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公开(公告)号：CN103667298A
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201410001353.3
申请日：2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/867
Abstract: 一种用于抑制猪瘟病毒复制的Npro207shRNA，所述包含siRNA序列，shRNA慢病毒表达载体构建，复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染PK-15细胞（猪肾细胞）以及抑制猪瘟病毒复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制猪瘟病毒在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪瘟病毒的siRNA的转基因动物。为shRNA应用于猪瘟病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。
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公开(公告)号：CN102766207B
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201210249621.4
申请日：2012-07-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗猪圆环病毒2型的双峰驼单域重链抗体及其制备方法和用途，属于生物技术领域。本发明首次利用PCV2灭活疫苗免疫双峰驼，利用噬菌体展示技术建立PCV 2免疫VHH抗体库，筛选与PCV特别是PCV 2型病毒抗原具有良好亲和力的高特异性单域重链抗体（VHH），本发明所述的抗体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO.1所示的序列同源性在95%以上的氨基酸序列。本发明的PCV 2单域重链抗体对于研究猪圆环病毒，特别是对于研究猪圆环病毒2型的感染机理和建立高度敏感和特异的抗原快速检测或诊断试剂具有重要意义。
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公开(公告)号：CN103602636A
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201310499644.5
申请日：2013-10-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗羊口疮病毒（Orf virus，ORFV）B2L蛋白的单克隆抗体及其应用。本发明采用原核表达系统，用大肠杆菌表达的ORFV B2L蛋白作为免疫原，免疫小鼠，经细胞融合，筛选得到一株稳定分泌抗B2L蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其微生物保藏号是：CCTCC NO:C2013136。单克隆抗体的特异性试验结果表明，该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体只与ORFV株发生反应，而与羊的其它相关病原，例如FMDV、POXV、JSRV、羊衣原体等不发生交叉反应。因此，本发明单克隆抗体可用于检测ORFV，并且本发明的提出为建立一种快速、简易、特异的ORFV诊断方法及其免疫机制研究、免疫功能检测等提供了物质基础。
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公开(公告)号：CN102702349B
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201210148523.1
申请日：2012-05-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/11 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12Q1/70 , C12Q1/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗口蹄疫Asia I型病毒的双峰驼VHH重链抗体及其制备方法和用途，属于生物技术领域。本发明首次利用重组的Asia I型病毒样颗粒抗原免疫双峰驼，利用噬菌体展示技术建立Asia I VHH免疫抗体库，筛选与口蹄疫Asia I型病毒抗原具有良好亲和力的高特异性单域抗体，本发明所述的抗体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO.1所示的序列同源性在98%以上的氨基酸序列。本发明的Asia I VHH重链抗体对于研究Asia I病毒感染机理和建立高度敏感和特异的抗原快速检测或诊断试剂具有重要意义。
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公开(公告)号：CN103276111A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310200393.6
申请日：2013-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种用于检测羊痘病毒的检测方法，通过设计一对引物和一条探针对样品的DNA模板进行实时荧光定量PCR检测；本发明还提供了用上述检测方法检测羊痘病毒的试剂盒。本发明用来检测羊痘病毒的试剂盒设计了针对P32的2条特异引物及1条探针，进行羊痘病毒Taqman实时定量PCR检测，针对该基因建立的实时定量方法特异性高，稳定性好；本发明用来检测羊痘病毒的试剂盒，操作简便，用户只需将待检样品的DNA加入反应管中，根据扩增曲线即可得出检测结果，省时省力，成本较低，时间由原来的3-4小时缩短到1-2小时；并且比普通PCR的灵敏度高，可用于检测低微含量的羊痘病毒。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102660544A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210180327.2
申请日：2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/867 , C12N7/04 , C12N5/07
Abstract: 一种用于抑制猪瘟病毒复制的RNAi及其制备方法，所述包含siRNA序列，shRNA慢病毒表达载体构建，复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染PK-15细胞（猪肾细胞）以及抑制猪瘟病毒复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制猪瘟病毒在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪瘟病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于猪瘟病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。
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公开(公告)号：CN106345220B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN201510410459.3
申请日：2015-07-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种吸附装置在吸附挥发的溴化乙锭中的应用，其目的在于提供一种能够吸附核酸凝胶电泳过程中的溴化乙锭的装置，减少或杜绝EB污染实验室空气的同时，且能提高琼脂糖凝胶的利用率，保证试验的均一性，有利于推动生物学和医学，药物设计等领域的发展，为实验人员安全操作提供保障；本发明所述吸附装置包括冷凝盒和吸附盒，所述冷凝盒上下开口，所述吸附盒底部开口，顶部设有顶盖，所述吸附盒底部与所述冷凝盒顶部接通，所述冷凝盒包括冷凝层，所述冷凝层一侧设有进水孔，另一侧设有出水孔，所述冷凝层上设有贯穿上下面的通气孔；所述吸附盒包括吸附层，所述吸附层内放置有透气膜包裹的活性炭，所述吸附层设有与所述冷凝层通气孔相通的透孔。
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公开(公告)号：CN113174407A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110506452.7
申请日：2021-05-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHO‑K1细胞系的筛选方法，主要是利用PCR方法扩增猪瘟病毒(石门株)的完整结构蛋白(ShmEs)基因，并将其插入真核表达载体pcDNA3.4中，构建重组表达质粒pcDNA3.4‑ShmEs。利用瞬时转染的方法将该重组质粒转入CHO‑K1细胞，并使用抗生素G418进行筛选。试验结果表明，ShmEs基因在CHO‑K1细胞中得到了表达且能够稳定传代表达，并且利用该稳定细胞系生产的抗原免疫兔体能够刺激兔体产生猪瘟特异性抗体，并且能够至少维持42天。ShmEs基因的成功表达及其稳定细胞系的建立为猪瘟新型基因重组疫苗的开发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109438574B
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN201811341946.9
申请日：2015-12-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体，编码所述抗体的核苷酸序列为：SEQ ID NO.4。本发明的效果在于：利用噬菌体展示技术构建PEDV M蛋白双峰驼源免疫文库，筛选获得8株来自双峰驼IgG重链抗体高变区抗M蛋白VHH抗体基因编码序列，对其进行可溶性表达和ELISA实验证明其均可以同M蛋白相结合，吸光度OD405值的不同表明其同M蛋白结合能力各有差异。8株VHH抗体可通过E.coli的表达，而制备体外重组的基因工程抗体。
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