂解以前对样品进行前处理，将微生物细胞从它们土壤样品中分离出来，避免了纯化步骤存在腐殖质去除困难和DNA回收率低的问题。本发明提取过程不使用酚、氯仿，减少了对实验人员的身体健康伤害、所获DNA完整，分子片段大于10kb，产量高。所提取的土壤微生物DNA的OD260/OD230及OD260/OD280接近标准值，可直接应用于分子操作，以评价植物根系微生物群落多样件。
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公开(公告)号：CN101709298B
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN200910201072.1
申请日：2009-12-14
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种用于评价植物根系土壤微生物群落多样性的微生物基因组DNA提取方法，在细胞裂解以前对样品进行前处理，将胞外DNA及腐殖质进行去除，避免了纯化步骤存在腐殖质去除困难和DNA回收率低的问题。本发明提取过程不使用酚、氯仿，减少了对实验人员的身体健康伤害、所获DNA完整，分子片段大于10kb，产量高。所提取的土壤微生物DNA的OD260/OD230及OD260/OD280接近标准值，可直接应用于分子操作，以评价植物根系微生物群落多样性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101712963A
公开(公告)日：2010-05-26
申请号：CN200910200683.4
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种突变的家蝇乙酰胆碱酯酶基因及其表达。所述基因是在现有的家蝇乙酰胆碱酯酶基因的氨基酸序列SEQ ID NO.1的第180、327和374三个位点发生氨基酸定点突变而得。所述基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，该基因能在酵母表达系统中快速高效地获得表达。本发明的突变的乙酰胆碱酯酶基因对低浓度的有机磷及氨基甲酸酯农药具有显著的敏感性，可以用于农产品中农药残留的检测，为研制农药生物学检测产品提供更为灵敏的蛋白酶材料，具有很大的应用价值。
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公开(公告)号：CN101717770A
公开(公告)日：2010-06-02
申请号：CN200910200681.5
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开一种提取苏云金芽胞杆菌大质粒DNA的方法，包括以下步骤：1)菌体的培养与收集；2)原生体的制备；3)细胞的裂解和质粒的提取；4)质粒的纯化。应用该方法得到的质粒DNA可直接用来限制性内切酶消化、PCR扩增等多种分子生物学实验。本发明操作简便、安全、质量高，可同时适用于多种革兰氏阳性细菌质粒DNA的提取，因此具有广泛的适用性。
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公开(公告)号：CN101712953A
公开(公告)日：2010-05-26
申请号：CN200910200684.9
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种用于评价动物肠道微生物群落多样性的DNA提取方法。在细胞裂解以前先对样品进行前处理，将胞外DNA及污染物进行去除，避免了纯化步骤存在污染物去除困难和DNA回收率低的问题。本发明提取过程不使用酚、氯仿，减少了对实验人员的身体健康伤害、所获DNA完整，分子片段大于10kb，产量高。所提取的肠道微生物DNA的OD260/OD230及OD260/OD280接近标准值，可直接应用于分子操作，以评价动物肠道微生物群落多样性。
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公开(公告)号：CN101712953B
公开(公告)日：2012-06-20
申请号：CN200910200684.9
申请日：2009-12-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种用于评价动物肠道微生物群落多样性的DNA提取方法。在细胞裂解以前先对样品进行前处理，将胞外DNA及污染物进行去除，避免了纯化步骤存在污染物去除困难和DNA回收率低的问题。本发明提取过程不使用酚、氯仿，减少了对实验人员的身体健康伤害、所获DNA完整，分子片段大于10kb，产量高。所提取的肠道微生物DNA的OD260/OD230及OD260/OD280接近标准值，可直接应用于分子操作，以评价动物肠道微生物群落多样性。
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公开(公告)号：CN102399850A
公开(公告)日：2012-04-04
申请号：CN201010282911.X
申请日：2010-09-16
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12Q1/44
Abstract: 本发明涉及一种检测农药残留的速测卡及其制备方法和应用。所述速测卡包括：盖膜、第一塑料板、加样孔、酶片、塑料膜、第二塑料板和底物片。其中，所述盖膜粘贴于第一塑料板的表面上；所述第一塑料板的表面上设有至少两个加样孔，加样孔的背面粘贴有固定了家蝇乙酰胆碱酯酶的酶片，所述酶片位置与加样孔相对；所述第二塑料板上设有与所述酶片位置相对应的粘贴有固定了乙酰靛酚的底物片；所述塑料膜置于第一、第二塑料板中间。本发明的速测卡其采用的酶是经过分子进化的家蝇乙酰胆碱酯酶，具有比活性高、灵敏性好、稳定性强等优点，因而可快速简便地应用于农产品、食品、土壤尤其是蔬菜、水果中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中。
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