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公开(公告)号:CN119979606A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202510187991.7
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种L蛋白突变的重组口蹄疫病毒株及在疫苗制备中的应用,属于生物医药技术领域。本发明首先发现在宿主细胞中过表达CISD2蛋白会抑制FMDV的复制,并且解析了抑制机制,具体包括CISD2通过抑制L蛋白的表达,尤其是通过蛋白酶体途径引起L蛋白的降解,进而抑制FMDV复制。本发明还鉴定出了CISD2蛋白降解L蛋白的关键位点,利用反向遗传技术,通过在L蛋白中引入关键位点氨基酸突变,成功构建并拯救得到L蛋白关键氨基酸位点突变的重组口蹄疫病毒,消除了CISD2蛋白降解L蛋白及抑制FMDV复制的能力,提升了病毒滴度,具有良好的生产性能,可用于制备重组口蹄疫病毒株及重组疫苗株。
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公开(公告)号:CN116790519B
公开(公告)日:2025-05-06
申请号:CN202310649962.9
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 郝荣增 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白和Y蛋白组成的九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合,其中将至少一种抗原或其抗原表位的编码基因插入腺病毒骨架载体构建为表达所述抗原或其抗原表位的重组腺病毒;所述九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合能够产生较强的免疫反应;制备的九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株攻毒具有良好的免疫保护力,无生物安全风险;且所述九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗与九组分亚单位疫苗联合具有更好的免疫保护效力。
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公开(公告)号:CN119685271A
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202410369375.9
申请日:2024-03-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种A型塞内卡突变病毒株及应用。本发明将A型塞内卡病毒CH‑FJ‑2017毒株在CRL‑2843细胞中连续传代培养80代后获得了一株塞内卡突变病毒株CRL‑FJ‑P80;相较于CH‑FJ‑2017亲本毒株,本申请所述的塞内卡突变病毒株CRL‑FJ‑P80的病毒核酸和病毒粒子复制水平均明显增高,表明本申请所述的塞内卡突变病毒株CRL‑FJ‑P80具有更强的复制和生产能力;而且所述的塞内卡突变病毒株CRL‑FJ‑P80的抗原性并没有改变,且免疫能力增强;可作为灭活疫苗候选毒株,用于塞内卡病毒灭活疫苗的制备,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116694583B
公开(公告)日:2024-10-22
申请号:CN202310649839.7
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 郝荣增 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原蛋白P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合,其中将至少一种抗原或其抗原表位的编码基因插入腺病毒骨架载体构建为表达所述抗原或其抗原表位的重组腺病毒;所述七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合能够产生较强的免疫反应;制备的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险;且所述的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗与七组分亚单位疫苗联合,具有更好的免疫保护效力。
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公开(公告)号:CN116514999B
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202310616956.3
申请日:2023-05-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 杨洋 , 李亚军 , 卢炳州 , 刘华南 , 张贵财 , 李丹 , 冯涛 , 田宏 , 曹伟军 , 杨帆 , 张克山 , 朱紫祥 , 党文 , 秦晓东 , 马旭升
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种嵌合表达口蹄疫病毒多抗原表位融合蛋白、自组装纳米颗粒及其制备方法。本发明发现,将口蹄疫病毒抗原B细胞表位插入到氨基酸序列改造后的Encapsulin蛋白片段的第138‑139位之间,将口蹄疫病毒抗原T细胞表位插入到氨基酸序列改造后的Encapsulin蛋白片段的C末端,能够实现目标蛋白在大肠杆菌中高效、可溶性表达,并且能够成功自组装成蛋白笼纳米颗粒;所述蛋白笼纳米颗粒经抗原乳化后免疫豚鼠和小鼠,可刺激机体产生更高水平的病毒中和性抗体和IFN‑γ、IL‑2、IL‑6、IL‑10、TNF‑α等细胞因子,具有较好的免疫保护作用,可用于口蹄疫疫苗的制备。
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公开(公告)号:CN117467617A
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202311360016.9
申请日:2023-10-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/87 , A61K35/22 , A61K31/7105 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种敲除vimentin基因的MA‑104细胞系MA‑104‑KO‑vimentin及其构建方法和应用。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的保藏编号为CCTCC:C2023142或CCTCC:C2023229。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的构建方法,包括:(1)gRNA设计。(2)将gRNA通过瞬时转染到细胞中,通过CAT Tool分析切割效率,选择切割效率最高的gRNA用于生产KO细胞系。(3)单克隆细胞培养。(4)单克隆细胞筛选。本发明利用CRISPR‑Cas9系统构建了稳敲除vimentin基因的MA‑104细胞系。
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公开(公告)号:CN117224669A
公开(公告)日:2023-12-15
申请号:CN202310952563.X
申请日:2023-07-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 马旭升 , 李茜 , 辇晓峰 , 尚小粉 , 罗志宽 , 代军飞 , 裴晶晶 , 朱紫祥 , 杨帆 , 曹伟军 , 茹毅 , 冯涛 , 张克山 , 田宏 , 唐静 , 李志煜 , 刘家楠
Abstract: 本发明属于病毒免疫学领域,具体涉及非洲猪瘟病毒MGF360‑21R基蛋白作为免疫诱导剂或者佐剂的应用,同时涉及该蛋白的功能鉴定。具体如:ASFV MGF360‑21R蛋白能够作为免疫应答诱导剂或者佐剂进行应用;ASFV MGF360‑21R可作为炎症应答的激动剂进行应用。本发明构建ASFV MGF360‑21R蛋白的重组慢病毒并感染小鼠后,发现小鼠血清和动物组织的炎性细胞因子产生且分泌上调。本发明为ASFV的防控以及MGF360‑21R蛋白可以作为佐剂激活炎症反应提供了新的支持。
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公开(公告)号:CN117210502A
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202311178981.4
申请日:2023-09-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及口蹄疫病毒VP1蛋白免疫抑制位点突变的重组口蹄疫病毒株的构建。本发明发现口蹄疫病毒VP1蛋白的第209位氨基酸是抑制NOG1蛋白表达的关键位点,将VP1蛋白的第209位氨基酸突变为A后,抑制NOG1蛋白的表达,促进IFN‑β蛋白的表达;其次,本发明将VP1蛋白的第209位氨基酸突变为A后成功拯救获得了口蹄疫病毒VP1蛋白的免疫抑制位点突变的口蹄疫重组病毒株rFMDV‑VP1Q209A,与野生型FMDV相比,rFMDV‑VP1Q209A的毒价显著降低,毒力降低,且抑制NOG1蛋白表达的同时诱导IFN‑β表达的能力显著增加,可作为重组疫苗株,具备良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN117210501A
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202311178868.6
申请日:2023-09-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及口蹄疫病毒2B蛋白免疫抑制位点突变的重组口蹄疫病毒株的构建。本发明首先发现了口蹄疫病毒2B蛋白的第105位氨基酸是抑制STING蛋白表达的关键位点,将2B蛋白的第105位氨基酸突变为A后,促进了STING蛋白的表达;其次,本发明将2B蛋白的第105位氨基酸突变为A构建并成功拯救获得了口蹄疫病毒2B蛋白的免疫抑制位点突变的口蹄疫重组病毒株rFMDV‑2B K105A,与野生型FMDV相比,rFMDV‑2B K105A的毒价显著降低,毒力降低,且抑制STING表达的能力降低同时诱导IFN‑β表达的能力显著增加,可作为重组疫苗株,具备良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN114315962B
公开(公告)日:2023-11-28
申请号:CN202111306032.0
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著促进ASFV致敏免疫细胞增殖,并且能够通过促进猪CD8+T细胞分泌IFN‑γ促进猪机体产生ASFV抗原特异性免疫应答。免疫动物后,能显著促进猪机体免疫应答。本发明所述多肽或者由多肽聚合得到的多肽聚合物能够用于制备非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗。
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