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公开(公告)号：CN118726220A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202411030305.7
申请日：2024-07-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产L‑缬氨酸的谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明在谷氨酸棒杆菌中过表达了谷氨酸棒杆菌本源的转酮酶(tkt)，对丙酮酸脱氢酶(aceE)第一位核苷酸进行了由A突变为G的替换，并过表达了谷氨酸棒杆菌本源磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(pck)，富集了丙酮酸池，增强了L‑缬氨酸生产的碳流，构建了高效的L‑缬氨酸生产菌株。本发明构建的重组菌VL‑7在5L发酵罐发酵44h的L‑缬氨酸积累量达100.8g L‑1，转化率为46.1％，生产强度为2.29g/L/h。
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公开(公告)号：CN118460485A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410553982.0
申请日：2024-05-07
Applicant: 山东凯密斯新材料科技有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用于生产L‑天冬酰胺的天冬酰胺合成酶A突变体及应用，属于生物工程技术领域。本发明以L‑天冬氨酸和ATP为原料，利用活性被提高的天冬酰胺合成酶A(EcAsnA)突变体进行L‑天冬酰胺的生物合成，整体催化过程简单高效。利用纯化酶进行氨连接反应，L‑天冬酰胺生产强度达到20.28g/L/h。相较于目前能够催化L‑天冬氨酸生成L‑天冬酰胺的亲本，EcAsnAL109K/K58R具有更高的催化效率，其催化活性提升至2603.64U/mg，是亲本的(497.15U/mg)的4.24倍。本发明为快速合成L‑天冬酰胺提供了新的合成方法，为L‑天冬酰胺工业化生产提供了新思路。
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公开(公告)号：CN110951660B
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN201911317890.8
申请日：2019-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株固定CO2产苹果酸的大肠杆菌工程菌的构建及应用，属于发酵领域。所述工程菌是对大肠杆菌Escherichia coli MG1655进行基因工程改造获得的菌；所述基因工程改造为敲除富马酸还原酶基因、富马酸酶基因、乳酸脱氢酶基因和乙醇脱氢酶基因，并游离过表达甲酸脱氢酶、乙酰辅酶A合成酶、酰化乙醛脱氢酶、甲醛裂合酶、二羟基丙酮激酶、苹果酸酶和亚磷酸氧化还原酶，获得菌株GH0407。上述菌株用于发酵生产苹果酸，以CO2和葡萄糖作为共底物厌氧发酵72h，苹果酸产量达到39g/L，得率为1.53mol/mol，原始出发菌株不积累苹果酸。
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公开(公告)号：CN118638842A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202410734672.9
申请日：2024-06-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于转录因子工程提高酵母高渗胁迫耐受能力的方法，属于生物工程技术领域。本发明提供的过表达stb5基因的酿酒酵母工程菌能够在不影响菌株正常生长的情况下提高对高渗胁迫的耐受能力，能够耐受1.2M NaCl，在该浓度下的生物量较野生型菌株显著增加18％且胞内NADPH含量提升18％。本发明构建的酿酒酵母工程菌在高渗胁迫下生长速率较野生型菌株显著增加24％，对高渗胁迫所造成氧化损伤的防御能力显著提高，有利于提高酵母发酵产品的产量。
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公开(公告)号：CN118497098A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410734747.3
申请日：2024-06-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产琥珀酸重组大肠杆菌的构建方法及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过转录组分析筛选，得到有效靶点aaeA，进一步通过在E.coli FMME‑N‑5中过表达aaeA基因，采用启动子、RBS以及拷贝数优化调节aaeA的表达水平，构建了工程菌株E.coli FMME‑N‑5‑aaeA。将本发明构建的重组大肠杆菌采用两阶段发酵策略发酵72h，琥珀酸产量可达150.76g/L，全阶段琥珀酸得率达0.90g/g葡萄糖，生产强度2.09g/L/h，副产物甲酸不积累，乳酸、乙酸低于5g/L，菌株不含质粒，不存在质粒丢失的风险，发酵时不加入抗生素，具有应用于工业化生产的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110951660A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911317890.8
申请日：2019-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株固定CO2产苹果酸的大肠杆菌工程菌的构建及应用，属于发酵领域。所述工程菌是对大肠杆菌Escherichia coli MG1655进行基因工程改造获得的菌；所述基因工程改造为敲除富马酸还原酶基因、富马酸酶基因、乳酸脱氢酶基因和乙醇脱氢酶基因，并游离过表达甲酸脱氢酶、乙酰辅酶A合成酶、酰化乙醛脱氢酶、甲醛裂合酶、二羟基丙酮激酶、苹果酸酶和亚磷酸氧化还原酶，获得菌株GH0407。上述菌株用于发酵生产苹果酸，以CO2和葡萄糖作为共底物厌氧发酵72h，苹果酸产量达到39g/L，得率为1.53mol/mol，原始出发菌株不积累苹果酸。
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公开(公告)号：CN106591342B
公开(公告)日：2019-05-10
申请号：CN201611046752.7
申请日：2016-11-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种苹果酸酶重组菌的构建方法，包括以下步骤：对NADP依赖型苹果酸酶基因进行突变，得到苹果酸酶突变基因；将苹果酸酶突变基因与载体连接，然后在宿主菌中重组表达，得到苹果酸酶重组菌；本发明同时还请求保护采用上述方法构建的苹果酸酶重组菌以及一种生产L‑苹果酸的方法，包括以下步骤：将上述苹果酸酶重组菌在发酵培养基中进行好氧发酵；当苹果酸酶重组菌生长至OD600为0.4‑0.8时，进行诱导，然后再进行微好氧发酵。本发明所获得的苹果酸酶重组菌具有较高的催化丙酮酸羧化反应的能力，可显著提高菌体生产苹果酸的能力。
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公开(公告)号：CN105400711B
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201511018190.0
申请日：2015-12-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的公开了一株产L‑苹果酸的酿酒酵母工程菌的构建及应用，属于发酵工程领域。本发明在高产丙酮酸的菌株S.cerevisiae tTAMΔura3Δtrp1中过量游离表达源于Aspergillus flavus ATCC13697的丙酮酸羧化酶(Afpyc)、苹果酸脱氢酶(Afmdh)和苹果酸转运蛋白(Afmae)基因，构建了苹果酸积累路径，获得菌株W1101。上述菌株用于发酵生产L‑苹果酸，发酵84h，其苹果酸产量为27.3g/L，而原始出发菌株不积累苹果酸，这将高产L‑苹果酸菌株黄曲霉的代谢路径成功应用于酿酒酵母，为高产L‑苹果酸菌株的构建提供了一种新策略。
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公开(公告)号：CN119875976A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202510074765.8
申请日：2025-01-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株产结冷胶菌株的选育及用该菌株或其重组菌株发酵法生产结冷胶，属于生物技术领域。本发明筛选了一株少动鞘氨醇单胞菌(sphingomonas paucimobilis)FMME‑GG374，保藏号为CCTCC M 20242350，利用Crispr‑Cas9工具对其进行基因编辑，分别或同时整合结冷胶合成路径关键基因gelK、gelA、gelL至副产物路径基因ldhA、poxB、crtI位点，获得了高产结冷胶的重组菌株。本发明同时公开一种采用该菌株或其重组菌株发酵生产结冷胶的方法，在15L发酵罐中采用本方法发酵60h结冷胶的产量为20.0g/L。
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公开(公告)号：CN119662435A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411892199.3
申请日：2024-12-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株产L‑乳酸的重组马克斯克鲁维酵母的构建及应用，属于微生物技术领域。本发明通过代谢工程改造策略，敲除编码丙酮酸脱羧酶基因、细胞色素氧化酶基因与丙酮酸脱氢酶基因，并整合三个拷贝的植物乳杆菌来源的乳酸脱氢酶，得到了一株L‑乳酸高产菌株FMME‑LA05。在摇瓶水平L‑乳酸产量可达到130g/L及以上，在5L发酵罐L‑乳酸产量可达到140g/L以上，光学纯度达到99％以上，且具备良好的遗传稳定性，适用于工业化生产。
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