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公开(公告)号：CN105400711A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201511018190.0
申请日：2015-12-30
申请人： 江南大学
CPC分类号： C12N9/93 , C07K14/38 , C12N9/0006 , C12P7/46 , C12Y101/01037 , C12Y604/01001
摘要： 本发明的公开了一株产L-苹果酸的酿酒酵母工程菌的构建及应用，属于发酵工程领域。本发明在高产丙酮酸的菌株S.cerevisiae tTAMΔura3Δtrp1中过量游离表达源于Aspergillus flavus ATCC13697的丙酮酸羧化酶(Afpyc)、苹果酸脱氢酶(Afmdh)和苹果酸转运蛋白(Afmae)基因，构建了苹果酸积累路径，获得菌株W1101。上述菌株用于发酵生产L-苹果酸，发酵84h，其苹果酸产量为27.3g/L，而原始出发菌株不积累苹果酸，这将高产L-苹果酸菌株黄曲霉的代谢路径成功应用于酿酒酵母，为高产L-苹果酸菌株的构建提供了一种新策略。
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公开(公告)号：CN116103213A
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202310047372.9
申请日：2023-01-31
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种代谢工程改造大肠杆菌生产富马酸的方法，属于发酵领域。本发明在大肠杆菌E.coliFMME‑N‑5中敲除富马酸酶基因、富马酸还原酶基因、天冬氨酸酶基因和乳酸脱氢酶基因，并过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因和琥珀酸脱氢酶编码基因。所得菌株E.coliFMME‑N‑5(△fumB△frdBC△aspA△ldhA)‑ppc‑sdhCDAB用于发酵生产富马酸，在7.5L发酵罐上发酵65h，富马酸产量达到45g/L，生产强度为0.69g/L/h，富马酸对葡萄糖得率为0.52g/g，副产物甲酸不积累，琥珀酸、乳酸、乙酸积累量均低于1g/L，具有一定的工业生产潜力。
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公开(公告)号：CN115838696A
公开(公告)日：2023-03-24
申请号：CN202211084151.0
申请日：2022-09-06
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种普雷沃氏菌内消旋—二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用，本发明的改造方法通过组合突变设计出最佳突变体，对PtDAPDH的蛋白质进行改造，克服了之前野生型酶催化活性低的局限，最终得到最佳突变体T5(PtDAPDHN13E/S90R/P254A)，其催化半衰期和D‑对羟基苯甘氨酸产量分别为野生型的1.10倍和2.67倍，以L‑对羟基苯甘氨酸为底物，转化后0.1L摇瓶产量为3.2g/L，转化率为32％，高催化效率和生产强度，大大降低了之前的高菌体量以及昂贵的底物成本，为D‑对羟基苯甘氨酸的工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113061555B
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202110425297.6
申请日：2021-04-20
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一株产纤维素酶的芽孢杆菌菌株筛选及其应用，属于生物工程技术领域。本发明从动物粪便中筛选到了一株枯草芽孢杆菌，其在摇瓶水平上发酵生产纤维素酶活力达118.67U/mL，并且具备良好的传代稳定性。利用所述枯草芽孢杆菌生产纤维素酶的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN110656121B
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN201911038423.1
申请日：2019-10-29
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种调控大肠杆菌细胞大小的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过缺失碳储存调节因子的编码基因csrA和过表达组氨酸类似物与绿色荧光蛋白的融合蛋白基因hns‑gfp来调节大肠杆菌的细胞大小。结果表明，大肠杆菌在缺失碳储存调节因子基因和过表达组氨酸类似物与绿色荧光蛋白融合蛋白的基础上，通过控制诱导剂浓度可以实现大肠杆菌细胞大小的调控，与出发菌株相比，在不同的无水四环素(aTc)诱导下，大肠杆菌细胞大小可增加1379％。这为调控大肠杆菌细胞大小提供了一种新策略。
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公开(公告)号：CN110438056B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201910738599.1
申请日：2019-08-12
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一株产正丁酸的大肠杆菌工程菌的构建及应用，属于发酵工程技术领域。本发明以Escherichia coli ATCC 8739为出发菌株，利用代谢工程手段，通过构建丁酸的合成路径以及切断冗余代谢支路构建了生产丁酸的大肠杆菌基因工程菌。在发酵72h后丁酸的产量达到15g/L。该发酵过程为好氧发酵，菌体生长快，发酵周期短，产酸速率高，目前未见直接利用甘油发酵生产丁酸的报道。该方法采用的发酵工艺简单，易于控制，生产成本低，有利于工业化生产的推广和应用。
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公开(公告)号：CN116656581A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202210148790.2
申请日：2022-02-17
摘要： 本发明公开了一种重组大肠杆菌及其构建方法和应用，所述重组大肠杆菌可用于L‑苯丙氨酸的生产。本发明利用多轮诱变筛选对L‑苯丙氨酸结构类似物具有高抗性，且具有酪氨酸营养缺陷型突变菌株，并以温敏型重组质粒形式调控L‑苯丙氨酸合成途径中编码3‑脱氧‑7‑磷酸庚酸合酶和分支酸变位酶基因表达。本发明构建的重组大肠杆菌，在5 L发酵罐中，根据菌体生长阶段采取不同控温和补料方式，发酵时间为56 h条件下，L‑苯丙氨酸产量在62 g/L，糖酸转化率为25.2%，具有工业化应用前景和价值。
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公开(公告)号：CN115044627A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210720068.1
申请日：2022-06-23
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种高效生产L‑高苯丙氨酸的方法及一种产L‑高苯丙氨酸的菌株，本发明设计了一条以廉价的苯甲醛和丙酮酸为原料，利用级联酶法合成L‑高苯丙氨酸的新路线，通过将路径酶构建到同一株大肠杆菌中，利用获得的重组大肠杆菌进行催化，在5L反应器中进行反应，产量在100.9g/L，转化率在94％，ee>99％。与目前主要的生产L‑HPA的方法相比，极大的降低了L‑高苯丙氨酸的生产成本，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114085801A
公开(公告)日：2022-02-25
申请号：CN202111434507.4
申请日：2021-11-29
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一株生产L‑色氨酸的重组大肠杆菌及其应用。本发明的重组大肠杆菌，命名为大肠杆菌(Escherichia coli)FMME‑TRPD‑A，于2021年11月08日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC M 20211388。本发明的Escherichia coli FMME‑TRPD‑A可抵抗高浓度L‑色氨酸的反馈抑制，且具有较好的传代稳定性，在传代12代之后，其L‑色氨酸的生产能力均能够稳定在一定水平，通过过表达色氨酸合成路径中的关键酶，以提高色氨酸产量；在摇瓶水平上发酵生产L‑色氨酸产量达3.01g/L，在发酵罐水平上发酵生产L‑色氨酸产量达55.2g/L。本发明发酵生产L‑色氨酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN113293120A
公开(公告)日：2021-08-24
申请号：CN202110535802.2
申请日：2021-05-17
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12N1/21 , C07K14/245 , C12N9/02 , C12N9/04 , C12N9/10 , C12N9/16 , C12N15/70 , C12P7/44 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一株产己二酸的重组大肠杆菌的构建及应用，属于发酵工程技术领域。本发明首先以Escherichia coli ATCC 8739为出发菌株，利用代谢工程手段构建了己二酸合成路径，其次通过辅因子再生系统、RBS工程等策略对该合成路径进行优化，最后经发酵条件的优化提高了己二酸产量，达1.32g/L。本发明不仅为生产较高碳链数的二元羧酸或其他功能性有机酸提供一种新思路，同时也会利用食品废弃物生产高附加值化学品提供了新方法，具有较好发展前景，有利于用于工业化生产。
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